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对于探索性研究，Western blotting仍是优先平台，是用于评估新抗体和其它蛋白检测分析

法（如ELISA、基于微珠的分析法、流式细胞术和免疫组织化学）的标准。新技术的开发**减少Western blotting过程需要的时间（例如默克密理博的 SNAP i.d.® 2.0系统，目录编

号SNAP2MM），提高了WB实验的效率。

Western blotting的基本程序涉及下述关键步骤

样本制备

凝胶电泳

转膜

封闭非特异性结合

加入抗体

检测

Western Blot 实验流程图

Troubleshooting

问题                     可能的原因                         处理方法

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对于成功的ChIP实验，选择适当的ChIP抗体是**关键的步骤之一。即使是比较高质量的抗体，即在经典的Western blot验证中表现非常好的抗体，也不一定适合ChIP。比较好只考虑使用在ChIP实验中专门验证过的抗体。一般的， ChIP实验之后会用定量PCR（qPCR）来验证某一特定DNA序列是否与靶蛋白有关。研究人员可以采用这种经典方法评估目标蛋白与已知的靶基因之间的相互作用。

ChIP实验可以细分为以下几个主要步骤：

样品制备

蛋白与DNA交联

细胞裂解和染色质片段化

染色质免疫沉淀 浦东新区Sigma抗体抗体代理价格组蛋白抗体的报价具体是多少呢?

随着药物研发和蛋白研究水平的快速增长，人们希望能在有限的样本中快速获得和分析大量数据用于疾病早期诊断，个性化***及药物开发等多个方面。而采用传统的“单重”蛋白检测法，如ELISA或蛋白免疫印迹分析法，获得这些信息越来越困难、不实际或受成本限制。因为多因子检测法允许在单独一份复杂和非均质样品中检测多重分析物，所以当分析血清、脑脊液、腺体分泌物或其它生理样品时，经证实这种方法是特别有效的。多重蛋白检测的方法常以双抗夹心法为基础，或固定在芯片上作为“平面阵列”或结合于微珠作为“悬浮阵列”。

如果实验试剂将用于进一步测量，应避免直接使用移液管从试剂瓶中移取。（氧化活性污采物可通过非特异性显色影响费底物），检查所用抗体和陶结合物的实验验稀释度

检查确保样品根据建议的样品操作抽提、配制和贮菱（聚丙烯试管，澄清样品的贮载温度为-20℃）。配置样品和标准 品时究分程匀检查您的移液器，必要时进行校准。在每次移液器移取后更换移液器吸头。加样后，充分震荡微孔板，使试剂混匀

检查自动微孔板洗板机能正常工作;在每个洗涤步骤后，必须完全除去残留液体。 上海益启生物的科研抗体销售电话。

模塞*器生产厂家说明书，校准Luminex仪器，至少每周一次或在温度变化3℃时校准。

一些Luminex仪器要求与试剂盒方案中所述不同的门）设置。使用仪器默认设置。

检查试剂盒说明书中正确的微珠区域或分析物选择。

含有机溶剂的样品，或如果样品为高粘性，应根据需要进行稀释或透析。PMimeLuminex*器4次，以除去气泡;如果有任何残留酒精或消毒液，用**或水洗涤4次

在所有解育步理中，保持微孔板和微珠混合物用果盖或铝培覆盖。加入适当的检测执体并继线t。 上海买Merck抗体哪家靠谱？嘉定区CST抗体抗体批发

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在本节中，将讨论目前仍在应用中的主要免疫技术理论和实验。

免疫学研究时间轴

1900.Ehrlich提出抗体形成理论

1938.Marrack提出抗原-抗体结合假说

1962.Edelman & Porter解析抗体分子结构

1975.Kohler & Milstein开发单克隆抗体产品

1986.采用基因工程生产乙肝疫苗

1900.Landsteiner & Levine使用天然抗血清识别ABO血型

1900.Nuttall, Wasserman &Schutze 采用沉淀素试验区分人乳、牛乳和山羊乳

1900-01.Uhlenhuth 关于鸡蛋蛋白分型的工作，在医学工作中用沉淀素反应进行人血液染色铺平了道路

1942.Coons等发表IHC关键研究。抗体是采用FITC标记的

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