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时间:2023年06月05日 来源:

外泌体本身的惰性相当高,但它们与细胞膜融合可将所携带的物质和信号传递到受体细胞并改变其生物学功能,因此,外泌体是纳米药物递送或基因治理的潜在载体。外泌体作为功能性小RNA和蛋白质的天然载体也引起了药物递送领域的极大兴趣,因为它可以利用这些囊泡治理性递送各种核糖核酸分子、肽和合成药物。外泌体作为疾病诊断标志物的潜在应用依赖于基于外泌体的药物递送系统的技术突破,要将其用于临床治理,外泌体的大规模工业化生产还面临很大的挑战。首先,对外泌体的具体合成机制、功能了解并不是非常详细。其次,现在缺乏经济有效的外泌体分离技术。外泌体具有异质性,即使是同一种细胞分泌的外泌体都有可能具有比较大功能区别。外泌体之家官网

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尺寸排除色谱法是使用聚合物凝胶或类似的固定相柱进行外泌体分离的技术,样品以重力滴落的方式收集。流体力学半径较小的样品组分进入凝胶孔隙后,需耗费相对较长的时间通过凝胶柱,导致延迟洗脱,实现不同粒径大小颗粒分离。尺寸排除色谱法可以与差速离心法结合而不会明显损失外泌体,保证产量的同时可有效去除杂质蛋白,更适合目标蛋白质组学和miRNA的分析。静水过滤透析法主要利用静水压力迫使样品中不同特定大小分子先后通过透析管,其中溶剂和小溶质很容易通过透析管,而较大的颗粒,如外泌体和其他囊泡,仍留在透析管中而被收集。海洋生物外泌体Dil随着EV研究倍受世界瞩目,各国启动了大型研究项目。

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Knepper等通过对透射电镜得到的200个囊泡进行粒径分析,结果表明尿液中外泌体的粒径分布约为35~40nm,磷脂双分子层厚度约为直径的1/5~1/10。透射电镜结合免疫金标记法能够得到外泌体表面特征分子的信息,有助于揭示外泌体的产生机制与来源。动态光散射(dynamiclightscattering,DLS)和纳米颗粒跟踪分析(nanoparticletrackinganaly[1]sis,NTA)都是利用光学手段获得囊泡粒径分布的方法。两者的不同之处在于动态光散射通过检测散射光的强度计算得到颗粒粒径,而纳米颗粒跟踪分析通过追踪单个粒子的运动轨迹计算得到样品浓度、粒径分布等信息。

外泌体含有的信号分子能反映分泌细胞的生理状态和功能状态,甚至还会包含细胞病态相关的分子信息,从而提供了丰富的潜在的生物标志物分子源。瘤细胞分泌的外泌体通过对大分子物质的转移和传递调节临近或远处瘤生长的微环境,对促瘤生成及瘤增生、转移发挥着不同的调节作用。瘤细胞分泌的外泌体还可以通过诱导耐药和免疫抑制来促进瘤的发展。外泌体能在4℃保存96h,或是在-70℃下保存更长时间,这些特点使得外泌体可应用于瘤的早期诊断和预后判断。靶向瘤的外泌体的标志物可能为瘤疾病的诊断和治理提供新的指标和途径,对高危人群早期诊断和早期治理以降低或减缓瘤病例的发生上发挥着重要的作用。外泌体具有良好的生物兼容性、稳定性和内在靶向性,使其在药物递送方向大有潜力。

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基于免疫细胞来源的外泌体能够介导和调节机体对中流的免疫反应,外泌体在中流免疫zhiliao方面的潜力受到广fan关注。其中树枝状细胞产生的外泌体包含大量的MHC-多肽复合物和免疫刺激相关的分子,能够激huo相关的T细胞,介导体内抗中流应答,在多个临床试验中表现出良好的抗中流疗效。Morse等考察了树枝状细胞外泌体对非小细胞肺ai患者的疗效。结果表明,患者对树枝状细胞外泌体耐受性良好,1/3患者表现出了对树枝状细胞外泌体的T细胞响应,2/4患者自然杀伤细胞活性得以激huo。利用外泌体将siRNA和抗药剂等运输到目标细胞中。细胞外泌体提取试剂盒价钱

随着外泌体研究的不断深入,它的应用已经涉及瘤子诊疗领域、医学基础和免疫领域、寄生虫领域。外泌体之家官网

人体内多种细胞及体液均可分泌外泌体,包括内皮细胞、免疫细胞、血小板、平滑肌细胞等。当其由宿主细胞被分泌到受体细胞中时,外泌体可通过其携带的蛋白质、核酸、脂类等来调节受体细胞的生物学活性。外泌体介导的细胞间通讯主要通过以下三种方式:一是外泌体膜蛋白可以与靶细胞膜蛋白结合,进而唤醒靶细胞细胞内的信号通路。二是在细胞外基质中,外泌体膜蛋白可以被蛋白酶剪切,剪切的碎片可以作为配体与细胞膜上的受体结合,从而唤醒细胞内的信号通路。有报道称一些外泌体膜上蛋白在其来源细胞膜上未能检测出。三是外泌体膜可以与靶细胞膜直接融合,非选择性的释放其所含的蛋白质、mRNA以及microRNA。外泌体之家官网

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