苏州细胞支原体检测时间

时间:2024年08月01日 来源:

支原体污染一旦发生,不仅对细胞培养造成严重影响,甚至可能导致实验结果失真。而且支原体污染在细胞培养实验中相当常见。因此,预防措施是确保细胞培养环境和实验结果可靠性的重要手段。
01/ 良好的无菌技术及实验操作,保证操作不会引入新的污染
02/ 保持实验空间的清洁
03/ 确保从可靠的来源获取细胞,减少不同细胞之间的交叉传染
04/ 防止交叉污染
05/ 减少气溶胶生成
06/ 谨慎使用抗*素
07/ 定期支原体筛查
08/ 丢弃或处理受到支原体污染的细胞
09/ 保持良好的记录
细胞被支原体污染了会有什么影响?苏州细胞支原体检测时间

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支原体去除后对细胞检测的影响主要取决于去除方法和去除后的处理。以下是一些可能的影响:
1. 去除方法的影响:不同的支原体去除方法可能对细胞检测产生不同的影响。例如,一些去除方法可能会对细胞的代谢和增殖产生暂时性的影响,这可能会影响某些类型的细胞检测。
2. 去除后的处理:去除支原体后,细胞可能需要一段时间来恢复其正常的生理状态。在这段时间内,细胞的某些特性可能与去除前不同,这可能会影响细胞检测的结果。
3. 细胞恢复情况:如果细胞在去除支原体后能够成功恢复,那么它们在检测中的表现可能会与未受污染的细胞相似。然而,如果细胞恢复不完全,可能会影响检测结果的准确性。
4. 检测类型的相关性:不同的细胞检测方法对细胞状态的敏感性不同。一些检测可能对细胞的微小变化非常敏感,而其他检测则可能较为宽容。
深圳支原体检测试剂厂家支原体检测有哪些方法?

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方法

灵敏度

优势

劣势

培养法

☆☆☆

ü 便捷

ü 便宜

ü 金标准

ü 费劳力

ü 耗时长

ü 需要特定的培养基

ü 特定支原体种类需要特定的培养基

DNA染色

(DAPI or Hoescht)

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 可能难以判读结果

ü 无法鉴别支原体种属

ü 可能假阳性可能性

间接染色

☆☆☆

ü 迅速

ü 便宜

ü 易检测

ü 费时

ü 需要细胞系指示

ELISA

☆☆

ü 迅速

ü 客观,易判读结果

ü 可以鉴别支原体种属

ü 受抗体限制

ü 价格高

免疫染色

☆☆

ü 迅速

ü 可检测支原体种属

ü 价格略高

ü 可检测的支原体种属有限

放射自显影

☆☆

ü 迅速

ü 难以判读结果

ü 无法鉴别支原体种属

ü 费劳力

生物发光

☆☆

ü 迅速

ü 便捷

ü 便宜

ü 难以判读结果

ü 无法鉴别支原体种属

PCR

☆☆☆

ü 便宜

ü 迅速

ü 具有特异性

ü 可能假阳性可能性

ü 检测特异性依赖引物特异性

ü 需要提取DNA

Real-Time PCR

☆☆☆

ü 便捷

ü 迅速

ü 具有特异性

ü 结果可靠

ü 高通量

ü 可能假阳性可能性

ü 检测特异性依赖引物特异性

ü 需要提取DNA

LAMP

☆☆

ü 便捷

ü 无需DNA提取

ü *需10min左右的实验操作时间

ü 具有特异性

ü 高通量

ü 可能假阳性可能性

ü 检测特异性依赖引物特异性

细胞培养中支原体污染的检测方法有多种,以下是一些常用的检测手段:

1. 显微镜检测:通过相差显微镜观察细胞,支原体在细胞表面和细胞之间会呈现为暗色微小颗粒。
2. 荧光染色法:使用荧光染料Hoechst 33258与DNA特异性结合,使支原体的DNA着色,然后在荧光显微镜下观察。染色后的支原体会在细胞周围或附于细胞膜表面显示为亮绿色小点。
3. 电镜检查:使用扫描电镜或透射电镜观察,这是一种简便快速的方法。
4. 聚合酶链反应(PCR):使用特定的引物对支原体DNA进行扩增,是一种高灵敏度的检测方法。
5. 等温扩增法:基于LAMP技术,室温反应后观察颜色变化确认是否有支原体污染。
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支原体污染是细胞培养中普遍的问题之一,细胞库中或正在使用的细胞中,支原体的污染率约为15%-35%。并对培养细胞的生理和代谢造成诸多影响:
01/ 争夺营养:支原体的污染会阻碍细胞生长和增殖 
02/ 改变蛋白质、RNA 或 DNA 合成的水平 
03/ 改变基因表达、细胞信号传导和形态 
04/ 损害膜和细胞器 
05/ 导致突变和染色体变化 
06/ 时间、金钱和有价值的细胞丢失:支原体的污染会导致严重的经济损失以及研究时间损失
07/ 实验结果的不可靠性 
08/ 生物安全问题
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支原体检测实验的方法?苏州细胞支原体检测时间

支原体预防的主要成分通常是指用于预防支原体污染的抗*素或化学试剂。在细胞培养中,预防支原体污染的措施包括在培养基中添加抗*素,以及采取其他预防措施来保持实验室环境的清洁和无菌操作。以下是一些用于预防支原体污染的主要成分:
1. 四环素类抗*素:这类抗*素对支原体具有抑制作用,常用于治*和预防支原体感*。
2. 大环内酯类抗*素:例如罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素等,用于治*肺炎支原体感*。
3. 喹诺酮类药物:如氧氟沙星、司帕沙星等,也用于治*肺炎支原体感*。
4. 其他抗*素:例如氨基糖苷类、氯霉素等,对支原体有较小的抑制作用。
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