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2psi),并需要15秒的时间来灌注电池。加载,然后以27.6kPa(4psi)流动8和6组井停留15秒以捕获细胞。然后在69kPa处流动6组井韦尔斯1-5(1psi)持续30秒以冲洗装载通道这些条件可能需要根据您的细胞类型进行优化所需的捕获密度。6.评估显微镜的负载密度。如果负载不足发生了,rcpeat加载协议7.要清理去除未捕获细胞的腔室,请流过一个或多个入口孔在34.5kPa(5psil的情况下持续5分钟)的解决方案。在手动模式选项卡上:单击“运行自定义序列”按钮或转到ProtocolEditor输入所需的参数。有关创建的更多信息压力[kPa)协议请参阅CellASICONIX2微流体系统程序图6.1-5井的流速指导。8.进入“细胞培养”或“溶液切换”部分。盘子存放存放在室温下。不要存放在上海益启生物的WB实验加速器询价公司电话。浦东新区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器咨询问价
密封的平板/m歧管组件放在倒置显微镜。6.在扩展的灌注实验中,定期将7孔倒空至避免出口溢流到歧管和灌注系统中。在CellASICOONX2软件的“运行”选项卡上,单击“暂停”按钮。按下仪器上或“工具”下拉菜单中的“密封”按钮在下拉菜单中,单击开封板。从板,并抽吸良好。7.将歧管重新密封到板上,然后在在“运行”选项卡上,单击“恢复”以重新启动每个融合协议。解决方案切换1.从选定的进水口(1-5)吸出溶液。加至350μL所需的解决方案。如果少于四个单位(A-D)使用时,用缓冲液填充未使用的进口井,以防只托水。2.根据以下说明将微流体板密封到ONIX2歧管上:CellASIC@ONIX2微流体系统用户指南。3.打开CelIASICOONIX2软件,在下拉列表,然后单击ProtocolEditor选杨浦区Merck手持细胞计数器Merck仪器上海益启生物Merck仪器订购方便。
盘,请在步骤5之后插入托盘。有关详细信息,请参阅“抗体恢复”部分。 6.在整个表面上涂适量的一抗吸墨纸架的数量(对于MultiBlot为2.5毫升,对于迷你吸墨纸为5毫升,或10 mL用于Midi印迹)。7.在室温下孵育10分钟。解决方案将是吸收到污点固定器中,表面可能会变干。重要提示:请勿在吸尘器清洁后再使用真空吸尘器。孵育10分钟。8.向下压框架并施加真空。等待5-8秒,直到框架完全是空的。9.在连续运行真空的情况下,添加30 mL洗涤缓冲液(MultiBlot为15毫升)。重复洗涤步骤3次以上(总共4次洗涤)。当框架完全为空时,将TURN真空关闭。10.在印迹架的表面上涂适量的二抗(对于多印迹,为2.5 mL,5毫升用于迷你印迹,或10毫升用于Midi印迹)。在室温下孵育10分钟,然后
x @ -FAgo过滤器(或等效过滤器)建议在保温瓶和真空源之间使用,例如o保护真空源免受污染。●将真空瓶连接到真空源的真空管●前肢●封闭剂,例如脱脂/低脂干奶(0.5%以下),酪蛋白,牛血清白蛋白(BSA)或其他市售的封闭剂,例如blok * -CH缓冲液(请参阅表5)抗体(单克隆和/或多克隆),检测试剂●洗涤缓冲液:Tris或磷酸盐缓冲盐溶液,pH 7.4,补充了Tween @ 20表面活性剂(TBST)或PBST)●转移蛋白的印迹吸笔座尺寸比较大印迹尺寸(厘米)多印迹4.5 x8.4小型的7.5 x 8.48.5 x 13.5。 一般准则●如果蛋白质已经转移到已经干燥的PVDF膜上,请用100%重新润湿印迹甲醇,然后在组装前用蒸馏水冲洗。如果蛋白质已转移至硝酸纤维素膜干燥后,用蒸馏水重新高质量的细胞分析仪,保证您的实验结果。
2.0系统计算SNAP i.d.9 2.0系统所需的抗体浓度用于标准免疫检测的浓度标准SNAP i.d.o 2.0免疫检测免疫检测多印迹迷你印迹Midi污点_Ab浓度1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升1毫克/毫升所需抗体量_ 1微克0.25微克0.5微克1微克使用的抗体量30毫升2.5毫升5毫升10毫升比较终抗体稀释1:30,0001:10,0001:10,0001:10,000使用的抗体库存1微升0.25微升0.5微升1微升由于每种抗体都是只有一个的,并且检测试剂的灵敏度各不相同,因此可能有必要进行调整抗体或抗原浓度,使用的检测试剂的类型或灵敏度或印迹X射线曝光时间。请注意,本指南只作为开发比较终抗体的起点浓度以获得所需的性能。表2.封闭,抗体和洗涤的建议体积SNAP i.d.o 2.0SNA关于细胞分析仪的询价电话。浦东新区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器咨询问价
一个好的微流控细胞芯片分析仪需要具备哪些特点您知道吗?浦东新区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器咨询问价
Westem HRP基材。高背景分锁不足更改为不同的阻止解决方案。吸笔架不够湿组装前,先将吸墨纸架弄湿。阻塞解决方案可能有始终准备新鲜的0.5%脱脂/低脂干奶。降级的抗体浓度过高降低抗体的浓度。吸笔架朝上放置将印迹架朝上放在蛋白素框架中。在框架中洗涤不足进行至少4次每次30 mL的洗涤。添加清洗剂时,确保真空连续运行缓冲。整个系统电平不一致的信号确保系统在平坦的水平表面上。污点抗体不均匀补充封闭液和抗体稀释剂遍及整个表面0.1%Tween 20表面活性剂。吸墨纸架使用小量移液器(例如5毫升),慢慢散布整个印迹中的抗体。应用至少2.5 mL(用于MultBlot),5 mL(用于Mini blot)或10 mL(用于Midi印迹)抗体。抗体体积低没有抗体回收盘确保抗体中的孔,回收托盘algn浦东新区MerckAmicon搅拌式过滤器Merck仪器咨询问价
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