人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4) ELISA 试剂盒
ELISA试剂盒实验需要注意什么?试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间4.控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排加样。请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4) ELISA 试剂盒
ELISA试剂盒中手动洗板操作指南:当洗涤缓冲液有结晶析出时,可将试剂瓶置于50°C水浴或培养箱中,使结晶物充分溶解再配制。加洗液要快速,没有多道移液器可以使用洗瓶。洗液应新鲜配制,以免被其他试剂污染,或染菌。洗板通常3~4次,加好洗液后轻轻摇动微孔板。甩板倒液要迅速干脆。倒液后在吸水纸上拍干,选用无粉尘和碎屑的吸水纸。需要用力拍板,使孔内没有可见液体挂壁。不能让样品干太久。酶标板拍干后立即做后续的加液。拍板用的吸水纸可选择厨房用纸,吸水性好且无碎屑。为保证微孔洗液浸泡时间一致,可采用从前至后和从后至前的顺序交替加洗液的方法。通过预实验可以熟悉整个实验的流程,发现可能忽略的问题;可以测试样本和试剂盒是否匹配,一旦出现不匹配的情况,不至于浪费过多样本;可以对样品中目的分析物的浓度作一下大致参考,以确定合适稀释度。人接触蛋白1(CNTN1) ELISA 试剂盒人原钙黏素ELISA试剂盒操作注意事项:不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
人基质金属蛋白酶检测试剂盒检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗基质金属蛋白酶7抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的基质金属蛋白酶7与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗基质金属蛋白酶7抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗基质金属蛋白酶7抗体与结合在包被抗体上的基质金属蛋白酶7结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。
严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。在储存和温育时避免强光直接照射。平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。不能使用过期产品。如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。ELISA试剂盒在试验时将试剂从冰箱中拿出来即用。
ELISA试剂盒可能原因:采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。反应板过多造成洗板等待时间长。解决办法:保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后很好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干;合理安排,或多用几台洗板机。显色:可能原因:显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂;加显色剂时溅出孔外造成液体回流。解决办法:显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用;加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。不要用嘴吸取elisa试剂盒里的任何成份。人痢疾阿米巴IgG ELISA试剂盒
人围脂滴蛋白试剂盒注意事项:底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4) ELISA 试剂盒
ELISA试剂盒检测过程中的注意事项:要保证移液的准确性,误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但很好有专业人员进行矫正。要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排各一支。吸取不同的液体后,要更换头。即使是吸取标准品时。要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。实验时,要使底物避光保存。用吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。吸取液体时,要用量程和需要量接近的去吸,减少误差。将液体加到酶标孔中时,避免头和孔内液体接触,可使头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。人脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(FABP4) ELISA 试剂盒
杭州齐誉生物科技有限公司主要经营生化试剂盒、生理生化检测、高效液相色谱检测、气相色谱检测、Elisa试剂盒等。目前公司拥有5大技术平台,分子生物学平台,细胞生物学平台、蛋白表达纯化平台、进口抗体制备平台以及免疫学研发平台。齐誉生物一直坚持自主创新,严格质控,力争为广大科研工作者提供前沿和好的服务。ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。往预先包被产品抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的产品呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品定量以及活性。