上海CyFlow系列倍性分析仪技术

时间:2023年03月16日 来源:

Sysmex倍性分析仪是一种特殊的流式细胞仪。倍性分析与流式细胞术:流式细胞分析,又称流式细胞术(FCM),是以高能量激光照射高速流动状态下被荧光色素染色的单细胞或微粒,测量其产生的散射光和发射荧光的强度,从而对细胞(或微粒)的物理、生理、免疫、遗传、分子生物学性状及功能状态等进行定性或定量检测的一种现代细胞分析技术。其特点特点:(1)单细胞分析(2)快速分析(3)多参数相关测量(4)定量分析细胞(5)统计学意义明显在分子生物学层次上,利用流式细胞仪测定植物基因组DNA含量,可直接确定再生植株的倍性。上海CyFlow系列倍性分析仪技术

CyFiowAnalyser倍性分析仪液流系统:-专利设计薄片状人造石英流动室-生物安全系统控制进样口,防止样品溢出,降低交叉污染-计算机精确控制样品推进器-进样体积可高达1000ul,进样速度在0.2ul/s至20ul/s间调节-鞘液和废液液面水平自动检测,异常状态自动报警软件其他:-WindowsTM7操作系统-CyViewTM软件支持实时数据获取,显示和分析,提供标准的FCS数据格式-DNA直方图和点状图显示(64-4096检测通道)-直接报告为PDF格式,数据导出至Excel和Powerpoint格式-自动进行96孔板倍性分析。深圳Sysmex倍性分析仪生命科学用品分选型流式细胞仪:既能流式分析,还能对分析的目的细胞进行分选。

拟南芥是一种生长迅速的小型植物,可进行范围广的核内复制,在不发生有丝分裂的情况下进行基因组扩增。该物种含有有花植物中较小的基因组,约157Mb,C值为0.321pg。这些特征使得拟南芥特别适合作为测定基因组大小的内参,并且可以用于仪器线性度的质量控制。用于流式实验的植物样品通常只需少量植物组织。使用标准手术刀片将植物组织切碎并浸泡于缓冲液中,过滤含植物细胞核的匀浆以去除大的碎片,用DNA特异性荧光染料进行标记,然后在流式细胞仪上采集数据,根据每个细胞核的荧光强度来计算DNA含量。通过与已知标准品比较,可以用荧光强度换算出DNA含量的相对值。拟南芥通常用作内参,只需将内参样品和未知样品的细胞核同时进行分离、染色和分析即可。

提取高质量的细胞核用于倍性检测至关重要,Peng 等比较了刀切法和研磨法提取棉花细胞核的效果,结果发现,刀切法提取的细胞核质量更高,因此我们选择刀切法来提取棉花细胞核。根据其他植物材料已有的研究报道,植物取材需要考虑样品易获性、细胞核型的稳定性和保存性等因素。如果材料选取不当,会导致提取的细胞核颗粒较少,生成大量的杂质,甚至形成变异系数较大的 DNA 峰。本研究以棉花的老叶和嫩叶为材料制备样品进行对比,结果表明棉花幼嫩叶片检测效果好,完全可以作为倍性鉴定试材。流式细胞仪具有制样简单用量少、操作高效快速且数据重复性高等优势。

染色体分析传统上通过对中期扩散进行核型分析,或通过对间期细胞或中期扩散进行荧光原位杂交 (FISH) 进行。流式细胞术在 1970 年代被引入作为分析染色体数量(倍性)和结构(端粒长度)的新方法,其数据解释主要基于荧光强度。主要由于分析方面的挑战,这项技术很少被人类细胞遗传学应用所采用。成像流式细胞术的引入,以及在标准多参数流式细胞术定量工具中添加数字图像,增加了一个新的维度。当数据只限于荧光强度时,显示染色体和 FISH 信号的能力克服了固有的困难。这个领域现在正在向前发展,正在开发评估悬浮全细胞(正常和恶性)染色体数量和结构的方法。近的一项进展是包括免疫表型分析,这样抗原表达可用于识别特定细胞的特定染色体及其异常。这种能力已在血*中得到证实,例如慢性淋巴细胞白血病。可实现的高灵敏度和特异性突出了流式细胞术在细胞基因组应用(即诊断和疾病监测)中的潜在成像应用。这篇综述介绍并描述了成像流式细胞仪在人类染色体染色体分析中的发展、现状和应用。我们开发并验证流式细胞术的倍性鉴定方法,用它来探索倍性比的季节性波动和影响该物种野生种群的环境因素。国产国产倍性分析仪生命科学用品

流式细胞仪是以流式细胞术为理论基础,集流体力学、激光技术、和计算机为一体的一种新型高科技仪器。上海CyFlow系列倍性分析仪技术

使用倍性分析仪 ,对 4 8种培养多年不同基因型的柑橘愈伤组织的细胞DNA含量进行了测定。结果发现 ,除了路比葡萄柚、尾张和金诺橘等 3种愈伤组织变异较小 ,未出现第二个峰以外 ,有 93 8%的基因型的愈伤组织的细胞均出现了DNA含量加倍的细胞。通过DPAC分析软件分析得知 ,凤梨甜橙三倍体、宁波金柑、长沙橘、鲁斯脐橙、国庆 4号和卡特夏橙等 6种愈伤组织的细胞DNA含量还出现了三倍增加及非整倍增加的现象。在待测的 4 8种愈伤组织中 ,DNA含量变异细胞的百分率较大者为凤梨甜橙三倍体 ,达 18 5 1% ;较小者为暗柳橙 ,为 4 70 %。通过邓肯氏新复极差分析得知 ,不同基因型的DNA含量变异细胞的百分率之间存在差异明显性。在相同继代培养基和相同继代周期的条件下 。上海CyFlow系列倍性分析仪技术

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