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这是一种用一步温和的离心完成渗滤而很大程度保持蛋白活性的好方法。 为了与下游应用兼容，常常需要用透析或渗滤方法对蛋白样品进行缓冲液置换。传统透析方法需要时间很长，多步透析容易造成样品丢失、损耗和失活，而且***还需要一步浓缩。新产品 Amicon® Pro 带来了突破性的革新，需一步温和的渗滤操作即可达到同时对样品进行换液和浓缩的目的。 Amicon® Pro建立小量蛋白样品纯化-换液/ 脱盐-浓缩流程 新标准 操作步骤的优化与简化往往带来更好的结果，数据的稳定性、可比性和高通量化随之得以改 善，默克密理博新上市的Amicon® Pro纯化超滤管创造性地将纯化、换液、脱盐和浓缩操作融为一体，减少样品转移损失和人为操作的繁琐和误差，使蛋白样品的处理更加标准化，数据结果便于评估和比较。宝贵的小量样本从此有了比较好的操作工具。上海超滤浓缩管销售公司电话多少？黄浦区Merck超滤浓缩管联系电话

无血清样品选择 3kDa 孔径是为了尽可能提高外泌体的回收率。 有血清样品选择100kDa/500kDa孔径是为了尽可能去除细胞分泌蛋白以及血清成分中小于外泌体的白蛋白造成的影响。 研究者可根据样品的粘稠程度，以及需要制备的目标外泌体 / 囊泡 / 颗粒的大小分布来选择和优化超滤孔径(3kDa/10kDa/30kDa/50kDa/100kDa)，以便达到更好的得率和操作体验。 样品体积大于 30mL 时可以考虑用超滤杯或 Centricon-70 超滤管，请注意搅拌式超滤杯在200mL 以内时吸附损耗可能较离心式超滤管略偏高。如需进一步提高特定外泌体的纯度，可选用包被相应抗体的磁珠进行亲和纯化精制。青浦区默克0.5ml超滤浓缩管咨询报价益启生物公司主营超滤浓缩管销售。

通量（超滤效率）及其影响因素 超滤过程中需要在速率和回收率之间平衡以期获得比较好的效果。滤膜的 通量的定义是流量除以面积，使用高 NMWL 滤膜可以增加通量，但同时 会降低回收率。选择膜和装置时需要同时考虑截留分子量和通量。而参 与影响通量的因素很多，包括： 压力：较为稀释的蛋白溶液或胶体悬液进行超滤时，流量随着跨膜压力 （TMP）的增大而增加。正压条件下操作，如 Stirred Cell 搅拌式超滤杯， 这种因素影响较为明显。如果极化影响***，通量会达到一个平台，甚 至可能随着压力的增加而降低。

Amicon® Ultra 4 mL 超滤管 -离心速度快而保持很高的回收率 4 种不同蛋白在不同截留分子量的 Amicon® Ultra 4mL 超滤管中浓缩（3kDa 细胞色素 C， 10kDa 细胞色素 C，30kDa BSA，100kDa IgG）， 测定在离心一定时间后的回收率。数据显 示所有样品在离心 15 分钟左右回收率均 >95%。 为了方便初次使用者选择**合适的超 滤管产品，默克密理博生命科学部网 站上提供选择指引，您需要按照提 示进行选择，**终会选出一款产品。 为每次实验选择**合适的， 您也能快速成为超滤高手！超滤浓缩管的优势您了解多少呢？

用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜， 75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。根据您的具体需求选择不同的超滤浓缩管设计。上海默克2ml超滤浓缩管商家

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虽然影响因素较多，我们通常建议截留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以比较大化样品的回收，同时节省过滤时间。截留微滤中膜的孔径大小通常以微米计，表示大于这一规格的颗粒将被膜截留。超滤膜根据NMWL分级，有时也用截留分子量（MWCO）。NMWL表示大多数大于这个值的分子将在超滤时截留。一个确定NMWL的超滤膜应该截留至少90%以上的这个大小的球形分子。但为了保险起见，实践中选择的膜孔径要小于目的分子。缓冲液置换时 膜截留分子量应该充分大于流过的溶质。当膜材料相同时，孔径减小 会增加排阻而减小滤过率。截留及产物回收的影响因素包括分子的形状、带电性质、样品浓度及组成成分、操作条件、使用的设备构造等。因此常常发生同样 NMWL 的膜对一定范围内的不同分子截留效果有一定差异的情况。使用超滤方法进行样品浓缩或除盐时，需要谨慎地选择合适的 NMWL膜和设备。虽然影响因素较多，我们通常建议截 留分子量约为目的分子分子量一半的膜，这样可以比较大化样品的回收，同时节省过滤时间。黄浦区Merck超滤浓缩管联系电话