山东褐藻寡糖技术要求

    糖类物质按照分子聚合度的大小可以分为单糖、寡糖和多糖。由一个分子构 成的糖称为单糖，一般来说2~20个分子构成的短链糖苷称为寡糖或者低聚糖，100个以上的称为多糖。寡糖可以由多糖通过 酶解、酸水解和氧化降解等方法而获得，制取比较方便，来源也非常普遍，结构 和功能也各不相同，在应用中无毒无污染，在环境中可以自行降解，已经证明， 寡糖具有多种生物活性，能够调节植物的生长，诱导植物抗逆性的产生，目前， 寡糖类诱抗剂的研究已成为植物诱抗剂研究的热点。寡糖主要的构成单元为五碳糖和六碳糖，其中以六碳糖居多。即葡萄糖、半 乳糖、木糖、阿拉伯糖、果糖、甘露糖等。有这些单糖经过聚合以直链或者支链 的形式形成多种结构和功能各异的多糖。据报道，目前已经确定的寡糖已有上千 种。动植物的结构多糖具有非常复杂的结构，在合适的条件下又可以进行降解， 产生许多结构不同、大小不一的寡糖片段，具有多种功能活性，Albersheim 等（1985）将这些具有多种生物活性的寡糖被统称为寡糖素。褐藻寡糖是由褐藻中的褐藻胶通过氧化降解、酸水解或者裂合酶降解而得到的小分子量片段。山东褐藻寡糖技术要求

   褐藻寡糖对黄瓜幼苗生长指标的影响黄瓜幼苗经不同分子量的褐藻寡糖处理，处理14ｄ后，在外观形态方面，ADO2和ADO3处理过的黄瓜幼苗与对照组相比有明显差别，ADO2和ADO3处理过的幼苗长势明显好于对照组，经不同分子量的ADO处理的黄瓜幼苗的生长状况均好于对照组，各种生长指标包括株高、茎粗、株幅及鲜重都明显高于对照。ADO1，ADO2，ADO3，ADO4处理植株的株高分别提高了7％，10.2％，8.9％和8％，茎粗分别提高了5.8％，23.9％，22.7％和7％，株幅分别提高了21.9％，27％，35.4％和24.3％，鲜重分别提高了50.8％，53.5％，74.3％和54.1％。其中ADO2和ADO3处理组黄瓜幼苗的各项生长指标都高于ADO1和ADO4处理组。因此，选择ADO2和ADO3进行后续试验。褐藻寡糖对黄瓜叶片叶绿素含量的影响由图３所示，经过ADO处理的黄瓜叶片中的叶绿素ａ和叶绿素总含量均比蒸馏水处理的对照有明显性提高，ADO处理组组间比较发现，ADO3对叶绿素含量的提高比ADO2更为明显。２种褐藻寡糖对叶绿素ａ的含量的影响较大，叶绿素ｂ的含量变化相对较小，而光合作用与叶绿素ａ的含量关系相对密切。海南褐藻寡糖大师褐藻寡糖为从海洋生物中提取的生物多糖，使用时无需安全间隔区。

    AOS对PVX、TMV有较好的防治效果分别在喷施AOS前24h和喷施AOS后24h接种带有GFP标签的PVX。发病后,在紫外灯下观察绿色荧光并检测病毒积累量。结果显示先喷施AOS后接种PVX,5d后,30.6%系统叶片出现荧光,而喷施ddH2O的本氏烟,85.7%上部叶片出现荧光;喷施AOS的本氏烟中病毒的积累量也明显低于对照。先接种PVX后喷施AOS,与喷施ddH2O的本氏烟系统叶片的荧光强度并无明显区别,本氏烟中病毒的积累量也无明显差异。以上结果说明,AOS对病毒有明显的预防效果。用不同浓度的AOS处理本氏烟后接种PVX,检测抗病效果,结果显示在AOS浓度为100μg/mL时,其抗病效果好。之后,采用100μg/mL的AOS喷施本氏烟后,接种烟C花叶病毒（TMV）,发现与对照组相比,AOS处理的叶片上荧光强度也明显减弱,TMV的积累量也明显降低,表明AOS也可以增强植物对TMV的抗性。以上结果说明,AOS增强植物对病毒的抗性具有普遍性。

    为了研究褐藻寡糖与细胞的结合机制与作用规律，利用激光共聚焦技术对标记的寡糖与烟c细胞进行结合，观察其动态结合过程，研究发现，褐藻寡糖能够与植物的细胞壁进行结合，又可以穿过细胞壁进入细胞内部与细胞膜进行结合。通过将蛋白酶以及蛋白变性剂SDS对膜蛋白进行处理后研究发现能够对寡糖的结合产生影响。表明褐藻寡糖的结合是与膜上的蛋白有关。通过封闭细胞膜上的钙离子通道，对其进行阻断后结合寡糖，研究发现，褐藻寡糖与细胞膜的结合与钙离子通道无关。 褐藻寡糖可以促进大麦生长等提高植物的抗冻能力，促进植物种子萌发和根部生长。

   因此褐藻寡糖对植物的抗逆机制是通过诱导作用实现的。 诱导植物体内产生各种抗性物质来缓解逆境因素对植物造成的损伤，从而达到抗 逆的目的。为了研究褐藻寡糖与细胞的结合机制与作用规律，利用激光共聚焦技术对标 记的寡糖与细胞进行结合，观察其动态结合过程，研究发现，褐藻寡糖能够 与植物的细胞壁进行结合，又可以穿过细胞壁进入细胞内部与细胞膜进行结合。 通过将蛋白酶以及蛋白变性剂 SDS 对膜蛋白进行处理后研究发现能够对寡糖的 结合产生影响。表明褐藻寡糖的结合是与膜上的蛋白有关。通过封闭细胞膜上的 钙离子通道，对其进行阻断后结合寡糖，研究发现，褐藻寡糖与细胞膜的结合与 钙离子通道无关。褐藻寡糖用过的容器应妥善保管，不可做他用，也不可随意丢弃。浙江褐藻寡糖冲洗

寡糖作为信号分子与作物细胞结合并相互作用，引起作物的相关信号转导。山东褐藻寡糖技术要求

    马尾藻是我国南海常见的大型经济褐藻,也是褐藻多糖的重要来源。褐藻多糖及其降解产物—褐藻寡糖,具有众多生物活性,在农业、医药、化妆品等领域具有广阔的应用前景。以采自海南琼海海域的孤囊马尾藻为研究对象,探究了一种有效提取褐藻多糖和酶解制备褐藻寡糖的方法,并对制备的褐藻多糖及寡糖进行纯化、结构分析和活性评价。研究结果如下:采用超声波辅助热碱法,通过响应面优化获得孤囊马尾藻多糖的比较好提取工艺,在超声功率500W、料液比1:25、提取时间5.95h、提取温度82.27℃、NaOH质量分数3.87%的条件下粗多糖得率为41.23%±0.98%。采用TCA沉淀法除蛋白,粗多糖的蛋白去除率达到81.93%,多糖保留率92.17%;优化了H2O2氧化法除色素工艺,在H2O2浓度1.5%、70℃条件下脱色6h时,脱色率达到91.23%,多糖保留率为85.32%。采用DEAE-52离子交换层析柱对初步纯化后的多糖进一步分离纯化,获得SOP1、SOP2和SOP3三个多糖组分,并明确了它们的分子量、纯度以及总糖、还原糖、蛋白、硫酸根和糖醛酸的含量。采用自主分离的产褐藻胶裂解酶类芽孢杆菌新种,发酵制备粗酶液,发酵液酶活为15.20U/ml。山东褐藻寡糖技术要求

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