溶出介质(EP

杀灭曲线的建立：通过建立杀灭曲线（剂量反应曲线），确定能够杀死未转染宿主细胞的较低浓度，从而筛选得到稳定表达目的蛋白的细胞株。建立杀灭曲线至少选择5个浓度。1、按照20-25%的细胞密度将未转化的细胞铺在合适的培养板上，37℃，CO2过夜培养（需要更高密度，可增加接种量）。2、根据细胞类型，设定合适的浓度梯度。以哺乳动物细胞为例，可设定50，100，250，500，750，1000μg/mL。3、第2天换用新鲜配制的含有相应浓度药物的培养基，每个浓度做三个平行孔。4、接下来每3-4天更换新的含药物培养基。5、按照每2天进行活细胞计数，来确定杀灭未转染细胞的恰当浓度。通常7-10天内能够杀死绝大多数细胞的较低浓度为筛选用的工作浓度。丁胺卡那霉素给药说明：患者应给予足够的水分，以减少肾小管损害。溶出介质(EP,pH1.3)

Laemmli 加样缓冲液(2×)是一种以溴酚蓝为染料的 2 倍浓缩的蛋白上样缓冲液，主要 由 2-ME、SDS、溴酚蓝、Laemmli 分层缓冲液等组成，可用于不连续蛋白电泳的上样。 组成： 编号 名称 PE0005 5ml Storage Laemmli 加样缓冲液(2×) 使用说明书 4℃ 1份 操作步骤(光供参考)： 1、 取适量的蛋白样品和 Laemmli 加样缓冲液(2×)等量混合，充分混匀。 2、 直接上样到 SDS-PAGE 胶加样孔内即可。 3、 通常电泳至蓝色染料到达 PAGE 胶的底部附近即可停止。 注意事项： 1、 Leagene Laemmli 加样缓冲液(2×)中含少量β-巯基乙醇，有轻微刺激性气味。 2、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 12 个月有效。亦可室温短期保存。溶出介质(EP,pH1.3)pH缓冲溶液有何用途：检测pH电极的性能。

pH缓冲溶液的效能指标：pH缓冲溶液抵抗外加强酸、强碱的能力可以用缓冲容量β来表示，缓冲容量的意义是，使1L缓冲溶液的pH增大1个单位时需加入的强碱（NaOH）的物质的量（mol），或减小1个pH单位时时需加入的强酸（HCl）的物质的量，显然β越大，缓冲外加强酸强碱的能力就越大。β与pH、总浓度C及共轭弱酸碱的浓度比有关。式中的C为弱酸+弱酸盐（或弱碱+弱碱盐）的总浓度，显然，总浓度越大，缓冲能力就越大。式中的两个δ分别为弱酸HA、弱酸根A-（又称共轭碱）的分布分数值，δ定义为其平衡浓度与总浓度之比（我以前在论坛中曾作过介绍），它们也是pH值的函数。数据学上可以证明：恒定C时，当两个分布分数值均等于0.5时，缓冲容量较大，其实用意义是：选择缓冲溶液体系时，应该选弱酸与弱酸盐的浓度比接近1，而pH值仍能满足配制要求的体系，对于弱碱及弱碱盐溶液，也有同样的要求。

缓冲溶液的计算分为两大类：（1）已知共轭酸碱的浓度或质量，计算pH值。（2）已知pH值，计算配制时要满足的浓度和质量配制缓冲溶液时，有多种组合的方法，常见的有以下几种（1）两种溶液混合：如，NH3+NH4Cl溶液，NaOH溶液 +NH4Cl溶液，NH3+HCl溶液。（2）固体试剂+溶液：如，NH3+NH4Cl固体，NaOH固体 +NH4Cl溶液，HAc+NaAc固体。（3）两种固体试剂溶解混合：如，NaOH固体 +NH4Cl固体，Na2CO3固体+NaHCO3固体。由此可见，缓冲溶液的计算类型是很丰富的。实验中的配制一般是按共轭酸碱的量来称取或量取试剂后，再溶解混合到指定体积。但分析化学学习中的计算类型则可以演绎出十几种计算情况。丁胺卡那霉素给药说明：长期用药可能导致耐药菌过度生长。

盐酸强力霉素溶液科研实验中试剂取用应注意事项：1. 固体试剂的取用:取用固体药品时药匙必须是干净的.一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂.药匙每取完一种试剂后都必须用干净的纸擦拭干净,以备下次使用.药匙的两端为大小两匙,取固体量较多时用大匙,较少时用小匙。2. 取用不定量(较多)液体——直接倾倒a. 瓶塞必须倒放在桌面上【防止药品腐蚀实验台或污染药品】；b. 直接倾倒时瓶口必须紧挨试管口，试管45度，并且缓缓地倒【防止药液损失】；c. 贴标签的一面必须朝向手心处【防止药液洒出腐蚀标签】；d. 倒完液体后，要立即盖紧瓶塞，并把瓶子放回原处，标签朝向外面【防止药品潮解、变质】。科研实验中试剂取用应注意事项：视线与量筒内液体的凹液面的低处保持水平。溶出介质(EP,pH1.3)

氨苄青霉素溶液配置：称取5g Ampicillin置于50ml塑料离心管中。溶出介质(EP,pH1.3)

注意事项：1.对诊断的干扰:可引起直接抗球蛋白试验(Coombs试验)阳性;干扰血清叶酸浓度和维生素B12浓度测定结果;可干扰利用分光光度计或颜色改变而进行的各项尿液分析试验的结果，因使用利福平后可使尿液呈橘红色或红棕色。使用利福平可使血液尿素氮、血清碱性磷酸酶、血清丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、血清胆红素及血清尿酸浓度测定结果增高。2，酒精中毒，肝功能损害者慎用。一般肝病患者慎用。3.利福平可能引起白细胞和血小板减少，并导致齿龈出血和传染，伤口愈合延迟等。此时应避免拔牙手术，并注意口腔卫生，刷牙及剔牙均需慎重，直至血象恢复正常。溶出介质(EP,pH1.3)

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