海岸分枝杆菌
金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),又称金葡菌,是一种常见的革兰阳性菌,普遍存在于空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中。它是一种生物共患病原菌,可导致人和动物的多种疾病,包括伪膜性肠炎、败血症和脓毒症等,严重威胁人类和动物的生命安全。长期以来,青霉素和甲氧西林普遍用于救治敏感菌引起的传染性疾病。随着抑菌药物的大规模使用以及人类的滥用和不合理使用,耐药菌株层出不穷。金葡菌耐药性较为突出,其中以耐甲氧西林金葡菌(Methicillin-resistantS.aureus,MRSA)危害较大。据报道显示,MRSA传染已经和HBV传染、AIDS并列为世界范围内三大难解决传染性疾病。大肠杆菌的流行性是存在一定的区域分布特征的。海岸分枝杆菌
制备大肠杆菌感受态细胞的关键是什么?质粒DNA的质量和浓度:用于转化的质粒DNA应主要是超螺旋态的,转化率与外源DNA的浓度在一定范围内成正比,但当加入的外源DNA的量过多或体积过大时,则会使转化率下降。一般地,DNA溶液的体积不应超过感受态细胞体积的5%,1ng的cccDNA即可使50ul的感受态细胞达到饱和。对于以质粒为载体的重组分子而言,分子量大的转化效率低,实验证明,大于30kb的重组质粒将很难进行转化。此外,重组DNA分子的构型与转化效率也密切相关,环状重组质粒的转化率较分子量相同的线性重组质粒高10~100倍,因此重组DNA大都构成环状双螺旋分子。嗜盐小单孢菌菌种枯草芽孢杆菌能够促使土壤中的有机质分解成腐殖质,刺激作物生长。
制备大肠杆菌感受态细胞的关键是什么?(1)感受态细胞的质量:所用的CaCl2等试剂均需是至高纯度的,并用至纯净的水配制,建议分装保存于4℃。(2)细胞的生长状态和密度建议从-70℃或-20℃甘油保存的菌种中直接转接用于制备感受态细胞的菌液。不要用已经过多次转接,及贮存在4℃的培养菌液。细胞生长密度以每毫升培养液中的细胞数在5×107个左右为佳。即应用对数期或对数生长前期的细菌,可通过测定培养液的OD600控制。对TG1菌株,OD600为0、5时,细胞密度在5×107个/ml左右。(应注意OD600值与细胞数之间的关系随菌株的不同而不同)。密度过高或不足均会使转化率下降。
枯草芽孢杆菌具有抗逆能力强、易于繁殖,代谢产物丰富,抗类菌谱广,对人畜高度安全等特点,加之收获后果品贮藏条件的可控性,用于果品生物防腐(病原性腐烂)具有特殊优势。枯草芽孢杆菌抗生体制剂有效地控制由链格孢霉、地霉属、指状青霉等致病菌引起的柑桔果腐病,防效在60%以上。枯草芽孢杆菌可湿性粉剂2,000倍液对锦橙储藏具有良好的保鲜效果。同时,枯草芽孢杆菌还能利用在鲜切花保鲜领域。枯草芽孢杆菌在养殖业作用机理主要包括:调节消化道微生态平衡;提高畜禽消化能力;提高畜禽免疫的能力;产生维生素等营养素。枯草芽孢杆菌大量应用于生物肥料。
对于铜绿假单胞菌的检测,要注意将绿假单胞菌检测板上层膜不干胶标签部分揭开,用无菌吸管吸取1毫升样品稀释液均匀滴加到纸片上,迅速贴好上层膜并水平晃动检测板,静置2分钟左右,待样品稀释液完全被吸附在滤纸上。每个稀释度接种两个检测板作为重复。将检测板叠在一起,倒置于恒温培养箱内,36摄氏度~1摄氏度,培养15~24h。铜绿假单胞菌又称绿脓杆菌,是一种常见的条件致病菌,属于非发酵革兰氏阴性杆菌。若为实验室长期保存菌种,因传代频繁可发生无色素变种。较低温甘油保存法和半固体保存法两种方法保存的菌种42摄氏度生长试验阳性,氧化酶阳性,氧化葡萄糖产酸不产气,动力阳性,明较液化试验阳性。购买大肠杆菌时要注意价格是否合理,避免被坑。制酵母链霉菌
如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长,铜绿假单胞菌在液体表面形成菌落。海岸分枝杆菌
葡萄球菌呈球形或椭圆形。直径约0.5--1μm。经常以葡萄串状排列,有时可能散在、成双、短链状存在。没有鞭毛、没有芽孢,体外培养一般不形成荚膜,在体内却可形成荚膜。革兰染色呈阳性。衰老、死亡、被吞噬细胞吞噬、青霉素等药物作用下,菌体可革兰染色阴性。葡萄球菌对营养要求不高,普通培养基生长良好。需氧或兼性厌氧。在18--40℃均可生长。耐盐性强。在含有10%氯化钠培养基中能生长,可用高盐培养基分离菌种。普通琼脂平板上形成圆形,表面光滑湿润,不透明菌落。典型菌株产生脂溶性的金黄色的色素而使菌落呈金黄色。在血琼脂平板上,因金黄色葡萄球菌能产生溶素,在菌落周围形成明显的透明溶血环。海岸分枝杆菌
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