徐汇区咨询疾病动物模型建模

    配制成6mg/kg顺铂注射液,按照10ml/kg分别在***天及第八天腹腔注射。实验建立大鼠卵巢早衰模型1.实验仪器及材料：如表1所示。表12.实验方法：①动物信息：sd大鼠，雌性，6-8周，体重180-220g。普通环境饲养，灭菌饲料饲养，自由饮水。②分组及给药剂量：如表2所示。表2③给药途径及频率：腹腔注射；2mg、3mg组连续注射7天；4mg、6mg组***天、第八天注射；对照组连续7天注射生理盐水。④病理检测：末次注射后15天，动物麻醉，采集血液，分离血清，elisa法测定血清中e2、fsh、lh水平变化情况。解剖动物，取卵巢组织称重，对大鼠的卵巢组织形态学进行观察。注射期间每天称重，给药后每周称重两次，每天进行阴道涂片检测动情周期。3.统计方法：采用graphpad进行统计分析。所有计量资料均采用均值±标准差表示采用单因素方差分析各组间均值的差异，p＜。4.试验结果：(3mg组注射完成后*存活一只，不进行统计)如表3、表4、图1、图2、图3所示：①***水平：与空白组相比，2mg组、4mg组、6mg组e2水平均降低，但是只有2mg组有明显降低(p＜)，如图1所示；与空白组相比，2mg组、4mg组、6mg组fsh水平均上升，只有2mg组有明显升高(p＜)，如图2所示；与空白组相比。开展小鼠疾病模型初步研究分析小鼠疾病模型研究初步结果与生物学信息资料等相关知识间的差距！徐汇区咨询疾病动物模型建模

1、动物模型名称：碱烧伤致角膜损伤大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：160-200g6、实验动物环境：SPF级，1、实验方法：氢氧化钠致大鼠角膜化学性损伤。大鼠用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，用干棉棒拭去结膜囊多余液体，将统一规格直径3mm的圆形滤纸片浸入1mol/LNaOH溶液中20s，饱和后取出置于干燥滤纸上1秒以吸去过多的碱液，将滤纸片贴敷于大鼠右眼角膜**90s后移去，立即用灭菌水冲洗结膜囊及角膜2min。2、检测标准：肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。南通心血管疾病疾病动物模型建模这类动物疾病模型是指各种疾病共同性的一些病理变化过程的模型。

    其中可以看出手术侧后爪的缩足阈值较手术前及对侧后爪有***降低，且标准误区间非常小。图4是表1的数据通过曲线图的方式展现。结果显示：大鼠在术后***天即出现手术侧后爪敏感，施加轻微的重量(4g左右)都会引起缩足表现，这说明其痛阈明显降低，对轻微的刺激均呈现抬脚，舔舐后足等痛觉过敏表现。这种表现维持至术后至少28天。而对侧后爪在术前和术后缩足阈值变化不大，基本保持在20-25g。实施例3、模型的应用采用实施例1中描述的方法对两组大鼠均进行了造模，l型棒的材料选择的是h62黄铜或聚乳酸等不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料。在造模后第七天应用重复经颅磁刺激(rtms)***大鼠，其中一组接受了真的磁刺激，为磁刺激组；另一组接受了假的磁刺激，为假刺激组。结果显示，磁刺激组的大鼠缩足阈值较假刺激组明显提高，如图5所示。这表明磁刺激缓解了神经压迫造成的疼痛，该模型可以用于磁刺激***的研究。以上详细描述了本发明的较佳具体实施例。应当理解，本领域的普通技术无需创造性劳动就可以根据本发明的构思作出诸多修改和变化。因此。

    步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄，平均体重20g)，46h后注射hcg，与雄性小鼠合笼交配，次日取受精卵进行显微注射，将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中，取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内，产出小鼠，即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2～10pmol/ul，cas9蛋白的注射浓度为30～100ng/μl，cas9蛋白购自newenglandbiolabs，货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna，pcr扩增产物测序，鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下：pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为，primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。实验动物向小型化的发展趋势更有利于实验者的日常管理和实验操作。

球囊拉伤致高脂血症动脉硬化兔模型，实验动物种属：新西兰兔，实验动物环境：SPF级 1、实验方法：用球囊拉伤诱导法。采用3%戊巴比妥钠耳缘静脉注射麻醉，经右股浅动脉，将3.5F球囊扩张导管插至腹主动脉20cm，球囊充液膨胀至2个大气压缓慢拉出，反复3次。球囊拉伤手术后，动物喂以高脂饲料，连续9周，每天给料两次，自由饮水。实验结束后取腹主动脉斑块进行组织病理学检查。2、检测标准：腹主动脉斑块病理镜下可见腹主***程度的改变。收集研究疾病的生物学信息资料。苏州疾病动物模型建模优势

广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。徐汇区咨询疾病动物模型建模

    技术领域：本发明属于遗传学和生物技术领域，具体涉及pirb基因敲入的小鼠动物模型，还涉及上述小鼠动物模型的构建方法。背景技术：鼠源成对免疫球蛋白样受体b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb，pirb)，是人类免疫球蛋白样受体b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2，lilrb2)的同源基因，pirb基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的7号染色体近端，总大小为，编码841个氨基酸，目前鉴定出15个外显子，外显子1起始密码为atg，外显子15的终止密码子是tga(转录本：)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白，包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain，d)组成(d1-d6)的胞外段，一个疏水的跨膜段，三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs，itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲，pirb的分子量约为92kd，但是western-blot分析中，pirb经常位于105kd处，因为pirb是糖蛋白。以往研究发现，pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中，pirb在许多造血细胞都有表达，包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞，但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。徐汇区咨询疾病动物模型建模

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