山东正规EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

时间:2023年11月17日 来源:

EdU检测方法更快速、更灵敏、更准确。EdU检测染料只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等)即可有效检测,可有效避免样品损伤,在细胞和组织水平能更准确地反映细胞增殖等现象。EdU染色(a)通过用10:1去离子水稀释10x反应缓冲液进行配制1xEdU反应缓冲液;(b)按照溶解200mg缓冲添加剂溶于1ml去离子水的比例称取适量的粉末进行溶解,即为可用的缓冲添加剂的浓度,建议现用现配;注:缓冲添加剂为白色粉末,较难准确称量,称量范围可稍微放宽,但是不应超过±20%,且该粉末较易氧化,使用后请旋紧管盖,如试剂出现棕黄色,则需报废或更换。上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒对如今市场的影响。山东正规EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

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    摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ulTritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;染色反应液组分500ul1ml2ml5mlIX反应缓冲液430ul860ulmlml催化剂溶液20ul40ul80ul200ulTAMRA红色荧光溶液ulul5ulul缓冲添加剂50ul100ul200ul500ul(d)每孔加入100ul配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟。(e)弃染色反应液,加入300ulTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;(f)弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色(a)将Hoechst33342用PBS溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5ug/ml的lxHoechst染色液;(b)每孔加入300ul1xHoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;(c)每孔加入300ulPBS洗细胞两次,去掉洗液。江苏咨询EdU细胞增殖检测试剂盒价格EdU细胞增殖检测试剂盒厂家。

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与BrdU检测方法相比,EdU检测方法用量小得多,十分之一的用量即可获得与BrdU检测试剂盒相同甚至更好的检测结果,而且小分子化学反应检测方法反应快,效率高,反应时间需几分钟,不需要DNA变性、蛋白酶处理、抗原抗体过夜孵育,能够更好地保护细胞形态,更简单、更灵敏、更快速、更准确。EdU是一种胸腺嘧啶核苷类似物,分子量很小,在动物体内能够迅速扩散到各种组织和中,并渗入正在复制的DNA分子,通过基于Apollo®荧光染料与EdU的特异性反应即可简单、快速、准确地检测出细胞增殖情况。

    细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。 EdU细胞增殖检测试剂盒应用再哪些地方?

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    按照以下的表格进行染色反应液的配制:染色反应液组分500μl1ml2ml5ml1×反应缓冲液430μl860μlmlml催化剂溶液20μl40μl80μl200μlTAMRA红色荧光溶液μlμl5μlμl缓冲添加剂50μl100μl200μl500μl3、每孔加入100μl配置好的检测混合液,以覆盖细胞为宜,避光、室温孵育30分钟;4、弃染色反应液,加入100μlTritonX-100细胞渗透液清洗2-3次,每次10分钟;5、弃细胞渗透液,用PBS洗两次,每次5分钟。DNA染色1、将Hoechst33342用RNase-free水溶液1:1000进行稀释得到终浓度为5μg/ml的1×Hoechst染色液;2、每孔加入100μl1×Hoechst染色液,室温避光孵育20-30分钟后,弃染色液;3、每孔加入100μlPBS洗细胞两次,去掉洗液。图像获取及分析建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。EdU细胞增殖检测试剂盒的结构如何组成?品牌EdU细胞增殖检测试剂盒购买

使用EdU细胞增殖检测试剂盒到底有什么好处?山东正规EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度。AdrianSalic特别强调:“与传统的免疫荧光染色不同,EdU反应能在几分钟内完成,且不需要进行严格的样品变性处理,使得组织成像更简单易行。山东正规EdU细胞增殖检测试剂盒说明书

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