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CCK-8试剂盒细胞增殖试验：1.接种细胞悬液100µl(2000个/孔)于96孔板，预先置于37℃，5%CO2饱和湿度的培养箱内培养。2.加入10μLCCK-8，由于每孔加入CCK-8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀，同时要注意不要在孔中生成气泡，它们会影响OD值的读数。3.把培养板放培养箱内1-4小时。由于细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间（5-6小时）。4.测定450nm吸光度，建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。购买抑制剂时要根据自身需求去购买，而不是随便买。CCCP现货

CCK-8实验注意事项：若暂时不测定OD值，可以向每孔中加入10 μL 0.1M的HCL溶液或者1% w/v SDS溶液，并遮盖培养板避光保存在室温条件下。24小时内测定，吸光度不会发生变化。如果待测物质有氧化性或还原性的话，可在加CCK8之前更换新鲜培养基（除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的培养基），去掉药物影响。当然药物影响比较小的情况下，可以不更换培养基，直接扣除培养基中加入药物后的空白吸收即可。当使用标准96孔板时，贴壁细胞的至小接种量至少为1000 个/孔 (100 μl 培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2500 个/孔 (100 μl 培养基)。酚红和血清对CCK8法的检测不会造成干扰，可以通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。CCK8可以检测大肠杆菌，但不能检测酵母细胞。在细胞增殖实验每次测定的过程中需要避免细菌污染，以免影响结果。CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月，在-20℃下避光可以保存1年。5-Fluorouracil (5-氟脲嘧啶）哪家正规CCK-8试剂对细胞的毒性非常低。

苯并[b]噻吩1,1-二氧化物(BTP)是STAT3抑制剂的重要药效团。带有BTP片段的抑制剂在瘤细胞中通常通过抑制STAT3的Tyr705磷酸化和促进活性氧(ROS)产生而有效地抗细胞增殖和诱导细胞凋亡，表示分子有Stattic(1)、HJC0123(2)、HJC0146(3)。Stattic能通过线粒体电子传递链刺激形成ROS，乙烯基砜基团可与STAT3产生共价不可逆相互作用，对STAT3抑制是必需的。对接研究表明，BTP的平面性骨架只占据关键的p-Tyr705结合位点，并与Arg609、Ser611、Ser613形成3个氢键。

在稳定的环境条件下细胞内蛋白质的生成和分解处于动态平衡，当在体外从细胞和组织中提取蛋白时，粗细胞提取物含有许多能够降解目的蛋白的内源酶，例如磷酸酶和蛋白酶。这些酶从细胞内释放出来或被唤醒，导致目的蛋白分解，影响分析结果。为了避免这种情况的出现，提高目的蛋白产量的一种方法是加入相关酶的抑制剂。蛋白酶抑制剂有很多种，包括 EDTA、E-64、NaVO3、Bestatin、Leupetin、PepstatinA、Aprotinin 等均具有抑制蛋白酶的活性的作用。CCK-8试剂盒是是一种应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。

蛋白酶体抑制剂是治理病病毒传染的药物，这类药物能够与蛋白酶分子活性中心上的一些基团结合，使得蛋白酶的活力下降，甚至消失，但是不会使酶蛋白变性。蛋白酶体抑制剂用于治理HⅣ-1传染，能够抑制病毒的复制，对疾病的控制有一定的作用。艾zi病是一种危害极大的疾病，具有传染性。艾zi病是艾zi病病毒传染引起的，这类病毒能够攻击人体的免疫系统，使人的免疫能力丧失，患者终可死于各种并发症。目前尚无治理艾zi病的方法，但是可以通过药物来控制病毒的复制。蛋白酶抑制剂是目前治理艾zi病的常用药物，这种药物能够抑制蛋白酶的活性，这类药物主要有奈非那韦、沙奎邦韦、茚地那韦等。蛋白酶抑制剂可以与昆虫体内消化道中的蛋白酶作用形成酶-抑制剂复合物，干扰其正常代谢进而导致其死亡。GW4869批发价

抑制剂的价格是根据抑制剂的作用去决定的。CCCP现货

细胞或组织等提取物中含有许多内源性的蛋白酶、磷酸酶等，容易导致提取物中的蛋白降解或去修饰，从而影响后续的蛋白检测。因此在提取物中添加适当的蛋白酶、磷酸酶等抑制剂是防止蛋白降解和去修饰的有效方法。磷酸酶抑制剂混合物可以有效抑制常见磷酸酶对于蛋白的去磷酸化作用，保持蛋白原有的磷酸化状态。为经优化和测试的用于动物细胞或组织、细菌以及植物蛋白提取的磷酸酶抑制剂混合物，包含了广谱的丝氨酸/苏氨酸、酪氨酸、酸性及碱性磷酸酶抑制剂。CCCP现货

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