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时间:2022年06月30日 来源:

酶联免疫吸附实验(ELISA)即将已知的抗原或抗体吸附在固相载体表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行的技术。基本原理:它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于订量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。LabEx提供PCR芯片(PCR Array)技术服务!p信号通路

酶联免疫斑点技术(Elispot)LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步!随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用,使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时,以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同,使之在体液中不断地被代谢,而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外较广的应用,对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。p信号通路PCR Array:用于检测生物学功能相关的一系列基因的表达量变化,发现变化比较明显的标志性基因。

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,建议是4的倍数,否则会造成浪费。LabEx现有MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。

抗体芯片介绍:ELISA原理的高通量WB,单一样品多种分析物的检测。具有微型化、集成化、高通量的特点,可以用于检测某一特定的生理或病理过程相关蛋白的表达丰度,目前主要用于信号转导、蛋白组学、肿块物及其他疾病的相关研究。R&D的多因子固相抗体芯片•每个试剂盒可检测4个样本,每个样本可同时检测多达119个分析物,实验可在一日内完成•每个试剂盒提供4张膜,膜上监测点以复孔的形式包被捕获抗体和对照抗体•该即用型试剂盒包含抗体膜,检测抗体和缓冲液等所有组分优势和特点•使用方便,节省时间和成本•无需专门设备•高通量:1天所得到的数据相当于免疫印迹几周所得数据•样本类型多样化•每种试剂盒均验证过多种样本,如细胞裂解液,组织裂解液,细胞培养上清,血清,血浆,唾液,尿液或牛奶等•节省样本•获取相同数据点所需样本量远低于WB•比竞争对手抗体芯片所需样本量更少,获得的数据更多LabEx提供28种抗体芯片,用于人,小鼠和大鼠物种的蛋白检测相关服务,我们为您提供完整的实验结果报告,包括数据分析结果,原始数据文件,实验protocol等。LabEx提供单细胞功能组学(IsoPlexis)服务!信号通路磷酸化说明什么

LabEx 因子检测技术有Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD等。p信号通路

LUMINEX常见问题及解答(一)1)LUMINEX应用于哪些领域?生物医学研究,生物标记物开发,临床检测等领域。Luminex技术主要用于蛋白和核酸检测分析。2)LUMINEX敏感性如何?灵敏度取决于开头的质量。对于同样的抗体对,Luminex检测的灵敏度高于ELISA技术。一般检测灵敏度在pg级。3)对不同类型的样品制备和样品量的要求是怎样的?血清、血浆是常用的样本,每次检测需要10ul,每次可以检测多个蛋白。从各种细胞或组织中提取的蛋白也可以用Luminex技术检测,制备方法与ELISA、WesternBlot完全一样。4)一般可以检测到多少基因或蛋白的表达信息?检测蛋白和基因的数目主要取决于试剂盒。蛋白质检测目前可以达到50个左右,基因检测可达500个。5)如何保证检测结果的特异性?检测的特异性取决于抗体高特异性。试剂几乎全部来源于美国大公司,产品经过了严格的质量控制。同时,我们检测公司也有近15年的经验、严格的操作程序和质量控制体系。p信号通路

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