植物信号通路
多重荧光免疫组化,主要的技术原理来自TSA技术,TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification),是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,然后去检测结果。LabEx MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪。植物信号通路
本panel可检测以下因子:BDNF,CCL3/MIP-1 alpha,DPPIV/CD26,EN-RAGE/S100A12,ErbB2/Her2,ErbB3/Her3,FGF acidic/FGF1,FGF basic/FGF2/bFGF,FGF-13,Follistatin-like 1/FSTL1,Galectin-3BP/MAC-2BP,GM-CSF,gp130,Growth Hormone,ICAM-1/CD54,IFN-gamma,IL-1 alpha/IL-1F1,IL-1 beta/IL-1F2,IL-1ra/IL-1F3,IL-2,IL-5,IL-7,IL-12 p70,IL-17/IL-17A,IL-28B/IFN-lambda 3,IL-36 beta/IL-1F8,Insulin,Kallikrein 5,Kallikrein 6/Neurosin,LBP,Leptin/OB,LIF,MCAM/CD146,Mesothelin,MIA,MMP-3,Nephrin,PDGF-BB,PlGF,Prolactin,Proteinase 3/Myeloblastin/PRTN3,S100B,P-Selectin/CD62P,SLPI,u-Plasminogen Activator (uPA)/Urokinase,Uromodulin,VEGF 种属:Human信号通路图绘制软件本panel可检测以下因子:GLP-1 (active),Glucagon 种属:Mouse。
LabEx多因子检测技术--液相悬浮技术经典炎症十因子、高通量细胞因子初筛液相悬浮芯片:高度特异的捕获单克隆抗体偶联到不同荧光标记的磁珠上,将不同种类磁珠混合后悬浮于96孔微孔板中。进一步加入生物素标记的高亲和配对二抗结合SA-PE进行信号放大,以实现对多种微量细胞因子的有效检测。利用梯度稀释的标准品检测信号构建标准曲线,实现大量目标样本中多因子的同时检测和准确定量。特点1、既能检测蛋白,又能检测核酸2、既能用于临床,又能用于多学科科研领域3、真正意义的“高通量”检测,一次检测100个指标4、在准确度、精确度、灵敏度方面与ELISA均可达到相似的水平
多重荧光免疫组化技术优势1.由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。2.TSA技术可以用于检测用传统方法无法检出的低丰度靶标。基于酪酰胺的信号放大技术能够提供极强的敏感度、检测极微量的目的抗原。极大的降低抗体的用量,节约抗体,实测确实可以提升抗体的稀释比例。3.荧光法多重免疫组化,可同时进行五个颜色通道以上,这种情况下发射光谱会重叠,我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所做不到的。这种方法能真实反映关键蛋白的表达情况和相互之间的关系,从而极大地节约珍贵的样品。本panel可检测以下因子:GM-CSF,IFN-γ,IL-2,IL-4,IL-5,IL-10,IL-12(p70),TNF-α 种属:Mouse。
炎症相关的生物标志物包括:(1)肠道微生物因子:肠道菌群可能受到饮食,益生菌,益生元,外源酶,粪便菌群移植和其他环境因素的影响(2)免疫相关:肠道菌群驱动炎症的扩大,细胞浸润固有层,包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子,包括TNF,IL-1β,IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。(3)炎症介质:如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子(如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β)等。本panel可检测以下因子:AFP,ANGPTL3,ANGPTL4,ANGPTL6/AGF,FABP1,FGF-19,FGF-21,FGF-23,HGF 种属:Human。流式细胞分选 步骤
本panel可检测以下因子:IFN-γ,IL-10,IL-1β,IL-6,TNF-α,IL-17A 种属:Mouse。植物信号通路
产生组织切片非特异性染色的原因有哪些?如何解决?1)、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是尤其重要的一条。2)、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色,建议试用单克隆抗体看看。3)、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高(含血细胞多的组织),需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景染色;4)、非特异性组分与抗体结合,这需要通过延长二抗来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果;5)、DAB孵育时间过长或浓度过高;6)、PBS冲洗不充分,残留抗体结果增强着色,在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要;7)、标本染色过程中经常出现干片,这容易增强非特异性着色。植物信号通路
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