广州蛋白分离离心管使用方法
使用后用0.1M NaOH泡24h,然后20%乙醇浸泡保存。这个我是听老板们说的,的确乙醇泡完后孔径会增大,基本就是5-10KD较大,也就是说如果你的蛋白在21KD以上,应该没问题。或者可以不用乙醇泡,用NaOH洗之后直接用无菌水保存,每周换一下液体,应该没有问题。看看说明书不就结了!我原来在CRO的时候一直是重复用的,也没见什么不好啊!短期会用的话,用20%的乙醇泡着,回头拼命用millipore的水充干净,然后在用样品缓冲液平衡一下就好,至于有些人说的改变孔径,也没那么大影响的,你至少跟目的蛋白分子量差别3倍的截留分子量才安全的不是吗?1个月以内不用的话,建议用100mM的NaOH保存!更长时间的话加0.02%的叠氮钠,但那个东西强致疾病物,不建议使用。理论上截留目标物,孔径应选1/3~1/5的膜;透过目标物,孔径应选5-10倍的膜。超滤离心管也可用于免疫学研究和诊断,如T细胞启用、细胞因子分析等。广州蛋白分离离心管使用方法
我们通常会以1/3到1/6甚至更低的区间来选择超滤管的孔径,通常更小的孔径会使回收率提高但是超滤的时间也会比较长。一定范围内,超滤的回收率和速度是一对矛盾体,因此可以通过优化孔径的选择,在回收率可以接受的条件下选择较大的孔径,来提高超滤的速度。低温如< 10 ℃,液体的粘度会增加,流动性会降低,因此液体的跨膜速率也会降低。适当提高超滤温度,往往能够提高超滤的速度。有些客户需要做几十ml到几百ml样品的浓缩或者缓冲液置换,但是却使用1支或几支15ml的超滤管反复离心来完成操作,这样必然造成时间上的浪费。怎么办?一定要挑选适合处理量的产品,减少不必要的反复离心从而提升超滤的效率。杭州浓缩超滤离心管售价超滤离心管可以用于分离并提取草药材料中的有效成分,以进行药理学和毒理学研究。
超滤作为一种膜分离技术,普遍应用于生物样品的浓缩、脱盐和缓冲液置换,其原理是溶液在力的作用下,通过超滤膜孔径的筛滤,大分子量的颗粒被截留下来,而水、溶剂和低分子量溶质则允许透过膜,从而达到浓缩、脱盐和缓冲液置换的目的,这种方法较大的特点是操作简便、快速、高效,可同时浓缩和纯化分子。如何使用超滤心离心管1. 使用角转子加到超滤装置上,较大样本量为15 毫升(Anavo Ultra-15)。2. 将带盖过滤装置放入离心机转子内; 用一个类似的装置来平衡。3. 使用定角转子时,将薄膜面板朝上定位,较大旋转 5000 xg,旋转 30 分钟。4. 为了回收浓缩的溶质,在过滤装置的底部插入一个移液管,通过左右扫动的方式将样品抽离,以保证总回收率。超滤液可贮存在离心管中。说明:为达到较佳回收率,离心后应立即取出浓缩样品。
超滤离心管,备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;截留分子量普遍,配有3K、5K、10k、30K、50K、100K、300K、1000K、0.2μl的聚醚砜膜;较新推出ZL产品Hydrosart膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。超滤离心管可以用于制备血液制品、免疫球蛋白等缓解药物,以缓解某些自身免疫性疾病。
超滤离心管的分子量选择:按照样品量和目标分子量选择适当的超滤离心管,为了得到较高的收率,所选滤膜的截留分子量MWCO建议选择所需截留分子大小的1/3左右,不超过目标分子量的一半。因为超滤膜上孔径是平均孔径,膜上的孔并非均匀,离心高压下也可能渗漏,因此截留孔径越小,流速越慢但截留比例更大。如果样本浓度低体积大,可选择较小容积的超滤管多次重复加样离心。如果同时需要脱盐和去除可溶小分子杂质,可将待浓缩样品稀释到超滤管较大容积再离心,重复2次可除去99%盐。避免过长时间或者过速离心,虽然优良品质的产品都有防死端设计,可避免过度离心造成膜表面干而造成不可逆吸附。避免过度浓缩,体积越小,越容易因表面吸附而损失得率。离心后用Tips轻轻吹吸几次滤膜截留的溶液,必要时补加一定体积的缓冲液冲洗膜表面,有助于减少膜表面吸附,能提高回收率。尽量避免Tips接触膜表面。超滤离心管是一种高效、经济且环保的实验室设备,具有普遍应用前景和市场需求。广州蛋白分离离心管使用方法
超滤离心管在食品安全监测中也具有重要意义,如检测水产品中的重金属等有害物质。广州蛋白分离离心管使用方法
超滤离心管关于回收率的疑问?一般对浓度大于0.1mg/ml的溶质进行回收,回收率在90%以上。通常,样品损失是由于滤膜表面和料管表面的非特异性吸附造成的。为了获得较高的回收率,所选滤膜的截留率约为目标蛋白的1/3。超滤膜是一种非对称膜,其孔径呈正态分布。在高压离心下也可能发生泄漏,在这种情况下蛋白质可能会发生变形。因此,截留孔径越小,流速越慢,但回收率会更高。浓缩过程中有蛋白质沉淀,如何处理?如果蛋白质浓缩过快或过多,都可能造成蛋白质沉淀,浓缩后的蛋白质之后浓度不宜过高;对于对浓缩速度敏感、易沉淀的蛋白质,建议改进方法如下:1)降低离心速度,2)使用截留分子量较大的超滤膜3) 吹吸浓缩管,然后离心。广州蛋白分离离心管使用方法
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