无锡大鼠疾病动物模型建模

时间:2021年10月18日 来源:

    步骤i.将步骤h的吸附柱放入收集管,12000rpm离心2min。步骤j.吸附柱放到一个新的,在吸附柱膜**加入50~200μl灭菌水或者洗脱液,停留5min。(将无菌水或者洗脱液加热到65℃能够增加洗脱的得率)。步骤i.基因组dna定量,洗脱的基因组dna可以通过电泳鉴定。方法2:一种低成本基因组dna的粗提方法:步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2-5mm),放入离心管中,加入100μl尾部消化缓冲液,注意不要剪尾太长;步骤b.将离心管及其内容物于56℃孵育过夜;步骤c.过夜后将离心管于98℃孵育13min,使蛋白酶k失活;步骤d.在微型离心机以**大转速旋转15min,上清直接用于pcr体系(每50μlpcr体系加入上清2μl)。尾消化缓冲液成分:50mmkcl10mmtris-hcl()%tritonx-100(b)长链pcr反应:长链引物:pcrprimers1(℃):扩增片段:5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):扩增片段:3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’pirb基因敲除型有上述两条扩增片段,野生型等位基因没有扩增产物。早期阶段科学假说与疾病潜在药物治疗效果评价始于小鼠疾病模型构建及其实验室研究。无锡大鼠疾病动物模型建模

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    配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料:如表1所示。表12.实验方法:①动物信息:sd大鼠,雌性,6-8周,体重180-220g。普通环境饲养,灭菌饲料饲养,自由饮水。②分组及给药剂量:如表2所示。表2③给药途径及频率:腹腔注射;2mg、3mg组连续注射7天;4mg、6mg组***天、第八天注射;对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测:末次注射后15天,动物麻醉,采集血液,分离血清,elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物,取卵巢组织称重,对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重,给药后每周称重两次,每天进行阴道涂片检测动情周期。3.统计方法:采用graphpad进行统计分析。所有计量资料均采用均值±标准差表示采用单因素方差分析各组间均值的差异,p<。4.试验结果:(3mg组注射完成后*存活一只,不进行统计)如表3、表4、图1、图2、图3所示:①***水平:与空白组相比,2mg组、4mg组、6mg组e2水平均降低,但是只有2mg组有明显降低(p<),如图1所示;与空白组相比,2mg组、4mg组、6mg组fsh水平均上升,只有2mg组有明显升高(p<),如图2所示;与空白组相比。泰州阿尔兹海默症疾病动物模型建模人类疾病的动物模型是指各种医学科学研究中建立的具有人类疾病模拟表现的动物。

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1、动物模型名称:腹主动脉缩窄致心衰大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:成年5、实验动物体重:180~220g6、实验动物环境:SPF级 1、实验方法:采用主动脉缩窄法建立模型大鼠麻醉后,仰卧位固定、去腹毛、消毒,沿腹正中线切开皮肤及肌层,分离出腹主动脉,在肾动脉上方将腹主动脉与钝头8号探针一起结扎后,小心抽出针头。手术造模后大鼠正常饲养3个月。大鼠终末体重(BW),心室重(VW),计算心体比(VW/BW),并进行心功能检测,包括心率(HR)、左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)及左室最大压力上升及下降速度(±dp/dtmax),并对心肌组织进行病理学检测.2、检测标准:模型组大鼠VW/BW明显增加,LVSP明显降低,LVEDP明显升高,±dp/dtmax则***减小,与正常对照组相比具有统计学差异。病理学检测结果表明心肌出现典型心衰样病理改变。

    f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下:primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下:5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割;琼脂糖凝胶电泳分离dna;步骤d、将dna转到尼龙膜上;步骤e、探针变性后,与dna分子进行杂交,nbt/bcip化学显色法显色,拍照观察。southern杂交结果如图6所示,可以看到:6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割,在,wt小鼠只在,如果被avrii切割,pirb基因敲除小鼠在,wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠,即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交,获得f3代小鼠,可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定:含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。必须真正了解研究者感兴趣且需要的小鼠疾病模型。

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1、自发性**动物模型:未经人为处理;自然发生;自发性**的总体评价--动物自发性**的病因往往是由动物的遗传特性决定的与人痒的病因有较大距离。各动物**生长速度差异较大很难在限定时间内获得大量生长均匀的荷瘤动物(tumor-bearinganimals)。因此,自发性**动物模型很少在抗**药物的常规筛选中广泛应用。2、诱发性**动物模型:在实验条件下:使用致*物(carcinogens);诱发动物发生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在实验条件下诱发动物发生**的动物模型,它是进行实验**学研究的常用方法。常用于验证可疑致*因素的作用也越来越多地应用干**发生机理的研究及防治效果的观察上,在**病因学、遗传学、生物学等方面的研究中有重要地位。由于诱发因素和条件可人为控制,诱发率远高于自然发病率故在**实验研究中优于自发瘤。用于诱发实验性**的动物种类很多,它们因种族不同而对相同致*因素有不同的反应性。常用的动物以哺乳动物为主,其中啮齿类动物的使用**多,应用**广,包括各种大鼠、小鼠、际鼠等。。上海东寰为您提供完善的裸鼠动物疾病模型。奉贤区疾病动物模型建模评价

如何定义好的小鼠疾病模型?无锡大鼠疾病动物模型建模

1、动物模型名称:酒精诱导的肝硬化大鼠模型2、实验动物种属:SD大鼠3、实验动物性别:雄性4、实验动物年龄:5周5、实验动物体重:150g-160g6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:用酒精诱导法。大鼠每天按10mL/kg体重灌服酒精混合物(酒精:吡唑:玉米油=10mL:25mg:2mL)造模,每周2次按0.3mL/kg剂量腹腔注射给予CCl4:橄榄油=1:3,连续灌服60天。解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准:肝组织可见肝硬化病理改变(S1级~S4级)。无锡大鼠疾病动物模型建模

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