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(a)土壤裂解液,其组成成分包括表面活性剂、螯合剂、pH缓冲剂; 所述表面活性剂为:十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、月桂酰基肌氨酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40、十六烷基三甲基溴化铵中的一种或两种及以上的混合,所述表面活性剂的质量浓度为1-100g/L,推荐的表面活性剂成分是十二烷基硫酸钠或十二烷基磺酸钠中的一种或两种的混合,推荐的表面活性剂质量浓度为1-10g/L; 所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钾中的一种或两种,所述离液盐的浓度为1-100 mmol/L;上海益启生物家卖的土壤DNA提取包售后吗?长宁区土壤DNA提取试剂盒土壤DNA提取代理商
。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁,可能需要额外的破碎裂解。问题4:洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办?解决思路:·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前,可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5:A260/A280比值偏低怎么办?解决思路:·蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净:增加洗涤次数。问题6:A260/A280比值高怎么办?解决思路:·RNA含量高,可在洗脱之后的溶液中加徐汇区土壤DNA土壤DNA提取销售上海益启生物公司土壤DNA提取的优势。
土壤中含有大量的二氧化硅成分,因此,对土壤样品进行DNA提取时,需要考虑样品来源的二氧化硅对DNA的结合,一旦DNA与样品来源的二氧化硅发生结合,DNA就会随着土壤固体颗粒物质一起被去除。 尿液中含有一定量的DNA,可以通过多种方法提取DNA,并用于PCR检测、STR分型检测、二代测序分析;但是,尿液中DNA含量较低,尿液浸润土壤后,被土壤吸附的DNA含量更低,要针对土壤尿液进行DNA提取,具有一定难度。 技术实现要素: 本发明为解决上述存在的问题,提供了一种土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,其解决技术问题的技术方案是: 土壤尿液DNA提取试剂盒,包括以下试剂:
PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例3 以玻璃纤维膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有玻璃纤维的离心柱中,上海关于土壤DNA提取的哪家靠谱?
加入500 ul漂洗液,混匀,上磁力架吸附1分钟,吸弃上清;70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,震荡混匀,70℃加热3分钟;上磁力架吸附1分钟,上清DNA溶液转移至新的离心管中。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 以上所述*为本发明的具体实施方式而已,并不用于限制本发明,对于本领域的技术人员来说,本发明可以有各种更改和变化;凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。益启生物的土壤DNA提取怎么样?宝山区土壤基因组土壤DNA提取咨询报价
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与现有技术相比,本发明技术克服了样品土壤来源的二氧化硅对DNA的吸附,从而减少了不必要的DNA损失,可达到获取高质量、高产量土壤尿液DNA目的。 附图说明 图1是本发明实施例1中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图2是本发明实施例2中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图3是本发明实施例3中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 图4是本发明实施例4中提取的DNA的复合STR扩增图谱。 具体实施方式 下面将结合本发明的附图,对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述。长宁区土壤DNA提取试剂盒土壤DNA提取代理商