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不均匀样品，如混浊液、样品中有颗粒节

样品和标准品混匀不亮分移液器加样不准

移液器在样品和/或标准品使用时存在题留

在解育过程中试剂混合不充分洗涤不充分

液体蒸发

稀释倍数的计算不正确修改实验程序样品处理不正确

处理办法：

确保*使用特定批次的试剂进行实验。

检查所用的实验稀释度（按国说明书推荐的稀释度进行实验）检查横孔板分光光度i计中的渡长。

检查在产品说明书中该批次的阐育时间。（酶底物的解育时间用于20-28℃范围内） 上海益启抗体批发价。黄浦区H3抗体抗体代理商

非特异性条带    抗体（一抗或二抗）浓度过高                  降低抗体浓度。

SDS可能引起对固定蛋白条带的非特            转膜后，振荡洗涤

异性结合                                在操作过程中不使用SDS。

条带扩散        抗体（一抗或二抗）浓度过高           降低抗体浓度。

               在凝胶上载入过多蛋白                 减少蛋白上样量。

黑色印迹，白色条带，   抗体（一抗或二抗）浓度过高    减少抗体浓度，特别是HRP偶联的二抗。    

或信号快速减少      

免疫沉淀

采用抗体-抗原沉淀(又叫免疫沉淀(IP))的方法将特异性蛋白从细胞或组织裂解液中分离出来。

模塞*器生产厂家说明书，校准Luminex仪器，至少每周一次或在温度变化3℃时校准。

一些Luminex仪器要求与试剂盒方案中所述不同的门）设置。使用仪器默认设置。

检查试剂盒说明书中正确的微珠区域或分析物选择。

含有机溶剂的样品，或如果样品为高粘性，应根据需要进行稀释或透析。PMimeLuminex*器4次，以除去气泡;如果有任何残留酒精或消毒液，用**或水洗涤4次

在所有解育步理中，保持微孔板和微珠混合物用果盖或铝培覆盖。加入适当的检测执体并继线t。

除非您正在研究组蛋白和组蛋白修饰，否则您应采用X-ChIP方案，以使您的靶蛋白与DNA的连接稳定。增加交联时间。
蛋白G磁珠能结合更大范践的执体，包括小鼠单克境抗体，为达到抗体选择的比较大灵活性，我们推荐使用蛋白A/G混合物（目录号16-663）。检测PCR引物的效果。加入相应的时维物，必要时重新设计引物。

关于ChIP中关键步骤的详细讨论及实验问题解答，请参考默克密理博染色质免疫沉淀指南（ChIP实验指南）。

酶联免疫吸附实验（ELISA） Upstate抗体哪家靠谱？

Troubleshooting

问题

微珠计数不足

本底过高

微珠不在制定的区域内或圈门中

整个微孔板的信号与本底相同

阳性对照的信号任样品信号过高或饱和

样品信号过低

样品和/或标准品CV值较大

微孔板洗板机吸液高度设置过低微珠混合物配制不当

样品颗粒物或粘度引起干扰

没有正确调整探针高度

本底孔受污染

洗涤不充分

Luminex*器没有正确校准或近期没有校准

没有正确词整门设置

微珠区域设置错误所用样品类型不正确*器没有洗涤或primed

做珠暴露于光下检测不正确或检测不到未加入抗体 Sigma抗体上海授权代理商。虹口区Upstate抗体抗体联系人

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关于抗体质量

抗体的质量决定了整个免疫检测的成败，

是在选择抗体时优先的考虑因素。

通常认为，特异性决定抗体功能，所以抗体必须拥有高质量，尤其是商业化的抗体。然而出人意料的是，通常情况并非如此。尽管理论上确实可以模拟和预测抗体结合的特异性，但是数十年的使用经验证明，一些因素如免疫原的抗原性和***性、抗体浓度、缓冲液、免疫作用和样品制备等因素都会对交叉反应和非特异性结合起到***的促进作用。

自70年代以来，当研究人员开始将抗体用作蛋白探针时，抗体性能不一致的问题一直困扰着他们。 黄浦区H3抗体抗体代理商