TNFRSF10B

时间:2022年05月10日 来源:

液态流式技术(Luminex) 流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为中心,集流式 原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,可一管同时准确定量检测2-100种不同的生物分子; 具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点;可用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体、配体识别分析等多方面、多领域的研究。 基本原理: 应用微球和流式细胞仪的原理,微球内部含有三种免疫荧光,通过荧光不同的比例可以区分100种不同的微球。每种微球可以用 来检测一种不同的蛋白或基因。因此,利用微球技术,可以同时检测高达100个蛋白或基因。 Luminex技术的测量结果在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平。Luminex应用的荧光编码微球带有针对 不同目标分子的特异性抗体,不同的微球在一定程度上可以自由组合,这样在一次实验中可以同时完成多个目标分子的分析。多 目标分子的同时测定可以减少生物样品的消耗量,节省成本和测定时间,并且使多种目标分子之间相关性的分析更加准确。LabEx 样本制备平台:以P2细胞房,磁珠分选,gentleMACS,为下游实验提供样本。TNFRSF10B

抗体芯片技术服务包括: 1.样品蛋白质抽提: a.实验对象为组织样品,取适量(250~500mg)新鲜组织样品或正确保存的组织样品,加1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂,匀浆后抽提总蛋白。 b.实验对象为细胞样品,每份样品取1×106~1×107细胞,PBS清洗细胞,去PBS加0.1ml-1ml含蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂抽提总蛋白。 c.实验对象为血清,则直接进入步骤3。 2.蛋白质定量:按蛋白质定量试剂盒操作说明操作,测定样品浓度。 3.细胞因子抗体芯片封闭和抗体孵育 a.细胞因子抗体芯片封闭后加入 50-500ug蛋白质(若标本为血清,通常取100ul血清)与抗体芯片4℃孵育过夜。 b.加入标记好的抗体室温孵育1小时。 4.抗体芯片检测 5.提供实验报告: 包括详细的实验方法和芯片实验结果的各种图表和数据比较。 您只需提供保存完好的标本(血清、组织或细胞、细胞上清或其他非常规液质生物样本),本公司专业的技术服务人员就可替您完成实验操作与数据分析。 TNFRSF10B蛋白分析实验技术——MSD超敏电化学发光平台。

基于流式平台CBA: CBA(Cytometric Bead Array),即微量样本多指标流式蛋白定量技术是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法,它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。 CBA的原理 通过利用一系列带有荧光标记的微小、分散的微球连接特定的捕获抗体以捕捉溶液系统中的待测物,通过对应各种不同检测物的特异微球上所带有荧光强度不同从而同时测定分析样本中多种可溶性成分的数量。 CBA的特点: 1. 能够同时对单个样本进行多种检测。 2. 较传统检测节省样本量9倍。 3. 灵敏度高、重复性好。 4. 所有分析只需一组标准曲线。 5. 避免酶联反应所致人工假象。 6. 节省操作和检测时间。

Luminex——液相芯片检测实验技术服务 特点: 1、既能检测蛋白,又能检测核酸。 2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域。 3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标。 Luminex——液相芯片检测实验技术服务 适宜领域: 1、临床:肿块物标记物检测-流式荧光免疫法 HPV的检测-流式荧光杂交法 2、疾控系统:流行病监测等 3、血站系统:HLA分型检测 4、自身免疫诊断相关检测、心血管疾病相关因子检测、糖尿病指标检测,骨代谢检测、内分泌检测等CBA,细胞因子微球检测技术,是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法。

问:因子检测技术有哪些? 答: Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。 问:多因子实验适用的样本类型有哪些? 答: Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/ Tissue lysate(细胞/组织裂解液)、Cerebrospinal Fluid(脑脊液)、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。 问:如何计算96孔板可做多少样本? 答: 标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本; 问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测? 答: 可以,但是有如下要注意: (1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。 (2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。 (3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,建议是4的倍数,否则会造成浪费。 LabEx多因子检测技术(包括luminex、MSD等),所需样本量少,检测指标丰富。FGF-basic

生物标志物开发与研究。TNFRSF10B

多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramide signal amplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料Alexa Fluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。 简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。 然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。 TNFRSF10B

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