浙江动物荧光寿命成像哪家好

时间:2022年06月01日 来源:

荧光寿命成像在生物医学研究和临床诊断应用中的许多场合都对多光谱分辨提出特殊要求,如在FRET测量中,要求能同时测量供体和受体的荧光强度随时间的衰减,多光谱分辨的荧光寿命成像提供了一种新的定量研究手段.目前,基于门控像增强器的多光谱宽场FLIM 技术一次只能获得至多两个谱段的荧光寿命图像,而基于TCSPC的多光谱分辨FLIM的成像速度又很低,这些都限制了其应用范围.目前的一个研究方向是,发展光谱分辨率高、成像速度快、价格低廉的多光谱分辨荧光寿命成像显微技术。荧光寿命成像使用简单,方便快捷,不需要进行参数调节。浙江动物荧光寿命成像哪家好

荧光寿命成像(FLIM)的方法特别适合于体内诊断,因为它们是无创且无损的。因此,它们被普遍用于受试者的临床研究和医学检查。例如,该技术可以用于以下领域:皮肤的体内诊断:人类皮肤的多光子扩散层析成像结合了双光子激发和非解扫检测,因此,多光子FLIM可以提供组织层的光学切片图像,深度可达100 µm。人皮肤细胞的体内双光子成像是可能的,而不会损害组织的活力,可以从亚细胞分辨率重建三维结构。眼科检查:眼科FLIM结合了快速光束扫描和皮秒二极管激光器激发的功能。该方法非常灵敏,可以记录人眼眼底(背景)的寿命图像。通过这种方式,有可能及早发现眼部疾病,因为这些疾病通常伴随着眼底的代谢变化。反过来,这些引起内源性荧光团的荧光衰减参数的变化。深圳荧光寿命成像一般多少钱荧光寿命成像可以用于无法控制局部探针浓度的荧光显微镜中。

荧光寿命成像中的荧光寿命及其含义:假定一个无限窄的脉冲光(δ函数)激发n0个荧光分子到其激发态,处于激发态的分子将通过辐射或非辐射跃迁返回基态。假定两种衰减跃迁速率分别为Γ和knr,则激发态衰减速率可表示为:其中n(t)表示时间t时激发态分子的数目,由此可得到激发态物种的单指数衰减方程。荧光寿命定义为衰减总速率的倒数:荧光强度正比于衰减的激发态分子数,因此可将上式改写为:其中I0是时间为零时的荧光强度,τ为荧光寿命。也就是说荧光强度衰减到初始强度的1/e时所需要的时间就是该荧光物种在测定条件下的荧光寿命。实际上用荧光强度的对数对时间作图,直线斜率即为荧光寿命倒数的负值。荧光寿命也可以理解为荧光物种在激发态的统计平均停留时间。事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲线。

受光学衍射极限的限制,荧光显微技术的空间分辨率只能达到200纳米左右,难以满足生命科学研究的需要。而对于荧光寿命成像来说,其空间分辨率受衍射极限的影响尤为严重。荧光寿命成像是一个新兴的研究领域,寻求具有高度原创性的技术原理与方案,并率先解决荧光寿命成像在生命科学应用中存在的难题,具有重大的科学意义与应用价值。一种荧光寿命成像方法,所述方法包括下述步骤:对标记于样品中的光开关染料分子进行稀疏激励;激发样品中被激励的光开关染料分子,收集被激发的光开关染料分子所发射的光子并记录光开关染料分子的荧光图像,对荧光图像中的光开关染料分子进行质心定位;对在质心定位处接收到的光子进行计数,确定被激发的光开关染料分子的荧光寿命;结合得到的光开关染料分子的质心定位结果和荧光寿命,构建荧光寿命图像。荧光寿命是用于几种生物测定的稳健参数。

荧光寿命显微成像(Fluorescence lifetime imaging microscopy,FLIM)是荧光寿命测量和荧光显微技术的结合,荧光寿命显微成像具有高特异性、高灵敏度、可定量测量微环境变化和分子间相互作用、不受探针浓度、激发光强度和光漂白影响等优点。在过去的十年中,光学技术硬件和软件、材料科学和生物医学的迅速发展,共同促进了FLIM技术及其应用的巨大进步。荧光寿命成像(FLIM)对细胞信号传导及调控,蛋白间的相互作用等生物研究发挥着很大作用。荧光寿命成像通常用于研究生物分子间相互作用、细胞中的信号事件或区分光谱重叠的荧光团。湖北植物荧光寿命成像哪家靠谱

荧光寿命成像可以体现荧光物质形貌信息。浙江动物荧光寿命成像哪家好

在使用TCSPC测量荧光寿命的过程中,需要调节样品的荧光强度,确保每次激发后较多只有一个荧光光子到达终止光电倍增管。TCSPC方法的突出优点是灵敏度高、测量结果准确、系统误差小。采用该技术对样品进行荧光寿命成像时,必须逐点测量样品的荧光寿命,而每一点的测量时间又比较长,因此,通常认为该技术不太适合荧光寿命测量。不过,近年来,随着TCSPC技术和固体超快激光技术的发展,TCSPC技术已具备快速测量荧光寿命的条件。通过与激光共聚焦显微镜的结合,可以对样品进行荧光寿命成像的测量。浙江动物荧光寿命成像哪家好

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