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时间:2022年07月06日 来源:

酶联免疫斑点技术(Elispot)LabEx始终致力于为您的研究需要,提供前沿的多因子技术平台,用心服务,现有囊括基因、蛋白、组织、细胞水平包括PCRArray、ELISA,MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式、mIHC及HALO分析等12个专业的实验室技术平台,助推科研进步!随着酶免疫分析技术在医学及生物学领域的较广的应用,使体外检测各种细胞因子和抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时,以往人们常用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测体液中游离的细胞因子(CK)或抗体,但由于游离的循环抗体或CK半衰期不同,使之在体液中不断地被代谢,而不能确切地反应体内抗体及CK水平。80年代中期等根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点(ELISPOT)技术,因其具有较高的特异性和敏感性,目前正被国内外较广的应用,对探索自身免疫系统疾病发病机制具有重要意义。LabEx 药物筛选平台:激酶抑制剂筛选,免疫检查点,GPCR,抗体药研发,蛋白互作。IgG2

Q:多因子实验还用的样本类型有可些?A:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)、FluidPeritonealFluid(腹腔液)等等。Q:多因子实验中血清好检测,还是血浆好检测?A:文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验,具体需研究者根据自己实际条件选择。Q:为什么要做预实验?A:试剂说明书中的样本稀释比例不精确,需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例,让尽可能多的因子在检测范围内,从而提高检出率。2.避免样本浓度过高,导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q:血清血聚溶血,对实验结果有形响吗?A:肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的,轻微溶血都是可以接受,但从溶血的严重程度看区别较大,样本普遍存在些许溶血情况,从目前文献上看没有明确的数据支持。IL1ALabEx提供流式多因子检测技术(CBA)服务!

酶联免疫斑点技术(Elispot)特点:酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。

肿块物(瘤类)发病机制中的细胞因子(内源性及相关功能):Il-1(白介素1):肿块物侵袭和血管生成所必需的IL-6(白介素6):化学诱导的淋巴瘤所需IL-12(白介素12):抑制化学致肿块物作用IL-15(白介素15):促进自然杀伤T细胞白血病IFN-γ:抑制化学致肿块物作用;抑制淋巴瘤;Stat1和Rag2抑制肿块物M-CSF:促进乳腺肿块物侵袭GM-CSF:抑制淋巴瘤和肿块物TNF-α:化学诱发的皮肤肿块物所需MIF:抑制p53肿块物抑制功能TGF-β:抑制结肠肿块物Fas-Fasligand:抑制淋巴瘤发生LabEx提供 MSD---电化学发光技术。

抗体蛋白质芯片技术(Sengenics)优势1、包被蛋白具有正确折叠的空间结构/芯片表面水凝胶保护2、特异性蛋白质阵列上正确折叠的蛋白质可确保构象表位,可用于自身抗体结合(90%的抗体表位是非线性的)。与显示低信噪比的其他阵列相比,这会带来特定的命中和低背景噪音。3、检测限<10pg/ml蛋白质阵列可用于以极高的灵敏度检测自身抗体,只需要1-10μL血清。检测限在10pg/ml范围内,线性动态范围至少为5个数量级。4、高重复性Sengenics蛋白质阵列使用多个阳性和阴性对照来测量研究和批次内和之间的重复性。下图显示在比较两个不同批次中的6524个蛋白质数据点的自身抗体水平时,0.97以上的近乎完美的Pearson相关性。5、一致性高SengenicsKREXTM蛋白质折叠技术用于创建具有一致性的蛋白质阵列。下图显示了Immunome蛋白质阵列的蛋白质内复制变异系数(CV%)百分比。Immunome的平均CV%为7.2%。LabEx提供 细胞因子与信号通路蛋白多指标检测。RAET1E

MSD平台由于其独特的电化学发光原理,可将许多非特异信号予以排除,受样本性质的影响更小。IgG2

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。IgG2

上海乐备实生物技术有限公司总部位于古丹路15号18号楼4楼,是一家从事生物科技、生物制品、医药科技领域的技术开发、技术咨询、技术转让、技术服务,检验技术的研发,从事货物及技术的进出口业务,化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、易制毒化学品)、实验室耗材与设备的销售。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司。乐备实生物拥有一支经验丰富、技术创新的专业研发团队,以高度的专注和执着为客户提供标志物筛查,多因子检测,Luminex检测,MSD技术服务。乐备实生物致力于把技术上的创新展现成对用户产品上的贴心,为用户带来良好体验。乐备实生物始终关注医药健康行业。满足市场需求,提高产品价值,是我们前行的力量。

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