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多重荧光免疫组化，主要的技术原理来自TSA技术，TSA即酪酰胺信号放大技术(Tyramidesignalamplification)，是一类利用辣根过氧化酶（HRP）对靶蛋白或核酸进行高密度原位标记的酶学检测方法。该技术可与高性能染料AlexaFluor、传统荧光染料和比色检测系统相兼容。简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP（而不是直接偶联荧光素），来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，然后去检测结果。LabEx多因子检测技术－－液相悬浮技术。msd超敏电化学发光分析仪

免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？1)、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高稀释度也没能做出阳性结果？另外，不是抗体浓度越高就越易出现阳性结果，抗原抗体反应有前带和后带效应，必须摸索比较好浓度。2)、抗原修复不全，对于甲醛固定的组织必须用充分抗原修复来打开抗原表位，以利于与抗体结合；建议微波修复用高火4次*6min试试。有人做过实验，这是比较好的时间和次数。若不行，还可高压修复。3)、组织切片本身这种抗原含量低；4)、血清封闭时间过长。5)、DAB孵育时间过短。6)、细胞通透不全，抗体未能充分进入胞内参与反应。7)、开始做免疫组化，我建议你一定要首先做个阳性对照片，排除抗体等外的方法问题。MIF elisa kit检测服务电化学发光，一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应，是电化学和化学发光两个过程的完美结合。

MSD经典10因子推荐：中检院《CAR-T细胞医治产品质量控制检测研究及非临床研究考虑要点》中提到，使用MSD技术检测CAR-T细胞医治后样本中细胞因子表达来评估药物的安全性和有效性。MSD技术－电化学发光和点阵技术MESOSCALEDISCOVERY公司的ECL(基于石墨微孔板的电化学发光免疫分析）技术是基于ELISA基本原理的升级，在板底通电从而激发标记物SULFO-TAG发光并由CCDCamera进行信号采集；MSDECL技术提高免疫分析的灵敏度，延伸了线性范围。MSD通过点阵技术，在96孔石墨电极板里可实现10个指标每孔的检测，同时实现多个指标定量。MSD技术独具一格的“六合一”特点：亚fg/ml灵敏度，低背景，多靶点检测，6个数量级线性范围，适用于不同样本基质（血清／血浆，细胞培养上清，脑脊液，尿液，组织匀浆，细胞裂解液）（人／猴子／小鼠／大鼠）,5-25ul微量样本检测。LabEx提供V-PLEX人、小鼠、大鼠：炎症反应、免疫调节、TH1/TH2通路重要指标多因子组合检测限。试剂我们提供；检测我们来做，助您的时间更有价值！

液相悬浮芯片技术产品多因子技术可同时检测多个样本的多个指标，如通路中多个相关蛋白的共检测。虽然液相蛋白定量检测的技术很多，但是大多数的技术能对样本进行单一指标的检测，同时检测多个指标时则需要提供大量的样本分批检测，操作繁琐，且各指标间差异性较大。对于样本量较少或需要对比各指标的用户，传统的技术无法满足需要。日常实验中，常需对溶液体系中的可溶性蛋白进行定量检测，如细胞培养上清或血清中的细胞因子含量的定量分析，由于这些因子的含量较少，低于一般常规方法的检测下限，使用常规的蛋白检测方法如WesternBlot等很难检测。而多因子技术样本需求量少（25~60μL/孔），检测指标多，可兼容血清/血浆，细胞上清，细胞/组织裂解液，脑脊液等多种生物学体液。其灵敏度高（部分panel可达到亚fg/ml），宽线性范围（达到6个log），具有高重复性（板内CV<6-8%，板间<10%，批间<15%），适宜多类型指标的同时测定（炎症，趋化，代谢……）。LabEx多因子检测：luminex平台热销pannel，筛选验证同步进行，省时省力。

问：因子检测技术有哪些？答:Array抗体芯片、CBA、luminex、MSD。问：多因子实验适用的样本类型有哪些？答:Serum（血清）、Plasma（血浆）、Cell/Tissuelysate（细胞/组织裂解液）、CerebrospinalFluid（脑脊液）、支气管肺泡灌洗液、鼻腔灌洗液、腹腔液等等。问：如何计算96孔板可做多少样本？答:标曲16孔，预实验8孔，剩余72孔，单孔可做72样本，复孔可做36样本；问：多因子实验的正式实验，是否可以分批次检测？答:可以，但是有如下要注意：（1）CBA：试剂盒须在一个月内用完，否则标准曲线要重做，重做就要用到试剂，那样本就样减少。（2）Luminex：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂也要在一个月内用完，防止试剂过期。（3）MSD：每次都必须要做标准曲线，会浪费试剂和孔板，同时试剂在一个月内用完，防止试剂过期，每次送样+标准曲线的数量，建议是4的倍数，否则会造成浪费。生物标志物开发与研究。aav8 titration elisa检测服务

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