闵行区非酒肝疾病动物模型建模

    技术领域：本发明属于遗传学和生物技术领域，具体涉及pirb基因敲入的小鼠动物模型，还涉及上述小鼠动物模型的构建方法。背景技术：鼠源成对免疫球蛋白样受体b(pairedimmunoglobulin-likereceptorb，pirb)，是人类免疫球蛋白样受体b2(humanleukocyteimmunoglobulin(ig)-likereceptorb2，lilrb2)的同源基因，pirb基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的7号染色体近端，总大小为，编码841个氨基酸，目前鉴定出15个外显子，外显子1起始密码为atg，外显子15的终止密码子是tga(转录本：)。pirb蛋白属于i型跨膜糖蛋白，包含由六个免疫球蛋白样结构域(domain，d)组成(d1-d6)的胞外段，一个疏水的跨膜段，三个免疫受体酪氨酸依赖的抑制序列(immunoreceptortyrosinebasedinhibitorymotifs，itims)和一个itims样序列组成的胞内段。理论上讲，pirb的分子量约为92kd，但是western-blot分析中，pirb经常位于105kd处，因为pirb是糖蛋白。以往研究发现，pirb在免疫系统和中枢调节中均发挥重要作用。在免疫系统中，pirb在许多造血细胞都有表达，包括b细胞、肥大细胞、巨噬细胞、粒细胞和树突细胞，但是在胸腺细胞、成熟的t细胞和自然杀伤细胞不表达。临床上平时不易见到的疾病可用动物随时复制出来。闵行区非酒肝疾病动物模型建模

1、动物模型名称：环磷酰胺致白细胞减少症小鼠模型2、实验动物种属：KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：约4周龄5、实验动物体重：18~22g6、实验动物环境：SPF级，1、实验方法：环磷酰胺诱导。小鼠按30mg/kg体重剂量腹腔注射环磷酰胺，连续注射5d。所有小鼠在注射前、注射第3、5日，以及停止注射第2、5、8、11、15日时分别**作外周血象检测，观察外周血白细胞总数。***1次检测观察后麻醉处死小鼠，取其股骨，用Hanks液冲洗骨髓细胞，显微镜下观察骨髓有核细胞数。2、检测标准：模型组小鼠的外周血白细胞总数明显降低，镜下观察模型组小鼠的骨髓有核细胞数较正常对照组小鼠明显降低。镇江大鼠疾病动物模型建模可以严格控制实验条件，增强实验材料的可比性。

    PMID：15082495、7561688)①HE染色②关节侧视图③PCR鉴定、二、糖尿病相关动物模型1.糖尿病***1）模型构建（PMID：30826357）使用链佐星（STZ）注射ApoE-/-小鼠，建立糖尿病ApoE-/-小鼠模型，同时与ApoE-/-小鼠采用高脂喂养18周2）模型检测指标（PMID：29107826、28345659）3）生化指标检测4）超声检测5）主动脉染色检测2.糖尿病心肌病1）诱发性DCM模型模型构建（PMID：29732743）实验动物：大鼠方法：各大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素150mg·kg-1(STZ用mol·L-1，pH，现配现用)，并给予高脂饲料进行喂养。①模型检测指标血糖检测②HE染色③超声心电图2）自发性1型DCM模型3）自发性2型DCM模型3.糖尿病视网膜病变1）模型构建PMID：30862093实验动物：小鼠方法：糖尿病雄性db/db（+/+Leprdb/J）小鼠。喂养至21周2）模型检测指标①胶质原纤维酸性蛋白染色②TUNEL和HE染色DR组视网膜组织内核层及外核层结构松散，细胞排列紊乱GCL，神经节细胞层;INL，内核层;ONL，外核层三、动物模型构建总结1.临床资料合理性在纳入临床资料时，需关注特定疾病患者的流行病学趋势，即疾病易发年龄，男女比例等，同时需考虑是否与体重、基因表达等具有相关性。2.模型合理性选择合适，简便。

1、动物模型名称：泪腺摘除联合新洁尔灭致干眼兔模型2、实验动物种属：新西兰兔3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：2~3月龄5、实验动物体重：1.8~2.5kg6、实验动物环境：SPF级，1、实验方法：摘除泪腺联合新洁尔灭诱导。兔耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射进速眠新Ⅱ进行麻醉。麻醉后，进行泪腺摘除手术，眼睑局部以75％酒精消毒，铺洞巾，于眼下眶周部做一切口，小心分离皮肤、肌肉、筋膜，寻找到泪腺后完整摘除之，然后缝合创口。术毕，滴妥布霉素**眼液2滴、涂四环素可的松眼药膏，共7d。术后兔创口愈合后进行给药造模。眼滴0.1%新洁尔灭溶液，2次/天，2滴/次，连续用药14d。2、检测标准：SchirmerI试验泪液分泌减少，1%虎红角膜染色试验虎红着色评分值高，角膜出现病理改变。上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。

1、自发性**动物模型:未经人为处理;自然发生;自发性**的总体评价--动物自发性**的病因往往是由动物的遗传特性决定的与人痒的病因有较大距离。各动物**生长速度差异较大很难在限定时间内获得大量生长均匀的荷瘤动物(tumor-bearinganimals)。因此，自发性**动物模型很少在抗**药物的常规筛选中广泛应用。2、诱发性**动物模型:在实验条件下:使用致*物(carcinogens);诱发动物发生**animalmodelofinducedtumor)指使用致*因素(carcinogens)在实验条件下诱发动物发生**的动物模型，它是进行实验**学研究的常用方法。常用于验证可疑致*因素的作用也越来越多地应用干**发生机理的研究及防治效果的观察上，在**病因学、遗传学、生物学等方面的研究中有重要地位。由于诱发因素和条件可人为控制，诱发率远高于自然发病率故在**实验研究中优于自发瘤。用于诱发实验性**的动物种类很多，它们因种族不同而对相同致*因素有不同的反应性。常用的动物以哺乳动物为主，其中啮齿类动物的使用**多，应用**广，包括各种大鼠、小鼠、际鼠等。。上海东寰为您提供完善的小鼠动物疾病模型。淮安疾病动物模型建模优势

小鼠疾病模型应用于转化医学研究中的思路与策略该研究从临床患者中筛选到潜在的致病基因。闵行区非酒肝疾病动物模型建模

葡聚糖硫酸钠（DSS）致溃疡性结肠炎小鼠模型：1、动物模型名称：葡聚糖硫酸钠（DSS）致溃疡性结肠炎小鼠模型2、实验动物种属：BALB/c小鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：成年鼠5、实验动物体重：18g-22g6、实验动物环境：SPF级 1、实验方法：实验前小鼠禁食不禁水24h，24小时后提起鼠尾将其悬空，使挣扎以排出大肠远端的大便。小鼠自由饮用5%葡聚糖硫酸钠（DSS）溶液，连续14天。进行疾病活动指数(DAI)的评估、取结肠进行组织病理学检查。2、检测标准：DAI评分明显升高，与对照组比较具统计学意义。结肠病理镜检可见结肠炎症、病变深度、隐窝破坏、溃疡病变闵行区非酒肝疾病动物模型建模

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