天津开放式荧光寿命成像生产

时间:2023年03月28日 来源:

荧光寿命成像的原理:如果分子环境刺激激发态衰变而不发射光子,则荧光强度会降低(淬灭)。荧光淬灭是一条单独的发射路径,因此在动力学上与荧光过程形成竞争关系。激发态存储现在可以通过一个以上的过程衰变,从而缩短荧光寿命。这种寿命的改变可用于收集分子环境的信息。一种特殊类型的淬灭是将激发能量以非辐射的方式传递到相邻的不同荧光染料中:“荧光共振能量转移”,FRET。此时,不只第1个荧光染料(供体)变暗,寿命变短,而且第二个荧光染料(受体)在“错误的”激发颜色下开始发光。由于这种效果的产生需要两种荧光染料(小于10 nm)的密切接触,因此将其用作研究分子相互作用的“分子标尺”。荧光寿命成像显微技术经常用于以下领域:分子影像学、代谢成像、FRET成像、同时进行NAD成像。天津开放式荧光寿命成像生产

影响荧光寿命成像测量的因素:高浓度样品的影响:1)当激发光照射高浓度样品时,在激发光入口附近产生荧光,但这些荧光并不能进入荧光检测器。2)高浓度的分子之间相互作用而发生活性阻碍现象。3)荧光的再吸收:即荧光光谱的短波长端和激发光谱的长波长端如果相互重叠,则发生荧光再吸收。荧光寿命成像具有200 nm的空间分辨率和皮秒量级的时间分辨率。散射光的影响: 主要是瑞利散射光和拉曼散射光的影响较大。校正办法:先用短的激发光激发,检出溶液的拉曼峰,然后进行荧光光谱校正。因为荧光光谱不随激发光波长的改变而改变,而拉曼光却随之改变。天津开放式荧光寿命成像生产荧光寿命不受荧光探针的浓度的影响,可排除纳米材料的胞吐分化导致的纳米颗粒的稀释等对测量的影响。

荧光寿命成像和荧光光盘有什么区别?与荧光光谱一样,荧光寿命也是荧光物质的一种内在特有性质,不受荧光物质浓度、激发光强度等因素的影响。荧光寿命成像能在不受荧光强度影响因素影响的条件下,在纳米分辨率水平对蛋白互作进行研究,或者通过 FRET 探针研究分子环境变化,更重要的是其测量数据准确性高、易重复。通过荧光寿命成像还可以对样本所处的微环境进行检测、对样品组份进行分离等等。在传统的荧光强度和荧光光谱两个维度的基础上,又增加了荧光寿命这一新的成像维度,大幅度拓展了该系统的应用范围。

荧光寿命成像具有什么优势?荧光寿命成像的优势:通过荧光强度成像可以获得荧光分子的空间分布,较为直接和简便,但是当荧光分子具有相似的频谱特性,或是同样的荧光分子在不同环境下时,依赖强度进行成像的方案便无法准确反映信息。与基于光强的成像方式不同,FLIM成像适用于测量荧光分子环境的变化,或是测量分子的运动情况。其结果与荧光分子浓度无关,且不受影响光强的光散射或是光吸收影响,可以精确测量荧光淬灭过程,对生物分子微环境进行定量测量。荧光寿命显微成像具有高特异性、高灵敏度、可定量测量微环境变化。

荧光寿命的测量和荧光寿命成像主要有时间相关单光子计数法(time correlated single photon counting, TCSPC)、门控探测法(time-gated detection)、条纹相机测量法(streak-FLIM)、频闪技术等四种常见的方法。TCSPC是目前测量荧光寿命的主要技术,同轴脉冲光源发出的脉冲光引起起始光电倍增管产生电信号,该信号通过恒分信号甄别器1启动时幅转换器(time-amplitude converter,TAC),时幅转换器产生一个随时间线性增长的电压信号。此外,同轴脉冲光源发出的脉冲光通过激发单色器后到达样品池,样品产生的荧光信号再经过发射单色器到达终止光电倍增管,由此产生的电信号经由恒分信号甄别器2到达时幅转换器并使其停止工作。荧光寿命成像一般不受诸如激光或荧光强度扰动、染料的光漂白以及其他有碍荧光强度的因素的影响。重庆动物荧光寿命成像哪家专业

荧光成像在疾病诊断,药物分布和代谢评估以及血管生物成像中得到了普遍的应用。天津开放式荧光寿命成像生产

荧光寿命成像的应用领域有哪些?生命科学领域:细胞体自身荧光寿命分析;自身荧光相对荧光标记的有效区分;活细胞内水介质的PH 值测量;局部氧气浓度测量;具有相同频谱性质的不同荧光标记的区分;活细胞内钙浓度测量;时间分辨共振能量转移(FRET):纳米级尺度上的远差测量,环境敏感的FRET 探针定量测量;代谢成像:NAD(P)H 和FAD 胞质体的荧光寿命成像。材料科学领域:宽禁带半导体等体系的少子寿命mapping 测量;量子点等用作荧光寿命成像显微镜探针;钙钛矿电池/LED 薄膜的组分分析、缺陷检测;铜铟镓硒CIGS,铜锌锡硫CZTS 薄膜太阳能电池的组分、缺陷检测;镧系上转换纳米颗粒;GaAs 或GaAsP 量子阱的载流子扩散研究。天津开放式荧光寿命成像生产

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