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LUMINEX常见问题及解答（一） 1) LUMINEX应用于哪些领域? 生物医学研究，生物标记物开发，临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。 2) LUMINEX敏感性如何？ 灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对，Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。 3) 对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的？ 血清、血浆是常用的样本，每次检测需要10ul， 每次可以检测多个蛋白。 从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测，制备方法与ELISA、Western Blot完全一样。 4) 一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息？ 检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。 蛋白质检测目前可以达到50个左右，基因检测可达500个。 5) 如何保证检测结果的特异性？ 检测的特异性取决于抗体高特异性。 试剂几乎全部来源于美国大公司，产品经过了严格的质量控制。同时，我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。 LabEx年多因子检测样本量达20w+！flowjo软件分析凋亡图

找到信号通路的关键节点是复杂且耗时耗力的，抗体芯片试剂盒可以在一个实验室里监测信号通路中众多关键信号组分的变化，为您节省宝贵的时间和试剂！ 每个试剂盒有2张玻片，每张玻片上有8或16张垫片，可同时检测达32个样本，这样可使研究者在一次实验里有充分的自由度来检测多种浓度，细胞系或时间节点的样本！ 抗体芯片基于夹心法ELISA原理进行设计，将众多信号通路关键节点蛋白的捕获抗体布于样品孔内做成抗体点阵，随后加入相应的识别抗体混合物，再利用两种不同的显色方式呈现结果，即化学发光法和荧光法检测！ 蛋白芯片技术应用在自身抗体流式细胞术(flow cytometry，FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。

多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。

抗体芯片技术服务包括： 1.样品蛋白质抽提: a.实验对象为组织样品，取适量（250~500mg）新鲜组织样品或正确保存的组织样品，加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂，匀浆后抽提总蛋白。 b.实验对象为细胞样品，每份样品取1×106～1×107细胞，PBS清洗细胞，去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。 c.实验对象为血清，则直接进入步骤3。 2.蛋白质定量：按蛋白质定量试剂盒操作说明操作，测定样品浓度。 3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育 a.细胞因子抗体芯片封闭后加入 50－500ug蛋白质（若标本为血清，通常取100ul血清）与抗体芯片4℃孵育过夜。 b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。 4.抗体芯片检测 5.提供实验报告: 包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。 您只需提供保存完好的标本（血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本），本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。 LabEx提供高通量蛋白组学（Olink）服务！

酶联免疫斑点技术（Elispot）技术优势 (1) 单细胞水平，活细胞功能检测：弥补了体液中CK半衰期短的不足，当体液中某CK含量较低时,用ELISPOT 法检测具有较高灵敏性。 (2) 操作简便经济，可以进行高通量筛选：既可检测自发分泌细胞，又可检测抗原特异性CK分泌细胞，具有较高特异性，并可观察药物治疗反应，且使对CSF中T、B细胞研究成为可能，对神经免疫疾病发病机制研究及临床疗效观察均有重要价值。 (3)灵敏度高：在一百万个阴性细胞中只要有一个分泌细胞因子的阳性细胞即可被检测出来。灵敏度比传统ELISA方法高2-3个数量级。LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技术服务！flowjo软件分析凋亡图

LabEx多因子检测技术应用。flowjo软件分析凋亡图

液态流式技术(Luminex) 流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等，是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式 原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体，多指标并行分析，可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子; 具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点；可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。 基本原理： 应用微球和流式细胞仪的原理，微球内部含有三种免疫荧光，通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用 来检测一种不同的蛋白或基因。因此，利用微球技术，可以同时检测高达100个蛋白或基因。 Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对 不同目标分子的特异性抗体，不同的微球在一定程度上可以自由组合，这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多 目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间，并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。flowjo软件分析凋亡图

上海乐备实生物技术有限公司致力于医药健康，以科技创新实现***管理的追求。乐备实生物深耕行业多年，始终以客户的需求为向导，为客户提供***的标志物筛查，多因子检测，Luminex检测，MSD技术服务。乐备实生物继续坚定不移地走高质量发展道路，既要实现基本面稳定增长，又要聚焦关键领域，实现转型再突破。乐备实生物始终关注医药健康市场，以敏锐的市场洞察力，实现与客户的成长共赢。