海南褐藻寡糖测定方法

    温度是影响植物生长与分布的重要因素,而低温更是地球上植物所面临的主要生存问题之一。研究发现,植物在受到低温胁迫后,过氧化氢酶系统首先受到破坏,造成氧自由基积累,细胞膜的通透性增加,细胞功能受损或者结构被破坏,胞内各种物质都有不同程度外渗,叶绿素结构被破坏,造成光合速率下降,光合作用作用减弱,严重者还会造成植物植株死亡。尤其是突发低温冻害会使植物大面积冻坏导致突然死亡,常常给农业生产带来严重危害。因此,提高植物耐低温能力,增强其抗冻性能对于延长植物生长时间,提高作物产量和品质具有十分重要的意义。本研究采用褐藻寡糖溶液喷施到烟C叶片后进行低温胁迫,通过检测相关指标,探讨褐藻寡糖在低温下对烟C植株的保护作用。 褐藻寡糖对植物的抗逆机制是通过诱导作用实现的。海南褐藻寡糖测定方法

AOS增强植株对致病疫霉的抗性用100μg/mLAOS分别喷施拟南芥和本氏烟,24h后,接种致病疫霉。结果显示与喷施ddH2O的植株相比,AOS处理的叶片接种部位的水渍及叶片的黄化程度明显降低,检测致病疫霉菌丝的生长量也明显低于对照,表明AOS也可以增强植株对致病疫霉的抗性。AOS诱导植物早期免疫应答反应对喷施AOS和ddH2O的本氏烟叶片进行相关免疫反应的检测。结果显示,在气孔开度方面,与ddH2O处理的对照组相比,AOS处理的本氏烟叶片的气孔开度明显较低,表明AOS通过调节叶片表面气孔的开合抑制病原菌的入侵。分别于2h、4h、8h、24h和48h时,对喷施AOS和ddH2O的本氏烟叶片进行DAB和NBT组织化学染色,发现喷施ddH2O的叶片染色程度较浅,而喷施AOS的叶片染色程度较深,且在24h时染色深。qRT-PCR检测ROS合成基因RbohA、RbohB以及去除基因SOD、APX和CAT表达水平,显示RbohB基因表达量明显上调,CAT基因表达量明显下降,说明AOS可以通过抑制CAT基因和促进RbohB基因的表达,提高过氧化氢的积累。上海好的褐藻寡糖褐藻寡糖是由褐藻胶经Vibriosp.510-64菌株产生专一性褐藻胶裂合酶酶解制备的寡糖片段。

    褐藻寡糖对黄瓜幼苗生长指标的影响黄瓜幼苗经不同分子量的褐藻寡糖处理，处理14ｄ后，在外观形态方面，ADO2和ADO3处理过的黄瓜幼苗与对照组相比有明显差别，ADO2和ADO3处理过的幼苗长势明显好于对照组，经不同分子量的ADO处理的黄瓜幼苗的生长状况均好于对照组，各种生长指标包括株高、茎粗、株幅及鲜重都明显高于对照。ADO1，ADO2，ADO3，ADO4处理植株的株高分别提高了％，％，％和8％，茎粗分别提高了５．８％，２３．９％，２２．７％和７．０％，株幅分别提高了２１．９％，２７．０％，３５．４％和２４．３％，鲜重分别提高了５０．８％，５３．５％，７４．３％和５４．１％。其中ＡＤＯ２和ＡＤＯ３处理组黄瓜幼苗的各项生长指标都高于ＡＤＯ１和ＡＤＯ４处理组。因此，选择ＡＤＯ２和ＡＤＯ３进行后续试验。褐藻寡糖对黄瓜叶片叶绿素含量的影响由图３所示，经过ＡＤＯ处理的黄瓜叶片中的叶绿素ａ和叶绿素总含量均比蒸馏水处理的对照有明显性提高，ＡＤＯ处理组组间比较发现，ＡＤＯ３对叶绿素含量的提高比ＡＤＯ２更为明显。２种褐藻寡糖对叶绿素ａ的含量的影响较大，叶绿素ｂ的含量变化相对较小，而光合作用与叶绿素ａ的含量关系相对密切。

褐藻寡糖喷施后黄瓜叶片CAT活性显著提高（p＜0.05）,0.2%处理是未喷施组的1.40倍,果期0.2%处理是未喷施组的5.03倍。叶片POD活性被激发,0.2%处理是未喷施组的1.01倍,SOD活性没有显著提高。果实CAT、POD、SOD、APX、GR活性均有所增高,0.2%处理较CK增幅大。褐藻寡糖喷施后,黄瓜果实的抗氧化酶G-POD4基因表达水平上升,T2组是CK组的1.19倍。喷施组SOD1基因表达水平均升高,其中T3组较CK组升高了5.06倍,效果明显。褐藻寡糖喷施后,分别检测叶片和根中WRKY家族转录因子的表达变化。在黄瓜叶片中,第Ⅰ类WRKY家族基因,WRKY2、WRKY4、WRKY23、WRKY39响应褐藻寡糖表达上调,第Ⅱ类WRKY家族基因有15个基因响应褐藻寡糖表达上调,第Ⅲ类WRKY家族基因基因中WRKY20、WRKY22、WRKY34、WRKY35在12h或24h出现表达上调的峰值。在黄瓜根中,第Ⅰ类WRKY家族基因,WRKY2、WRKY23、WRKY39响应褐藻寡糖表达上调,第Ⅱ类基因中有14个基因响应褐藻寡糖表达上调,第Ⅲ类WRKY家族基因有6个基因响应褐藻寡糖表达上调。褐藻寡糖诱导植物抗病毒病是AOS促进植物体内SA含量增加，促使植物体内活性氧的产生，增强植物抵抗病毒。

    褐藻寡糖是植物重要的信号分子，同时因为其独特的组成和生物活性，参与植物的生理水平调节过程，促进植物生长。以小麦和玉米幼苗为实验材料，分别进行清水和褐藻寡糖的处理，能在根中促进生长素、赤霉素和细胞分裂素含量的上升，还可以促进蛋白酶和脂肪酶的活力。褐藻寡糖是一种多生物活性的小分子量化合物，对植物诱导抗病方面发挥巨大作用，提高植物对病虫害的抵抗力。褐藻寡糖还可以诱导植物产生抗低温的作用，以绿萝为实验材料，在低温处理前两天用分别用褐藻寡糖和清水处理两盆绿萝，褐藻寡糖可明显降低低温对绿萝的伤害。褐藻寡糖的处理明显提高了绿萝体内甜菜碱、过氧化物歧化酶、植保素、游离脯氨酸和可溶性糖的含量。喷施褐藻寡糖后，可以提高作物的抗旱能力。提高CAT、SOD、PAL和POD四种抗逆相关酶的活力，提升ABA含量，关闭了植物表面气孔，水分散失减少。以番茄为例，分别对番茄进行清水和褐藻寡糖的处理。 褐藻胶寡糖对植物来说也是一种重要的信号分子，能够参与植物的生长调节和诱导抗病过程。甘肃褐藻寡糖补充量

褐藻寡糖能促进过氧化氢的积累且在24h左右诱导植物体内活性氧的爆发。海南褐藻寡糖测定方法

褐藻寡糖是褐藻胶的降解产物，由2~10个单糖通过糖苷键结合而成，具有溶解性好，稳定性强等特点。褐藻胶主要来源于海带、马尾藻等藻类，是由β-D-甘露糖醛酸和α-L-古罗糖醛酸通过1-4糖苷键连接形成的阴离子酸性多糖。经过多年研究发现褐藻寡糖在农业、医学等多个方面都具有重要的应用价值和研究意义，尤其在在农业方面，褐藻寡糖对经济作物有较好的应用效果。在增产方面，应用褐藻寡糖于黄瓜、小麦,、玉米、水稻等多种农作物，可明显促进作物生长，增加产量；在种子萌发方面，褐藻寡糖可促进大豆、高粱、豌豆等种子的萌发，提高萌发率和萌发势等；在抗逆方面，施用褐藻寡糖可提高水稻的抗病虫害能力，同时提高幼苗的镉胁迫抗性，提高小麦的抗干旱胁迫等。翅碱蓬常被用于盐碱地的生态工程建设中，但是在东营黄河三角洲地区的实际应用中发现，翅碱蓬在种植中存在成活率低的问题，尤其是幼苗移植生长时期，幼苗后续成活率低，人力物力财力投入成本较高。推测原因为移植后的幼苗对盐碱地环境难以适应，抗逆性较差。因此如何提高翅碱蓬的幼苗后续成活率和抗逆性是当前研究的重点问题。褐藻寡糖已被证实对草本植物具有明显的提质、抗逆效果，如水稻、小麦等。海南褐藻寡糖测定方法

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