佛山生物荧光寿命成像供应
荧光寿命成像是一种什么样的技术?是一种新型的荧光成像技术,它能够对不同种类或处于不同状态的生物组织提供更好的对比度,并反映荧光团及其所处微环境参数的定量分布。荧光寿命成像一般不受诸如激光或荧光强度扰动、荧光染料分布不均匀、染料的光漂白以及其他有碍荧光强度的因素的影响,是荧光光谱分析法的有效补充。超快激光技术,高速、高灵敏度探测技术,以及图像处理技术的发展,都促进了FLIM 技术的发展.尤其是将荧光寿命成像和共焦显微技术以及多光子激发荧光显微技术结合,进一步拓宽了FLIM在生物学领域的应用范围。荧光寿命成像被普遍地应用于生物学研究及临床诊断等领域。佛山生物荧光寿命成像供应
荧光寿命成像中的荧光寿命是什么意思?有什么用?假定两种衰减跃迁速率分别为Γ和knr,则激发态衰减速率可表示为:其中n(t)表示时间t时激发态分子的数目,由此可得到激发态物种的单指数衰减方程。荧光寿命定义为衰减总速率的倒数:荧光强度正比于衰减的激发态分子数,因此可将上式改写为:其中I0是时间为零时的荧光强度,τ为荧光寿命。也就是说荧光强度衰减到初始强度的1/e时所需要的时间就是该荧光物种在测定条件下的荧光寿命。事实上当荧光物质被激发后有些激发态分子立即返回基态,有的甚至可以延迟到5倍于荧光寿命时才返回基态,这样就形成了实验测定的荧光强度衰减曲线。由于荧光寿命成像不受样品浓度影响具有其他荧光成像技术无法代替的优异性能。江苏多色荧光寿命成像操作步骤荧光寿命成像能够对不同种类或处于不同状态的生物组织提供更好的对比度。
荧光寿命是指分子受到光脉冲激发后返回基态之前在激发平均停留的时间,处于激发态的荧光分子在从激发到基态的过程中发射荧光释放能量。荧光寿命取决于荧光分子所处的微环境,通过对样品荧光寿命的测量和成像可以定量获取样品的功能信息。荧光寿命成像技术有两种:时间域和频率域。(1)时域FLIM:需要脉冲光源,所以一般在双光子的系统上比较常见FLIM(荧光寿命成像Fluorescence Life-time imaging Microcopy简称FLIM)。(2)频域FLIM:需要一个相位调制的光源,有用LED调制的, FLIM对很多研究都有帮助,以下为荧光寿命成像FLIM的应用:1)细胞体自身荧光寿命分析;2)自身荧光相对荧光标记的有效区分;3)具有相同频谱性质的不同荧光标记的区分;4)活细胞内水介质的PH值测量;5)局部氧气浓度测量;6)活细胞内钙浓度测量;7)时间分辨Forster共振能量转移(FRET):纳米级尺度上的远程测量,环境敏感的FRET探针定量测量。
荧光寿命成像技术能够实时监控纳米颗粒在细胞内的稳定性。FLIM不但具有其它荧光显微镜所具有的高灵敏度、可检测生物生物样品等优点,它在监控荧光纳米材料的稳定性上还具有以下几个优势:(1)荧光寿命不受荧光探针的浓度的影响,可排除纳米材料的胞吐及细胞分化导致的纳米颗粒的稀释等对测量的影响;(2)很多常见的发光材料的荧光寿命都远远大于细胞的自荧光的寿命,很易去除生物自荧光对荧光成像的干扰;(3)发光材料的荧光寿命和其材料的稳定性密切相关,荧光寿命的改变可以灵敏地反映相应材料的化学稳定性。基于上述原理,他们利用FLIM技术系统考察了半导体量子点和金纳米簇在活的细胞(HeLa)里72小时内的稳定性,以及不同的表面配体对这一过程的影响。荧光寿命成像是一种什么样的技术?
荧光寿命通常来讲是一定的,不受激发光强度、荧光团浓度等因素的影响,只与荧光团所处的微环境有关,因此,利用荧光寿命显微镜(Fluorescence lifetime imaging microscopy, FLIM)对样品进行荧光寿命成像,可以对样品所在的微环境中的许多物理参数如氧压、溶液疏水性等及生物化学参数如pH值、离子浓度等进行定量测量。此外,荧光寿命成像技术还可以同时获得分子状态和空间分布的信息。因此,荧光寿命成像在生物医学领域有广阔的应用前景。生物发光与荧光成像相同点是都需要对细胞进行标记。北京化学荧光寿命成像哪里有卖
荧光寿命显微成像具有高特异性、高灵敏度、可定量测量微环境变化。佛山生物荧光寿命成像供应
荧光寿命成像和生物发光的不同之处:产生光子的原理不同,类似于我们都是通过肉眼去观察萤火虫和发光水母一样,生物发光与荧光成像在本质上,都是机体中特定的细胞或材料发出光子,被高灵敏度的CCD检测到形成图像,但是生物发光与荧光寿命成像产生光子的过程和机制是完全不同的。生物发光与荧光成像相同点:都需要对细胞进行标记。生物发光产生的光子和荧光寿命成像产生的光子都可以被高灵敏的CCD检测并形成图像,就像一个人的眼睛就可以既看到萤火虫又可以看到发光水母一样。荧光寿命(FLT)是荧光团在发射光子并返回基态之前花费在激发态的时间。根据荧光基团的不同,FLT可以从皮秒到数百纳秒不等。佛山生物荧光寿命成像供应
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