广州生物荧光寿命成像有哪些

荧光寿命成像 (FLIM)通过建立检测到的荧光事件的直方图来确定寿命。可显示单指数或多指数荧光衰减。数值曲线拟合表示荧光寿命和振幅（即检测到的光子数）。由于FRET减少了供体寿命，因此如果无FRET的供体寿命已知，就可以量化FRET发生的程度。该供体寿命τ作为分析FRET样品的一定参考。因此，FLIM-FRET为内部参照—这一特点减少了基于强度测量FRET时的很多缺点。由于其荧光寿命是染料的固有特性，因此对其他不利影响（如光漂白、图像明暗处理、不同浓度或表达水平）具有普遍的不变性。使用基于强度的FRET测量的主要限制是所有可观察的供体分子都经历FRET的基本假设。通常情况并非如此。供体分子这种变化的“非结合”组分给测量的FRET效率带来了相当大的不确定性，使得无法在实验之间进行比较。荧光寿命成像克服了这一缺点。荧光寿命成像的发展很好地弥补了基于强度成像的问题，对生物医学检测有着重要的意义。广州生物荧光寿命成像有哪些

荧光寿命成像系统是一种用于化学领域的分析仪器，荧光寿命成像可以在体现荧光物质形貌信息之外，还能够灵敏地反应荧光基团生化特性以及周围微环境的变化情况。将荧光寿命成像与共聚焦成像技术结合起来，实现人体三维荧光寿命成像，进一步实现人体三维功能成像奠定基础，有潜力应用于瘤识别，病变诊断等领域。荧光寿命是荧光基团在通过发射荧光光子返回基态之前在其激发态下保持平均多长时间的量度。不同荧光基团激发态停时间不同，大多数生物荧光素的荧光寿命时间在 0.2 - 20 ns。荧光寿命检测经典方法为点对点的时间相关单光子计数（TCSPC），但由于过去检测硬件的局限和复杂的使用而没有被普遍地应用于科学研究。随着技术的发展，在显微镜视野内进行超快速全像素荧光寿命信号采集的荧光寿命成像成为可能。杭州植物荧光寿命成像哪个牌子好在种类繁多的显微技术中，荧光寿命显微成像技术被普遍地应用于生物学研究及临床诊断等领域。

影响荧光寿命成像测量的因素有哪些？散射光的影响： 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影响较大。校正办法：先用短的激发光激发，检出溶液的拉曼峰，然后进行荧光光谱校正。因为荧光光谱不随激发光波长的改变而改变，而拉曼光却随之改变。高浓度样品的影响：1）当激发光照射高浓度样品时，在激发光入口附近产生荧光，但这些荧光并不能进入荧光检测器。2）高浓度的分子之间相互作用而发生活性阻碍现象。3）荧光的再吸收：即荧光光谱的短波长端和激发光谱的长波长端如果相互重叠，则发生荧光再吸收。

荧光寿命是荧光分子在激发态停留的时间，这个时间可以反映荧光分子的内在属性和所处的微环境，是一个很有用的工具。以往，荧光寿命的测量和计算是件非常复杂和耗时的工作，只有少数专业的科学家关注和使用该工具。传统的多色成像实验根据光谱差异来设计，会有串色等限制，而且需要多次采集图像，会造成样品的光损伤。通过荧光寿命来进行成像，只需要拍摄一次就完成图像采集，不但减少了成像时间，而且降低了激光对样品的损伤。荧光寿命成像使用简单，方便快捷，不需要进行参数调节。不同荧光基团激发态停时间不同，大多数生物荧光素的荧光寿命时间在 0.2 - 20 ns。

市场上荧光寿命的测量方式可分为时域法和频域法，两者在本质上是相通的，测量精度相近，频域技术是时域法的傅里叶变换的延伸。时域和频域技术在各种显微寿命成像平台中都有应用，时间相关单光子计数方法（TCSPC )是常见的时域技术，而新兴的数字频域技术（FastFLIM™ )则取代了传统的模拟频域技术，凭借其独恃的优势成为应用广的频域技术。荧光寿命成像主要通过TCSPC技术（Time-Correlated Single Photon Counting）实现。由于TCSPC系统，一个激光脉冲只采集一个光子信号，所以激光器的重复频率决定了系统的数据采集速度。重频越高，采集速度越快，数据信噪比越好。荧光寿命可以在频域或者时间域测量。广东三维荧光寿命成像价格

荧光寿命对依赖于荧光团结构的内部因素敏感。广州生物荧光寿命成像有哪些

荧光寿命成像FLIM在生物学上的应用根据荧光分子种类可以分为三种：分别为自发荧光FLIM、外源分子探针FLIM和FRET-FLIM。自发荧光FLIM被普遍应用于非标记生物成像领域。所谓自发荧光，即生物细胞本身便包含荧光分子，称为内源性荧光分子团。FLIM通过对自发荧光分子团（如NAD(P)H和FAD）荧光寿命的考察，可以实现细胞代谢的监测。这种方案无需人为对样品加入荧光试剂便可以发射荧光，有效减少了荧光染料对样品的毒性、荧光分子与样品的非特异性结合及染料对生理性能的干扰影响。广州生物荧光寿命成像有哪些

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