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94℃，20 秒，59℃，3分钟，30个循环；60℃，10分钟；4℃保存；电泳在ABI 3500XL仪器中进行；电泳上样体系为，1 μl PCR产物，9 μl甲酰胺，其中已加Liz。 实施例5 以二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒提取土壤尿液DNA 1）DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤，烘干，取100-200 mg土壤样品，加入样品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震荡混匀后，75℃加热裂解15分钟；最大转速离心5分钟，将上清液转移至新的样品管中，加入800 ul结合液，混匀；混合液转移至装有15 ul二氧化硅包裹的磁性纳米颗粒的离心管中，混匀后静止15分钟；上磁力架吸附2分钟，吸弃上清液；加入500 ul漂洗液，混匀，上磁力架吸附1分钟，吸弃上清；松江区土壤微生物土壤DNA提取代理价上海益启生物的土壤DNA提取操作是否简易？

取100-200 mg土壤样品，加入样品管中，然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k，震荡混匀后，75℃加热裂解15分钟；最大转速离心5分钟，将上清液转移至新的样品管中，加入800 ul结合液，混匀；混合液转移至装有石英膜的离心柱中，12000rpm离心1分钟；倒弃收集管中废液，加入500 ul漂洗液，12000rpm离心1分钟；倒弃收集管中废液，加入500 ul漂洗液，12000rpm离心1分钟；倒弃收集管中废液，12000rpm离心3分钟，将离心柱转移至新的离心管中，70℃加热3分钟；加入20 ul洗脱液，70℃加热3分钟；12000rpm离心1分钟，丢弃离心柱，离心管中液体即为DNA溶液。 2）PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒，10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板，扩增程序为，95℃，11分钟；

。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁，可能需要额外的破碎裂解。问题4：洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办？解决思路：·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前，可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5：A260/A280比值偏低怎么办？解决思路：·蛋白去除不干净：增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净：增加洗涤次数。问题6：A260/A280比值高怎么办？解决思路：·RNA含量高，可在洗脱之后的溶液中加土壤DNA提取是良好的科学仪器。

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