改良Leeming-Notman培养基基础

半组合培养基：指一类主要以化学试剂配制，同时还加有某种或某些天然成分的培养基。例如，马铃薯蔗糖培养基。固体培养基:1．液体培养基：80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。2．固体培养基：一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。3．半固体培养基：指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。4．脱水培养基：又称预制干燥培养基，指含有除水分外的一切成分的商品培养基。培养基可以分为有机培养基和无机培养基两类。改良Leeming-Notman培养基基础

近年来，国内外利用某些细菌特有的酶，选择相应的作用底物，研制出某些细菌专门用的的显色培养基，用于细菌的分离鉴别，收到了良好的效果，这种显色培养基实际上也是鉴别培养基。其基本原理是将色原(或荧光原)与细菌作用底物的结合物加于培养基中，当细菌含有相应酶时，使该结合物分解而显色(或显示荧光)。如色原糖苷结合物在糖苷酶作用下分解，使糖苷与色原分离，并显示颜色；荧光氨基酸结合物(不显荧光)在氨基肽酶作用下，使氨基酸与荧光物质分离而显示荧光。常用显色的色原有α-萘酚、β-萘酚、邻位硝基酚、对位硝基酚、对硝基苯胺、酚酞、2-氨基4-硝基苯等；常用的荧光物有4-甲基伞形酮(又称7-羟基4-甲基香豆素)等。目前，显色培养基已用于多种细菌的分离鉴别培养，如沙门菌、大肠埃希菌、李斯特菌、双歧杆菌和乳酸杆菌、白色念珠菌等显色培养基。KM2猪肺炎支原体肉汤培养基培养基的pH值需要根据不同微生物的生长适应范围进行调节。

培养基，是指供给微生物、植物或动物（或组织）生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐（包括微量元素）、维生素和水等几大类物质。培养基既是提供细胞营养和促使细胞增殖的基础物质，也是细胞生长和繁殖的生存环境。培养基种类很多，根据配制原料的来源可分为自然培养基、合成培养基、半合成培养基；根据物理状态可分为固体培养基、液体培养基、半固体培养基；根据培养功能可分为基础培养基、选择培养基、加富培养基、鉴别培养基等；根据使用范围可分为细菌培养基、放线菌培养基、酵母菌培养基等。培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。培养基由于富含营养物质，易被污染或变质。配好后不宜久置，现配现用。

氨基酸是细胞合成蛋白质的基本成分，氨基酸中有12种是细胞本身不合成的，必须由培养液提供。水解乳蛋白、胶原是另外两种较好的天然培养基成分。水解乳蛋白是乳白蛋白的水解产物，呈蛋黄色粉末状，富含氨基酸。一般配制成0．5%溶液，微酸性。胶原是从动物真皮中提取的，具改善细胞表面特性促使其附着生长的作用。特殊培养基：包括厌氧培养基和细菌L型培养基等。前者是培养专性厌氧菌的培养基，除含营养成分外，还加入还原剂以降低培养基的氧化还原电势，如疱肉培养基、巯基乙醇酸钠培养基等。后者是针对细胞壁缺损的细菌L型，由于胞内渗透压较高，故培养基必须采用高渗低琼脂培养基。常见的培养基包括LB培养基、TSB培养基等。

什么培养基中可以省去加酚红？酚红在培养基中用作pH值的指示剂：中性时为红色，酸性时为黄色，碱性时为紫色。酚红本身对生物制品质量并不会产生影响，可以通过纯化技术去除，但酚红在无血清培养基可能带来胞内钠/钾失衡，影响细胞生长，当然这种作用能被血清所中和或减轻。酚红并不是培养基中必需的一种成分，很多国外的疫苗或抗体生产企业在生产过程中都使用无酚红培养基。研究表明，酚红可以模拟固醇类的作用。为避免固醇类反应，培养细胞，尤其是哺乳类细胞时，用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测，一些研究人员在做流式细胞检测时，不使用加有酚红的培养基。在实际应用过程中，常常需要调整培养基的组成和配方，以优化细胞或微生物的生长和功能表现。溶菌酶营养肉汤基础

有些培养基需要添加血清或其它富含蛋白质的物质以促进生长。改良Leeming-Notman培养基基础

HBS 和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,在 Eagle′s（2.2g/L） 中比在 Hanks′（0.35g/L）中高。碳酸氢钠需用高水平的 CO2 平衡，以维持溶液的 PH 值。Eagle′s 液在空气水平的CO2中，溶液会变碱，Hanks′液在 CO2 培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织，需要用Eagle′s液，如果只是清洗将要在细胞培养基中储存的组织，用Hanks′液就可以了。由于大多数细胞适宜pH为7.2-7.4，偏离此范围可能对细胞生长将产生有害的影响。但各种细胞对pH的要求也不完全相同，原代培养细胞一般对pH变动耐受差，无限细胞系耐受力强。但总体来说，细胞耐酸性比耐碱性强一些。在配制培养用液时，需要注意一点：新配的培养基在经过 0.10um 或 0.22um 滤膜过滤时，溶液的pH 还会向上浮动0.2左右。改良Leeming-Notman培养基基础

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