嘉定区土壤基因组DNA提取土壤DNA提取参数
内生菌共生于植物内部,要获得内生菌首先需要破碎植物组织。植物组织和内生菌在形态、硬度等性质上均有差异,想要获得更多内生菌基因组DNA,对裂解介质的选择是难点。2、相对于植物基因组,虽然内生菌包括细菌,***,放线菌等不同类型微生物,但其基因组*占微小部分单独提取内生菌DNA比较困难,提取到的是混合DNA,通过PCR才能鉴定。内生菌DNA提取思路:STEP1破坏植物释放菌体;STEP2破坏菌体释放核酸;STEP3提取DNA。有没有合适的上海益启生物的联系电话。嘉定区土壤基因组DNA提取土壤DNA提取参数
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PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中,
12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,土壤DNA提取保证正规产品——益启生物公司。
·样品用量太多:杂质和腐殖酸含量过高的样品,可使得当降低样品的用量·样品中含有二价金属离子:可在裂解液中加入EGTA。MP Bio土壤试剂盒。MP在研究土壤样本DNA纯化方法的过程中,针对土壤样本核酸纯化的三大难题:腐植酸含量高、微生物裂解难,难以高通量提取,给出了针对性的解决方案,推出了三种土壤基因组DNA提取试剂盒,具有以下特点:1、独特的抑制物出去技术,保证提取纯度好。2、完美配合自动化核酸提取仪,实现高通量提取上海益启生物的土壤DNA提取价格区间大概是多少?奉贤区FastDNA SPIN土壤试剂盒土壤DNA提取销售
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