流式细胞结果分析

蛋白分析实验技术1、MSD超敏电化学发光平台针对550位北美和欧洲的生物医药研究人员的报告中显示，基于电化学发光技术的MSD(MesoScaleDiscovery)是较受欢迎的5大免疫分析品牌之一。可将WesternBlot从16小时缩短至4.5小时。基本原理：电化学发光是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。MSD电化学发光检测技术使用SULFO-TAGTM标记物，在MULTI-ARRAY和MULTI-SPORT微孔板的电极表面通电后，电化学作用激发SULFO-TAGTM标记物发出强光。多因子技术样本需求量少，检测指标多，可兼容血清，裂解液，脑脊液等多种生物学体液。流式细胞结果分析

基于MSD平台的电化学发光超敏多因子检测技术MSD（MesoScaleDiscovery)原理：MSD电化学发光技术主要基于超敏多因子电化学发光分析仪MESOSector600或QuickplexSQ120。通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测。也可在24孔板里定制实现100指标/孔的筛选检测。特点:1、更高灵敏度与更宽的线性范围：灵敏度可达0.05pg/ml，有效线性范围达6log。2、节省样本用量，可实现多重检测：上样量≤25ul，为珍稀样本的研究提供了更多的数据。3、均一性、重复性高：板内CV<6-8%,板间<10%,批间<15%。同时MSD试剂盒有效期长达30个月，为长时间研究项目，提供了使用同一批号试剂的可能性。4、样本兼容度高，基质效应小5、实验流程简便、快速、多元化6、信号稳定且不受显色顺序影响7、开放性平台，高载量的石墨电极，多样化实验方案，更节省的包被用量。ras mapk信号通路检测服务LabEx 因子检测技术有Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD等。

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少（25~60μL/孔），检测指标多，可兼容血清/血浆，细胞上清，细胞/组织裂解液，脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高（部分panel可达到亚fg/ml），宽线性范围（达到6个log），具有高重复性（板内CV<6-8%，板间<10%，批间<15%），适宜多类型指标的同时测定（炎症，趋化，代谢……）。

炎症相关的生物标志物包括:（1）肠道微生物因子：肠道菌群可能受到饮食，益生菌，益生元，外源酶，粪便菌群移植和其他环境因素的影响（2）免疫相关：肠道菌群驱动炎症的扩大，细胞浸润固有层，包括T细胞、B细胞、巨噬细胞、树突状细胞(DCs)和中性粒细胞;活化的固有层细胞产生高水平局部组织促炎细胞因子，包括TNF，IL-1β，IFN-γ和IL-23/Th17细胞途径。（3）炎症介质：如自由基、白三烯,趋化因子和促炎细胞因子（如IL-12,IL-23,IL-17,IL-18和TGF-β）等。LabEx提供 Luminex---xMAP技术。

流式多因子检测技术(CBA)微球免疫分析系统CBA（CytometricBeadArray）是一个基于流式细胞检测系统的多重蛋白定量检测方法，它能够同时对单个样品中的多个指标进行检测。CBA是种结合流式细胞仪荧光检测和微球免疫分析的应用技术，可以轻松的在短时间内，同时检测多种蛋白，其作用原理利用荧光强度不同的微球，上面带有可以辨认特定蛋白的抗体（captureantibody），与样本（例如血清、血浆、培养上清液、细胞裂解液等）及PE检测抗体（detectionantibody）作用后，以流式细胞仪进行分析，根据PE荧光强度的不同用FCAPArray软件进行分析和标准品做比对后，可进行样本内特定，蛋白的定性或定量。CBA具有以下优点：每次检测需25-50ul样本；灵敏度可达0.274pg/ml时间t夬速，需3-4小时，快速上样可同时测定30种蛋白，实验可重复性高利用FCAPArray软件，不论样本数目多少，可快速分析完成分析MSD平台由于其独特的电化学发光原理，可将许多非特异信号予以排除，受样本性质的影响更小。流式细胞结果分析

LabEx 免疫组化平台：包埋，切片，染色，多重荧光组化，以及病理分析（HALO）。流式细胞结果分析

Q：多因子实验还用的样本类型有可些?A：Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、BronchoalveolarLavageFluid（支气管肺泡灌洗液）、NasalLavage（鼻腔灌洗液）、FluidPeritonealFluid（腹腔液）等等。Q：多因子实验中血清好检测，还是血浆好检测?A：文献报道EDTA的血浆适合做多因子实验，具体需研究者根据自己实际条件选择。Q：为什么要做预实验?A：试剂说明书中的样本稀释比例不精确，需要进一步确认。预实验主要目的∶1.确定好较好稀释比例，让尽可能多的因子在检测范围内，从而提高检出率。2.避免样本浓度过高，导致结果不准确。3.让研究者在正式实验中有选择的依据。Q：血清血聚溶血，对实验结果有形响吗?A：肯定有影响。溶血是红细胞破裂导致的，轻微溶血都是可以接受，但从溶血的严重程度看区别较大，样本普遍存在些许溶血情况，从目前文献上看没有明确的数据支持。流式细胞结果分析

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