福建提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

时间:2022年06月12日 来源:

EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用?上海东寰告诉您。福建提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度山东口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒优势上海东寰告诉您如何正确使用EdU细胞增殖检测试剂盒?

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与BrdU检测方法相比,EdU检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间需几分钟,不需要DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,分子量很小,在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中,并渗入正在复制的DNA分子,通过基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。

现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒如何去使用呢?

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EdU上的乙炔基能与生物素标记的叠氮化物(Biotinlabeledazide)通过一价铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction),其反应原理参见图1。通过点击反应,新合成的DNA会被相应的生物素探针所标记,从而可以使用适当的检测设备检测到增殖的细胞。EdU检测法中的点击反应(Clickreaction)原理图。生物素或荧光探针等标记的叠氮化物(LabeledAzide)与掺入到细胞DNA中的EdU,在铜离子的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,终使细胞DNA标记上生物素等探针。使用EdU细胞增殖检测试剂盒能给人们带来便利吗?河南哪一家EdU细胞增殖检测试剂盒购买

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细胞增殖能力的检测是评估细胞活性、基因毒性和抗药物效果等的基本方法。公认的精确的检测细胞增殖的方法是直接检测细胞中DNA的合成。初使用的通过检测DNA合成来检测细胞增殖的方法是放射性标记核苷掺入法,如氚标记胸腺嘧啶脱氧核苷([3H]thymidine)掺入法。细胞活性的细胞增殖检测方法,能检测到细胞的总体增殖效果,但无法检测到单个的增殖细胞。这几种方法尽管都不是检测DNA合成的,但被用于替代[3H]thymidine掺入法。上述这些基于细胞活性或CFDASE的方法可以作为EdU法的补充性检测方法。福建提供EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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