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用SNAP i.d.o 2.0系统 系统设置 1.将SNAP i.d.9 2.0底座放在水平工作台上。2.通过推动管道末端的联接插件,将真空管道连接至系统背面。插入系统基座背面的快速断开接头,直至其滑动。注意:要断开管路连接,请用食指将管路连接器下方的卡舌向上推,然后将其拉出。管出来。3.将管道的另一端连接到真空源。使用一升的真空烧瓶作为疏水阀和一个Millex-FA。过滤器(目录号SLFA05010)可保护真空源不受污染,如下所示。注意:任何可以产生410毫巴(12 inHg)和34 L / min的真空源就足够了。如果是真空如果源的工作温度高于410毫巴,则SNAP i.d.2.0系统将自动调节真空度压力。如果真空源不足,则流经系统的流量可能会不一致,从而导致更长的时间。处理时间和/或抗上海益启生物的超滤杯询价公司电话。闵行区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器
2psi),并需要15秒的时间来灌注电池。加载,然后以27.6kPa(4psi)流动8和6组井停留15秒以捕获细胞。然后在69kPa处流动6组井韦尔斯1-5(1psi)持续30秒以冲洗装载通道这些条件可能需要根据您的细胞类型进行优化所需的捕获密度。6.评估显微镜的负载密度。如果负载不足发生了,rcpeat加载协议7.要清理去除未捕获细胞的腔室,请流过一个或多个入口孔在34.5kPa(5psil的情况下持续5分钟)的解决方案。在手动模式选项卡上:单击“运行自定义序列”按钮或转到ProtocolEditor输入所需的参数。有关创建的更多信息压力[kPa)协议请参阅CellASICONIX2微流体系统程序图6.1-5井的流速指导。8.进入“细胞培养”或“溶液切换”部分。盘子存放存放在室温下。不要存放在崇明区Merck电阻仪Merck仪器报价上海益启生物的WB实验加速器询价公司电话。
细胞直径以及样品浓度的Sensor选择指南:Sensor适合测量的颗粒测量浓度范围规格直径范围(um)40 um5o,000-1,500,0o0 cells/mL5-1560 um10,00o-5o0,oo0 cells/mL8-25第三步:移除Sensor。 实力概览 精确瞄准管控,一丝不苟。将长期动态细胞培养与活细胞延时成像技术完美的结合在一起,通过微培养控制器精确调控细胞生长区域的温度和气体成分,完全摆脱了外置培养箱的限制,重现细胞生长、复杂细胞模型、细胞运动模型所需微环境、实现了显微镜下对细胞的长期持续观察。必杀技:SOLO强者单细胞精确瞄准生长控制。创造单细胞环境,无论是细菌、酵母、哺乳动物细胞的单细胞反应都在掌控之中。 实力概览 伴随成长,温暖靠谱。与插入式细胞培养小窒和嵌套式培养板配套
关闭真空。同样,溶液将被吸收到印迹架中,并且表面可能看起来干燥。重要提示:孵育10分钟后,再抽真空。11.向下压框架并施加真空。等待5至8秒钟,直到框架完全空了。真空运行连续添加30 mL洗涤缓冲液(对于MultiBlot为15 mL)。重复洗涤步骤3次(共3次)4次洗涤)。12.关闭真空,然后从框架上取下吸墨架。从污点固定器中取出污点,并与适当的检测试剂。如果使用了MultiBlot孔空白,则卸下并清洗。 扩展一级抗体孵育:一小时至过夜1.执行《通用议定书》的步骤1至5。2.加入2.5 mL(对于MultiBlot),5 mL(对于Mini blot)或10 mL(对于Midi blot)1X一抗(浓缩液)通常在标准免疫检测过程中使用)。3.用盖子盖住吸墨纸固定架。如果需要的话,将其从底座上海关于细胞计数器的哪家靠谱?
阳光直射的地方。 细胞培养使用CellASICOONIX2微流体系统进行细胞培养1.从孔中吸出溶液以用于灌注(孔1-5)。向这些孔中添加350μL培养基。确保未使用溶液入口孔中充满了缓冲液。2.清空6号和8号孔,以确保在更换过程中正确交换溶液灌注。3.按照以下说明将微流体板密封到0NIX2歧管上CellASICOONIX2微流体系统用户指南。4打开CellASICOONIX2软件,选择“新建”之一实验选项,然后在下拉列表中找到B04A板。单击协议编辑器选项卡,然后输入所需的步骤,然后情况。对于1-5井,建议的压力为6.9-13.8kPa(1-2psi)可提供足够的营养,并且营养含量极低压力。有关创建协议的信息,请参阅CellASICB《ONIX2微流体系统用户指南》。5.为了监测细胞生长,将上海益启生物细胞计数器订购方便。普陀区Merck仪器报价
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润湿印迹。,对于大多数应用和大多数抗体而言,0.5%的脱脂/低脂干奶溶液可以提供足够的膜的阻塞。注意:请勿使用浓度高于0. 5%的干奶,因为它可能会导致吸墨纸架堵塞膜。如果使用其他封闭溶液,请参阅表5了解兼容性和推荐浓度。●在洗涤,封闭和抗体缓冲液中始终使用0.1%Tween8 20表面活性剂。这将减少溶液的表面张力,并确保孵育过程中抗体在印迹支架中的均匀分布。●由于SNAP i.d. @ 2.0系统中的免疫检测时间很短,因此建议在开始操作之前应准备一抗和二抗稀释液。●MultiBlot固定器所需的稀释抗体的总体积为2.5 mL,Mini blot固定器为5 mL,10 mL用于Midi印迹固定器。,每次需要洗30次(MultiBlot为15毫升),以确保每次洗完后都能完全清洗印迹孵化步骤。闵行区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器
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