Bouin's固定液

时间:2022年08月22日 来源:

胎牛血清作为细胞生长不可缺少的重要营养来源一直备受科研人员重视,那么胎牛血清在参与细胞培养实验都发挥着什么作用呢?胎牛血清,是胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能:提供维持细胞指数生长的元素、基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。胎牛血清全程冷链运输,无冻融现象。Bouin's固定液

胎牛血清应该怎么选?稳定性,FBS作为其他行业的副产品,其生产在本质上会受到天气、食物供应、经济条件和牛群规模及病情等各种因素的影响,导致血清的供应可能出现货源、价格及批次间的不稳定性,从而造成实验的不顺甚至实验失败。在过去,国内外已有多个实验室出现过因血清批间差异大而导致实验结果无法重复的情况,浪费了巨大的时间和金钱成本。因此,找到稳定提供同批次FBS的供应商,对于确保自己细胞实验结果的真实性和可重复性具有重要意义,而且花在重复实验或检验新批次上的时间将很大减少。临海DMEM(高糖)培养基(含双抗)胎牛血清应该存放在-20℃环境的地方。

如今已经成为各大实验室“常客”的胎牛血清,是一种采集自新鲜的牛血液的优良血清。胎牛血清主要的作用就是提供基本的营养物质以及提供接触和伸展因子,有效避免细胞贴壁受到机械的损伤。如此看来胎牛血清确实发挥出非常大的作用,那么为了让其充分发挥更大的价值该注意哪些事项呢?注意避免沉淀加入培养液,添加胎牛血清的时候要注意避免把沉淀加入培养液,因为如果培养液有沉淀的存在,会使得其中培养的细胞产生大量的黑点,除此之外,细胞的表面还很可能会覆盖一层油状物质,总之出现这样的情况会极其不利于细胞的正常生长。那么为了更大程度减少血清的损失,可以把所有有沉淀的血清进行收集并做离心处理,之后便可将上清液加入培养液中使用。

胎牛血清都有哪些重要的指标:总蛋白含量,胎牛血清的总蛋白含量一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采集血液的牛龄偏大,不是胎牛;数值偏低,表明血清可能掺水了。pH值,根据药典,胎牛血清的pH值在7.0-8.0之间,并没有什么具体依据把进口血清和国产血清用7.5这个分界线界定。渗透压,胎牛血清渗透压的检测一般采用冰点法,渗透压摩尔浓度(mOsmol/kg):280-360之间。微生物,包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体等。随着各个品牌血清生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制。支原体通过0.1um3次无菌过滤去除。关于噬菌体主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大,不过对于工业生产的客户来说,往往会采用γ照射的胎牛血清来避免噬菌体。胎牛血清可以提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。

使用胎牛血清的注意事项:注意解冻的方法,再高质量的胎牛血清也要在使用的时候坚持谨慎的原则,因此在解冻血清的时候,要细心地考虑到其解冻时体积一般会增大的特点,事先为血清预留出能够容纳膨胀体积的空间。如此一来,便不会发生污染或者容器冻裂的情况。另外更好采用分步解冻的方式解冻血清,即先利用冰箱或冷库将其溶解满几天,之后在室温下全溶后再进行分装。胎牛血清的灭活,一般是用水浴加热的方式来加热已经完全解冻的血清,那么需要注意的是,加热的过程中一定要规则地将血清摇晃均匀。而之所以这么做,是为了能够让血清中的补体成分去活化。不过胎牛血清的灭活并不是强制的要求,客户可以自行选择是否进行灭火处理。胎牛血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、元素、无机物等。临海DMEM(高糖)培养基(含双抗)

胎牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份。Bouin's固定液

胎牛血清(FoetalBovineSerum,简称FBS):是采自5-8个月胎龄牛胚胎中的胎血。此时胎牛各脏器正处生长分化阶段,血中含有丰富的生长发育因子,非常适合各种细胞的培养,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。因此8个月胎龄以上的牛胚胎,已接近足月,不能作为胎牛血清的原料来使用。有下列情况者,对血清内有害元素应格外留意筛选:1.养干细胞时,干细胞对内有害元素非常敏感,如果血清中内有害元素≥3EU/ml时,干细胞很容易死亡。很多使用者,在血清在试用前,就通过提早审核该批次《检测报告》,以决定是否入围进行试用。2.养免疫细胞时,过高的内有害元素可诱导免疫细胞释放炎症因子,抑制小鼠红细胞集落的形成等。3.基因敲除相关的细胞实验,培养的细胞要尽可能保持其原始状态,任何引导细胞衰老或凋亡的试剂,都会让后续的实验结果“失之毫厘,谬以千里”。在准备血清和其他试剂时,选择极低的内有害元素(更好≤1EU/ml),对实验至关重要。Bouin's固定液

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