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12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;94℃,20 秒,59℃,3分钟,30个循环;60℃,10分钟;4℃保存;电泳在ABI 3500XL仪器中进行;电泳上样体系为,1 μl PCR产物,9 μl甲酰胺,其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1)DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤,烘干,黄浦区土壤DNA提取土壤DNA提取咨询问价上海益启生物卖的土壤DNA提取是正规产品吗?
取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟;最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀;混合液转移至装有石英膜的离心柱中,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,加入500 ul漂洗液,12000rpm离心1分钟;倒弃收集管中废液,12000rpm离心3分钟,将离心柱转移至新的离心管中,70℃加热3分钟;加入20 ul洗脱液,70℃加热3分钟;12000rpm离心1分钟,丢弃离心柱,离心管中液体即为DNA溶液。 2)PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒,10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板,扩增程序为,95℃,11分钟;
取纯度。绝招四:***的硅胶柱膜及配套耗材,能特异性高效吸附核酸,比较大限度截留DNA分子,且柱容积大,可以减少结合时离心的次数。四大绝招傍身,各种类型土壤的样本统统搞定,再让我们看看TA在江湖上的表现吧。2.好不好用,数据来说话。1.提取不同类型土壤基因组DNA收率及纯度结果。含高腐殖酸有机营养土、水稻土、花坛土、盐碱土、沙漠土等土壤样本,DNA提取收率及纯度结果如下表:Sample Type:Organic soil、Paddy soil、Flower全网优惠的土壤DNA提取在哪里购买?
-24 5G仪器和裂解介质E管同时使用可在40秒内快速裂解难处理样本,例如***孢子、内生孢子、革兰氏阴性菌和酵母等。释放出来的DNA经过硅胶基质离心纯化,得到的DNA可以直接进行下游PCR反应、限制性内切酶消化、电泳和任何其他所需的应用。产品特点:1.适用于不同类型的土壤样本,以及废水、污泥等样本。该试剂盒中不存在也不需要再使用有危害的有机试剂。3.DNA产量高、纯度高。4.去除腐殖酸和RCR抑制剂。应用实例:提取多种样本的500mg上海益启生物公司是有授权的土壤DNA提取公司吗?金山区土壤DNA土壤DNA提取规格
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。如果样品中的目的微生物含有比较厚的细胞壁,可能需要额外的破碎裂解。问题4:洗脱的DNA颜色为黄色或棕色怎么办?解决思路:·腐殖酸含量高【1】在洗涤步骤之前,可先用4.5M-5.5M的异硫氰酸胍溶液洗涤1-2次。【2】减少样本用量。问题5:A260/A280比值偏低怎么办?解决思路:·蛋白去除不干净:增加蛋白沉淀离心的次数。·洗涤不干净:增加洗涤次数。问题6:A260/A280比值高怎么办?解决思路:·RNA含量高,可在洗脱之后的溶液中加徐汇区土壤基因组土壤DNA提取一级代理
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