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干粉培养基是一种在体积很小的瓶子里包含了原材料、微量元素和保持pH缓冲液的粉末状态培养基。因其干燥的特点,具有很长时间的保存期限,在良好的保存环境下,可以达到数年乃至十年的保存。这使得干粉培养基非常适合涉及多个实验、多个批次的工作。干粉培养基只需要在配制时加入一定的水,就可以得到所需的液体培养基,降低了配制的难度和操作的复杂度。这种方法避免了由于不同配制批次需要不同的调整,从而导致实验结果的上下波动的情况。干粉培养基的优点之一是可以自由调整,根据需要添加不同的成分,达到特定实验目的的需要。例如,添加具有特定作用的内分泌物质,如去氧地酸、细胞因子等,可以促进细胞增殖或发育。此外,通过添加一些抑菌物质,如维生素或其他抑菌剂,可以有效地抑制不需要的微生物污染。培养基根据其组成、用途、酸碱度等不同因素分类,如营养琼脂、LB培养基、麦康凯培养基等。GYM琼脂
培养基
干粉培养基的制备首先需要准备所需的原材料。不同的干粉培养基制备方法可能需要不同的原材料,但大多数情况下都需要葡萄糖、胰蛋白酶胨、酵母提取物等基础成分。此外,还需要添加一些其他成分来满足特定实验需求,如氨基酸、维生素、某些特定类型的糖类等。在保持实验环境干净卫生的前提下,开始称量所需原材料。称量时应注意不同成分的比例和用量,确保配方的准确性。称量完毕后,将所有原材料放入搅拌桶中进行混合。混合时应充分搅拌,直到所有成分混合均匀。桔汁肉汤(10倍浓缩)培养基中添加适当浓度的维生素可以有效防止微生物的污染。
生长基(也称为普遍培养基,Nutrient Agar)是较常用的预装培养基之一,由肉汤、酵母提取物和琼脂组成,其中肉汤作为氮源,酵母提取物是有机碳源,琼脂则提供了基础结构。这种培养基适用于大多数微生物的生长,可用于分离和纯化菌落。微生物筛选基涵盖了不同类型的预装培养基,例如:MacConkey Agar、Eosin Methylene Blue Agar(EMB)、Sabouraud Agar等等。这些培养基是为了筛选或区别不同类型的微生物而设计的,比如MacConkey Agar用于筛选革兰氏阴性杆菌,EMB用于筛选带有发酵代谢特征的细菌,而Sabouraud Agar则是用于细菌的培养。特定微生物培养基是为了培养和分离特定微生物而设计的,比如:Thayer Martin Agar是专门用于淋球菌的培养基,Lowenstein Jensen Agar是用于结核分枝杆菌的培养基。因为这些特定微生物通常较为难培养,所以特定的培养基在选择上尤为重要。
干粉培养基的成分和保存条件有关。它基本上由粉末制成,可以长期保存。干燥的粉末是细菌、霉菌和其他微生物生长的不良条件,因此干粉培养基适合在干燥和阴凉的环境中保存。这可以使其更长时间地保存,并减少出现问题的风险。对于一些菌株而言,基础的培养温度为37℃,一些不同种类的微生物在培养时的较适温度也会有所不同。因此,在选择保存干粉培养基温度时,应该考虑不同类型的细胞在不同温度下生长的特点。一般来说,室温下保存是可行的,但是在如此的温度下保存仍然会发生微生物的生长和其他一些反应,这会影响到干粉培养基的质量和保质期。因此,干粉培养基的较佳保存温度应该在-20 ℃或-80 ℃的低温下进行保存。这种温度环境可以使干粉培养基的成分保持稳定,减缓分解反应,避免细菌生长和其他不良影响。某些培养基会在特定环境下产生特定的表型变化,例如MacConkey培养基生成红色菌落表示肠道杆菌的存在。
在制备培养基的过程中,安全是第1原则。要保证培养基的无菌性、无致病性、无致变性,避免应用医疗性维生素、肽聚糖、半合成血清等,以避免在细胞培养等实验过程中产生的杂菌和微生物的病变,对实验过程的准确性和可靠性产生不利影响。培养基中含有营养成分,必须考虑基本食物成分(水、碳水化合物、蛋白质、脂肪、维生素、微量元素等)作为通用要素。不同类型的生物需要不同的营养成分,因此在制备培养基时必须注意保证各种营养成分的均衡和充足,以确保生物体生长、繁殖的需要和生理上的健康状况。在制备培养基时,要注意保持一定的 pH 值。T1N3肉汤 SN
蛋白胨-氯化钠-纤维二糖-多黏菌素E(PNCC)增菌液 脱脂奶蔗糖蛋白胨培养基 改良的酵母浸汁-孟加拉红肉汤。GYM琼脂
预装培养基可以给实验室带来诸多好处。首先,它节省了实验室技术人员的工作时间,从而提高实验时间的利用效率。因为手工制备培养基需要耗费大量的时间和精力,这增加了实验人员的负担。通过使用预装培养基,实验室工作人员可以减少时间和劳动力的浪费,从而将更多的精力投入到实验研究中。预装培养基也可以提高实验的安全性,因为在手工制备培养基时可能存在交叉病变的风险。在实验中,微生物之间的影响需要特别注意,如果不注意卫生和消毒,则可能造成影响的扩散。使用预装培养基可以降低这种影响和污染的风险,从而提高实验室的安全性。GYM琼脂