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2.0系统计算SNAP i.d.9 2.0系统所需的抗体浓度用于标准免疫检测的浓度标准SNAP i.d.o 2.0免疫检测免疫检测多印迹迷你印迹Midi污点_Ab浓度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗体量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗体量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比较终抗体稀释1：30,0001：10,0001：10,0001：10,000使用的抗体库存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每种抗体都是只有一个的，并且检测试剂的灵敏度各不相同，因此可能有必要进行调整抗体或抗原浓度，使用的检测试剂的类型或灵敏度或印迹X射线曝光时间。请注意，本指南只作为开发比较终抗体的起点浓度以获得所需的性能。表2.封闭，抗体和洗涤的建议体积SNAP i.d.o 2.0SNA上海益启生物Merck仪器订购方便。青浦区Merck手持细胞计数器Merck仪器批发

Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前，先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5％脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时，确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1％Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器（例如5毫升），慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL（用于MultBlot），5 mL（用于Mini blot）或10 mL（用于Midi印迹）抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔，回收托盘algn青浦区Merck手持细胞计数器Merck仪器批发益启生物是默克细胞计数器的代理商。

盘，请在步骤5之后插入托盘。有关详细信息，请参阅“抗体恢复”部分。 6.在整个表面上涂适量的一抗吸墨纸架的数量（对于MultiBlot为2.5毫升，对于迷你吸墨纸为5毫升，或10 mL用于Midi印迹）。7.在室温下孵育10分钟。解决方案将是吸收到污点固定器中，表面可能会变干。重要提示：请勿在吸尘器清洁后再使用真空吸尘器。孵育10分钟。8.向下压框架并施加真空。等待5-8秒，直到框架完全是空的。9.在连续运行真空的情况下，添加30 mL洗涤缓冲液（MultiBlot为15毫升）。重复洗涤步骤3次以上（总共4次洗涤）。当框架完全为空时，将TURN真空关闭。10.在印迹架的表面上涂适量的二抗（对于多印迹，为2.5 mL，5毫升用于迷你印迹，或10毫升用于Midi印迹）。在室温下孵育10分钟，然后

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x @ -FAgo过滤器（或等效过滤器）建议在保温瓶和真空源之间使用，例如o保护真空源免受污染。●将真空瓶连接到真空源的真空管●前肢●封闭剂，例如脱脂/低脂干奶（0.5％以下），酪蛋白，牛血清白蛋白（BSA）或其他市售的封闭剂，例如blok * -CH缓冲液（请参阅表5）抗体（单克隆和/或多克隆），检测试剂●洗涤缓冲液：Tris或磷酸盐缓冲盐溶液，pH 7.4，补充了Tween @ 20表面活性剂（TBST）或PBST）●转移蛋白的印迹吸笔座尺寸比较大印迹尺寸（厘米）多印迹4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般准则●如果蛋白质已经转移到已经干燥的PVDF膜上，请用100％重新润湿印迹甲醇，然后在组装前用蒸馏水冲洗。如果蛋白质已转移至硝酸纤维素膜干燥后，用蒸馏水重新上海益启生物的微流控细胞芯片分析仪询价公司电话。徐汇区Merck仪器联系电话

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