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时间:2022年08月22日 来源:

酶联免疫斑点技术(Elispot)特点:酶联免疫斑点技术Elispot(Enzyme-linkedImmunospotAssay)。结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(ELISA),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。实验设计在96孔培养板上进行,直接以培养板的塑料板底或者PVDF膜以及硝酸纤维素膜为基质,包被上特异性的单克隆抗体,用以捕获细胞分泌的细胞因子。(由于涉及到细胞培养的过程,对单克隆抗体的要求要远高于ELISA中的捕获抗体,该抗体需要无毒,亲和力高等特点。)之后,在培养板的孔内加入细胞培养基(现在无血清ELISPOT技术已经成熟,培养基中可以不再含有血清)、待检测的细胞以及抗原刺激物进行培养。生物标志物开发与研究。elisa检测服务价格检测服务

问:因子检测技术有哪些?答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问:多因子实验适用的样本类型有哪些?答:Serum(血清)、Plasma(血浆)、Cell/Tissuelysate(细胞/组织裂解液)、CerebrospinalFluid(脑脊液)、BronchoalveolarLavageFluid(支气管肺泡灌洗液)、NasalLavage(鼻腔灌洗液)Fluid、PeritonealFluid(腹腔液)等等。问:如何计算96孔板可做多少样本?答:标曲16孔,预实验8孔,剩余72孔,单孔可做72样本,复孔可做36样本;问:多因子实验的正式实验,是否可以分批次检测?答:可以,但是有如下要注意:(1)CBA:试剂盒须在一个月内用完,否则标准曲线要重做,重做就要用到试剂,那样本就样减少。(2)Luminex:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂也要在一个月内用完,防止试剂过期。(3)MSD:每次都必须要做标准曲线,会浪费试剂和孔板,同时试剂在一个月内用完,防止试剂过期,每次送样+标准曲线的数量,比较好是4的倍数,否则会造成浪费。msd多因子检测金标准LabEx多因子检测:luminex平台**pannel,筛选验证同步进行,省时省力。

Q:样本处理方案?A:血清:不含抗凝剂的**管**,室温静置2小时(避免震动,防止溶血),离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存血浆:含抗凝剂(EDTA、肝素,具体采取哪种抗凝剂,参考说明书)的**管**,,离心20min(4℃,2000g),取上清,建议再一次离心和取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存细胞裂解液:收集细胞,PBS清洗后,离心10min(1000g,4℃),弃去上清,加入适量裂解液(107细胞对应200-300ul裂解液),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存组织裂解液:适量RIPA裂解液加入组织中(10mg对应100-200ul裂解液),组织破碎器处理组织至匀浆(冰上处理),放置于4℃冰箱(20min),离心10min(3000g,4℃),取上清,建议再一次离心和取上清,测定BCA总蛋白浓度,-80℃保存细胞上清:离心,取上清,建议分装后-80℃冻存,避免反复冻存

找到信号通路的关键节点是复杂且耗时耗力的,抗体芯片试剂盒可以在一个实验室里监测信号通路中众多关键信号组分的变化,为您节省宝贵的时间和试剂!每个试剂盒有2张玻片,每张玻片上有8或16张垫片,可同时检测达32个样本,这样可使研究者在一次实验里有充分的自由度来检测多种浓度,细胞系或时间节点的样本!抗体芯片基于夹心法ELISA原理进行设计,将众多信号通路关键节点蛋白的捕获抗体布于样品孔内做成抗体点阵,随后加入相应的识别抗体混合物,再利用两种不同的显色方式呈现结果,即化学发光法和荧光法检测!PCR Array:用于检测生物学功能相关的一系列基因的表达量变化,发现变化比较明显的标志性基因。

酶联免疫吸附实验(ELISA)优势:灵敏度高该测定法的灵敏度来自作为报告基团的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。ELISA实现了在细胞或亚细胞水平上示踪抗原或抗体的所在部位,或在微克、甚至纳克水平上对其进行定量。特异性强其特异性来自抗体或抗原的选择性。抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由千两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。LabEx现有MSD、Luminex、CBA,抗体芯片、多色流式及ELISA等实验室技术平台。IL-12/IL-23p40 elisa kit检测服务

流式细胞术(flow cytometry,FCM)是一项新型的、发展迅速的生物医学分析技术。elisa检测服务价格检测服务

基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD(MesoScaleDiscovery)原理:MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术,在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围:灵敏度可达0.05pg/ml,有效线性范围达6log。2、节省样本用量,可实现多重检测:上样量≤25ul,为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高:板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月,为长时间研究项目,提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高,基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台,高载量的石墨电极,多样化实验方案,更节省的包被用量。elisa检测服务价格检测服务

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