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通过改变参数（见第5.3节）和评估他们对梁色质回收率的影响来优化这些步骤。使用机械力，如杜恩斯匀浆器或坡璃珠改善细脆溶辉。优化裂解步要和避免起泡。
在甲醛中培养时间过长可能掩盖经ChIP抗体识别所需要的表位。如果您使用的是单克隆抗体，此问题可能更加严重。过度交联也可能导致超声处理时复合物难以形成。优化交联步骤∶甲醛的**终液度应为1%;您应确定***的交联时间，然后再继绩进行实验。在研究方案的后续步骤中，交联不足可能引起靶蛋白从DNA解离。

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流式细鹿分析仪如Guava easyCyte" 8HT仪器采用单细胞的激光激发和荧光及折射光的后续检测，以提供多参数细胞分析。

检测方法

和其它免疫检测应用一样，有几种通过流式细胞术检测特异性细胞的抗体应用方法。主要有三种主要方法∶·直接检测法

直接检测法是指单独一个步骤的染色过程;它采用的荧光分子直标的一抗与目标蛋白特异性结合。

当检测位于细胞表面的抗原时，不推荐进行经奥园定，因为这个过程可能使抗体无法接触目标抗原。因此，必须进行高效工作，以保持未固定细胞存活，直至完成数据获取。这些直标抗体的应用加快了染色过程，因为目标抗原的结合和检测荧光基团标记在同一个步骤中完成。 普陀区Sigma抗体抗体上海Sigma抗体的供应商。

在将进行ChIP咳PCR实验的地点期近，不得打开含有扩增PCR产物约试幢。

确保您使用的抗体是在ChIP中给证过的抗体。关于ChIP抗体约完整选择过程，请参见默克官网表观遗传学。如果您正使用ChIP抗体，请增加抗体的解育时间。
一般1-10uq ChIP抗体是足够的。但是，所需抗体量可能取决于您的靶轮蛋白相对丰度和抗体与靶标的亲和力。
在交联前，单独准备一个平板，用于测定细胞数。重新评价每个反应的细您数。增加您的细晚数，特别是在尝试检测较任丰度的靶蛋白时。

在本节中，将讨论目前仍在应用中的主要免疫技术理论和实验。

免疫学研究时间轴

1900.Ehrlich提出抗体形成理论

1938.Marrack提出抗原-抗体结合假说

1962.Edelman & Porter解析抗体分子结构

1975.Kohler & Milstein开发单克隆抗体产品

1986.采用基因工程生产乙肝疫苗

1900.Landsteiner & Levine使用天然抗血清识别ABO血型

1900.Nuttall, Wasserman &Schutze 采用沉淀素试验区分人乳、牛乳和山羊乳

1900-01.Uhlenhuth 关于鸡蛋蛋白分型的工作，在医学工作中用沉淀素反应进行人血液染色铺平了道路

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IHC 是从根词immuno"（与在操作中所用的抗体有关）和"histo"（意思是"组织"）而得其名称。与之不同，免疫细胞化学（ICC）的根词是"cyto"（意思是"细胞"），是以培养或分离的细胞代替组织进行的。IHC和ICC广泛应用于基础研究，目的是了解生物标记物的分布和定位以及在生物组织或细胞中差异表达的蛋白。

在IHC/ICC中的主要步骤如下∶·样本制备·抗原修复· 抗体染色·抗体检测

成功的IHC实验取决于高质量抗体选择和合遇的实验浓度。每一种抗体都要根据实际的实验情况进行优化。即使是同一反应体系，针对不同的抗体适合的稀释浓度也是不同的。实验者可以以说明书上推荐的稀释倍数作为参考。

SNAPi.d.⑧2.0IHC加速器带来的主要改进·直观的设计，将封闭、洗涤、抗体孵育及标记等步骤结合起来· 不需要使用石蜡笔·抗体可以收集后继续使用

·切片操作时间大幅减少，洗涤步骤耗时大幅减少，可同时操作多达24涨切片

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如何选择抗体？

正确选择实验所需抗体可以提高实验成功率，达到事半功倍的效果！

请根据以下注意事项选择您的抗体

确定您研究所需的比较好应用方法

并非所有抗体均可用于每种实验方法。

确定您是在进行定性或定量实验

检查供应商说明书或网站，查看抗体是否适合特定的应用

方法，如WB、ELISA等。

检测样本类型

您的组织或细胞是否表达特殊蛋白？

您是否在尝试检测潜在的或活化的蛋白？ 静安区Merck抗体抗体咨询问价