植物电穿孔缓冲液

时间:2024年01月13日 来源:

弱酸-弱碱型缓冲溶液的构成与配制。这类缓冲溶液的组成为:弱酸+弱酸盐(即共轭碱)、弱碱+弱碱盐(即共轭酸)。常见的实例有:HAc-NaAc、HAc-NH4Ac(微酸性)、NH4Cl-NH3.这类缓冲溶液的实验室配制方法一般是根据溶液组成和浓度要求,直接称取或量取弱酸、弱酸盐溶液或弱碱、弱碱盐溶液来配制。其实,这类缓冲溶液还可以用强酸与弱碱、强碱与酸来配制,归纳起来,应该有三种配制方法:(1)弱酸+弱酸盐,弱碱+弱碱盐例如,HAc-NaAc、NH4Cl-NH3(2)弱酸(过量)+强碱(适量),弱碱(过量)+强酸(适量)例如,HAc(过量)-NaOH(适量)、NH3(过量)-HCl(适量)。这类缓冲溶液需要的共轭碱(NaAc)或共轭酸(NH4Cl)是通过反应后产生的。(3)弱酸盐(过量)+强酸(不足量)或弱碱盐(过量)+强碱(不足量)例如,NaAc(过量)+HCl(适量),NH4Cl(过量)+NaOH(适量)缓冲溶液需要的弱酸(HAc)或弱碱(NH3)则通过反应后产生。pH缓冲溶液有何用途:在一般精度测量时检pH计是否需要重新标定。植物电穿孔缓冲液

植物电穿孔缓冲液,液体试剂

加药时间:由于基因转染到细胞内之后要一段时间才能表达出蛋白质。所以筛选不能太早;但是也不能太晚,因为转染了外源基因的细胞代谢负荷较大,增值较慢,时间长了就会被没有外源基因转入的细胞所淹没,终导致筛选不出阳性克隆,一般要在转染24小时之后才开始加G418筛选。随着细胞的代谢G418的浓度和活性都回下降,所以每3~5天都要更换一次含有G418的筛选液。这时药物浓度可以降至200ug/ml。培养液:加药筛选约6天左右,细胞会大量死亡,孔中只剩下的细胞。这时会出现两个问题:1.死亡的细胞会裂解释放出有害物质,导致那些有neo表达的阳性细胞死亡,即非选择性死亡。2.孔中细胞数目很少,细胞之间的信号会变得很弱,也会导致阳性细胞的状态不佳甚至死亡。这个时候需要一种特殊的培养液:假如你要转染3T3细胞,在3T3细胞汇合度达到80%的时候,换液,培养过夜之后收集培养液,通过滤器消毒,和新鲜的培养液按1:1混合备用。再转染后筛选过程中就可以应用这种培养基。硫堇染色液(0.4%)固体试剂的取用:一支药匙不能同时取用两种或两种以上的试剂。

植物电穿孔缓冲液,液体试剂

非极性溶剂。脂肪油:脂肪油系指麻油、豆油、棉籽油、花生油等植物油。能溶解油溶性的药物,本品多用于外用液体试剂,如洗剂、搽剂等。脂肪油易氧化、酸败。液体石蜡:本品为饱和烷烃化合物,化学性质稳定。可分为轻质与重质两种,能与非极性溶剂混合,能溶剂生物碱、挥发油及一些非极性的药物等,在胃肠代中不分解不吸收,有润肠通便的作用。可做口服制剂与搽剂的溶剂。油酸乙酯:本品是油溶性的药物的常用溶剂。在空气中易氧化、变色,故使用时常加入抗氧剂。乙酸乙酯:无色油状液体,微臭。具有挥发性、可燃性。在空气中容易氧化、变色,需要加入抗氧剂。

液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同,不同之处是挑取菌体的接种环放入液体培养基后,应在液体表面处的管内壁上轻轻磨擦,使菌体从环上脱落,混进液体培养基,塞好试管塞后,摇动液体,使菌体在液体中分布均匀,或用试管振荡器混匀。向液体培养基中接种量大或要求定量接种时,可将无菌水或液体培养基注入菌种试管,用接种环将菌苔刮下,再将菌种悬液以无菌吸管定量吸出加入,或直接倒入液体培养基。如果菌种为液体培养物,则可用无菌吸管定量吸出加入或直接倒入液体培养基。整个接种过程都要求无菌操作。检测试剂盒在检测试剂盒中一般有3次加样步聚。

植物电穿孔缓冲液,液体试剂

主要试剂配制:(1)PBS:PBS粉剂每袋加ddH2O定容至1000mL,调pH7.2,高压灭菌,4℃保存备用。(2)RPIM-1640培养基:临用前根据需要加15%胎牛血清,较后按1%体积分数加入双抗贮存液(青霉素+链霉素),使青霉素和链霉素的终浓度分别为100 U/mL和100 U/mL,置于4℃冰箱保存。(3)台盼蓝染液:称取4g台盼蓝,于研钵中用少量双蒸水研磨,加双蒸水至100mL,1500rpm离心15min,吸取上层液,即为4%水溶液。用前,用1.8%氯化钠溶液稀释1倍,即为2%台盼蓝染液。液体培养基接种向肉膏蛋白胨液体培养基中接种少量菌体时,其操作步骤基本与斜面接种时相同。苯唑西林溶液(Oxacilli,64mg/ml)

检测试剂盒的要点有哪些?在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。植物电穿孔缓冲液

检测试剂盒实验经验分析:吸取液体时,要用量程和需要量接近的去吸,减少误差。将液体加到酶标孔中时,避免头和孔内液体接触,可使头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去(应该是加样的时候,板上稀释不算的吧)。液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能(注意是平行晃动,即上下or左右)。温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发(老办法是放入湿盒内,纱布加点无菌水即可)。植物电穿孔缓冲液

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