酶联免疫吸附实验
酶联免疫斑点技术(Elispot)特点: 酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linked Immunospot Assay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。 实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。LabEx提供MSD超敏电化学发光平台服务!酶联免疫吸附实验
Q:多因子实验还用的样本类型有可些? A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/ Tissue lysate(细胞/组织裂解液)、Cerebrospinal Fluid(脑脊液)、 BronchoalveolarLavage Fluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、Fluid PeritonealFluid (腹腔液)等等。 Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测? A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。 Q:为什么要做预实验? A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。 预实验主要目的∶ 1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。 2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。 3.让研究者在正式实验中有选择的依据。 Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗? A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶 血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。 olink细胞因子检测液态流式技术(Luminex),流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等。
基于MSD平台 的电化学发光超敏多因子检测技术 MSD(Meso Scale Discovery)原理: MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESO Sector 600或Quickplex SQ 120。通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可 实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里 定制实现100指标/孔的筛选检测。 特点: 1、更高灵敏度与更宽的线性范围:灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6 log。 2、节省样本用量,可实现多重检测:上样量≤25ul,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。 3、均一性、重复性高:板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长时间研究项目,提供了使用同一批号试剂的可能性。 4、样本兼容度高,基质效应小 5、实验流程简便、快速、多元化 6、信号稳定且不受显色顺序影响 7、开放性平台,高载量的石墨电极,多样化实验方案,更节省的包被用量。
液态流式技术(Luminex)特点: 多重检测:理论上可同时检测100种生物靶标。 节省样品:只需低至25μl的样品体积。 高灵敏度:精确定量下限低至0.1pg/mL。 应用范围 应用领域:免疫、炎症、心血管疾病、肿块物研究、肾、代谢、神经、细胞间作用。 分析物类型:细胞因子、炎症因子、趋化因子、粘附因子、脂肪因子、血管生成蛋白、肿块物标记物、基质金属蛋白酶、基质金属蛋白酶抑制剂。 其他应用:信号通路、重大疾病相关、Biomarker 开发、临床应用。 LabEx,多因子实验服务专家!
液相悬浮芯片技术产品 多因子技术可同时检测多个样本的多个指标,如通路中多个相关蛋白的共检测。 虽然液相蛋白定量检测的技术很多,但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测,同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测,操作繁琐,且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户,传统的技术无法满足需要。日常实验中,常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测,如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析,由于这些因子的含量较少,低于一般常规方法的检测下限,使用常规的蛋白检测方法如Western Blot等很难检测。 而多因子技术样本需求量少(25~60μL/孔),检测指标多,可兼容血清/血浆,细胞上清,细胞/组织裂解液,脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高(部分panel可达到亚fg/ml),宽线性范围(达到6个log),具有高重复性(板内CV< 6-8%,板间< 10%,批间< 15% ),适宜多类型指标的同时测定(炎症,趋化,代谢……)。 PCR Array:用于检测生物学功能相关的一系列基因的表达量变化,发现变化比较明显的标志性基因。I-TAC elisa kit检测服务
电化学发光,一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,是电化学和化学发光两个过程的完美结合。酶联免疫吸附实验
抗体蛋白质芯片技术(Sengenics)优势 1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护 2、特异性 蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位,可用于自身抗体结合(90% 的抗体表位是非线性的)。与显示低信噪比的其他阵列相比,这会带来特定的命中和低背景噪音。 3、检测限<10pg/ml 蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体,只需要 1 - 10 μL 血清。检测限在10 pg/ml 范围内,线性动态范围至少为 5个数量级。 4、高重复性 Sengenics 蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的 6524 个蛋白质数据点的自身抗体水平时,0.97以上的近乎完美 的 Pearson 相关性。 5、一致性高 Sengenics KREXTM 蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了 Immunome 蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%) 百分比。Immunome的平均 CV% 为 7.2%。酶联免疫吸附实验
上海乐备实生物技术有限公司是一家从事生物科技、生物制品、医药科技领域的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,检验技术的研发,从事货物及技术的进出口业务,化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、易制毒化学品)、实验室耗材与设备的销售。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司,是一家集研发、设计、生产和销售为一体的专业化公司。乐备实生物深耕行业多年,始终以客户的需求为向导,为客户提供高品质的标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务。乐备实生物始终以本分踏实的精神和必胜的信念,影响并带动团队取得成功。乐备实生物始终关注自身,在风云变化的时代,对自身的建设毫不懈怠,高度的专注与执着使乐备实生物在行业的从容而自信。
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