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用超滤对分子进行分级 通过选定截留分子量的超滤操作能精确地将混在大分子中的小分子去 除的想法常常不切实际。事实上，膜的规格描述是基于截留而非通过 的性质。一项实验中，采用 100k NMWL 滤膜，大于 100kDa 的分子截 留率 >90%，但这时比膜孔径小的分子并不是完全自由地通过滤膜， 75kDa 的分子截留率为 83%，30kDa 的分子也有 32% 被截留。混合的 溶液中的各 种成分通过膜并不像单一成分的溶液那么简单和容易。实 践中，如果要分离两种大分子，它们之间的分子量差异应该达到 10 倍 以上，或至少膜的 NMWL 规格在两种蛋白之间，则可达到比较理想的 分离。如果蛋白溶液较为稀释，低压下操作也有助于达到更好的效果。那么超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢？黄浦区离心浓缩管联系人

蛋白亲和纯化（无需换液和浓缩） * 本操作受Amicon® Ultra-0.5 mL超滤管～1 mg蛋白的容量限制。体积较大而蛋白浓度较低的情况下也可以采用如上方法，但溶液体积和离心时间等需要略加优化。 3次低速离心，总耗时~75分钟（含60分钟孵育时间） 1. 在Amicon® Pro上样池中加入至多1000μL亲和纯化树脂（沉降的柱床体积）和至多9 mL漂洗缓冲液。1,000×g离心1 min平衡树脂。（柱床）树脂量≥ 500μL时采用2,000×g离心4 min。 2. 加入至多9 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h*，其间可温和搅动促进结合。长宁区默克15ml超滤浓缩管代理价格益启生物公司作为上海一家专业从事超滤浓缩管代理销售。

核苷酸截留分子量（NCO） 超滤膜的 NMWL 是用球形蛋白标定的，适合各种蛋白研究，但在核酸 和多糖纯化时则要考虑更多因素。这些分子的棒状的三维结构容易漏 过，相对于球形蛋白需要更致密的膜（截留分子量更小）。所以选择 滤膜是更多考虑的是核苷酸长度而非分子量。 浓差极化 浓差极化实质是溶质累积在膜表面造成的堵塞，产生除了膜本身截留分 子量以外的过滤限制。当溶质浓度较高时，会形成相当于第二层滤膜作 用的胶体层，干扰分子通过滤膜，同时降低流速。pH 值、缓冲液的成分 也会影响目的分子的状态而使浓差极化现象加剧或减轻。

超滤（UF）常用于分离溶液中极其微小的颗粒和不溶分子。虽然分离效果受到包括化学性质、电荷等多种因素影响，这种方法主要还是以分子大小为**基本的考虑。超滤膜截留1-1000kDa（MW）的分子，盐和水等小分子会透过，因此在大分子样品处理中得到了应用。胶状或微粒状物质也能够被截留。UF膜既可以用于透过样品也用于保留样品的纯化。样品***小于膜孔径，则经过膜处理可以达到除热源、澄清和与大分子污染物的分离的效果。如果目的分子远远大于膜孔径，膜处理则可以将小分子污染物去除而目的分子被浓缩。超滤方法相比沉淀法对于样品更温和，没有发生容易导致生物大分子失活的相变，而且在浓缩的同时可以完成对溶质的除盐。超滤的应用不限于蛋白样品的操作，也常用于核酸样品制备，包括分子克隆和质粒纯化。DNA和RNA样品起始浓度低至5ng/mL也可以被高效地在数分钟内被浓缩，回收率达到99%以上。对于不同的需求我们选择不同的超滤浓缩管系列。

离心方式的超滤方法进行溶液置换也被称为“渗滤”，操作时样品首先被浓缩，继而加入新的溶液，再次浓缩时，原溶液已经被换成选定的溶液。 化学相容性与溶出 样品的化学背景有时很多样而复杂，过滤的过程中很重要的一点是操作过程不应给样品带来新的污染。所以滤膜和装置与样品接触的其它部分都不能与样品中的化学成分发生反应而产生溶出污染。关于默克密理博各种微滤、超滤产品的化学相容性请参考产品使用说明书或垂询技术支持专线 。回收率及其重要性超滤的**终目的常常是很大程度地回收目标溶质，但膜的很多特性会对这一目的产生影响。影响回收的因素包括：• 标称分子量限制（NMWL）/ 核酸截留分子量（NCO）• 截留 • 浓差极化 • 通量益启生物公司主要超滤浓缩管代理销售。江苏默克离心浓缩管商家

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将装有样品的Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管接在Amicon®Pro上样池的下端。 3. Amicon®Pro上样池内加入预先准备好的1.5 mL含有染料的反应混合液。 4. 4,000×g离心15 min。 5. 优化选做：将样品在室温下多孵育30 min。 6. 上样池中加入1.5 mL PBS± NaN3。 7. 4,000×g离心15 min换液同时浓缩。 8. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管1,000×g离心回收标记好的抗体。 特点与优点： 特别的反转离心回收设计，滞留体积很小，样品损失少， 样品回收率通常>90% 浓缩倍数达到50-200倍 Ultracel®再生纤维素膜和聚丙烯外壳将吸附降至比较低 特别设计的死体积防止离干，保证样品回收率和活性 黄浦区离心浓缩管联系人