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取上述200μL细胞液加入小室,下室(培养板)加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同,具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时,依据**细胞类型而定。孵育结束,小心取出细胞小室,吸掉小室上层培养液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%结晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料,立即用棉签擦去滤膜上层的细胞,自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞,随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞,然后用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。上海益启生物的细胞检测试剂盒询价公司电话。松江区培养基细胞培养联系人
•自噬调节剂套装 Autophagy Regulators Panel目录号189488,包括23种小分子调节剤,专门用于自噬过程研究,组分也可单独订购 •自噬流式检测试剂盒 FlowCellect™ Autophagy LC3 Antibody-based Assay Kit目录号FCCH100171,选择性透膜处理,去掉LC3-I的干扰,特异检测LC3-II,定量检测细胞自噬 •GFP-LC3稳定表达细胞系 lowCellect™ GFP-LC3 Reporter Autophagy Assay Kit§>^FCCH100170/ FCCH100181,稳定表达GFP-LC3细胞系,通过选择性透膜处理,能够特异检测LC3-II,用来研究自噬诱导或***,有CH0和U20S两种细胞系可供选择,也提供RFP版本 •表达GFP-LC3慢***试剂盒 LentiBrite™ GFP-LC3-II Enrichment Kit目录号17-10230,包含表达GFP-LC3的高滴度慢***颗粒和选择性透膜试剤,用来构建稳定表达GFP-LC3细胞系,也单独提供该慢***颗粒和RFP版本浦东新区血清细胞培养咨询问价上海益启生物的添加剂询价公司电话。
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