嘉兴RPMI 1640 Medium (含双抗)

时间:2022年12月26日 来源:

为什么使用胎儿血清而不是新生儿血清或成人血清?胎儿血清含有较多的生长因子,丙种球蛋白(即抗体)含量较低,非胎儿血清也有。这些很重要,因为生长因子促进细胞存活和增殖,而抗体可以与培养的细胞结合。此外,与成人或新生儿相比,胎儿血清中的补体蛋白(补体)含量较低。这些补体具有溶解培养细胞和干扰免疫测定的不良作用。血清和血浆均来自全血,通过离心去除包括红细胞在内的成分。血浆和血清之间的区别在于,凝血蛋白存在于血浆中,但已从血清中去除。血浆一般是通过在离心前向血液中加入抗凝剂来制备的,但不会去除凝血蛋白。通过在离心前使血液凝固或通过普遍/渐进离心来制备血清。因此,与凝血相关的纤维蛋白原和蛋白质不存在于血清中。胎牛血清可以提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。嘉兴RPMI 1640 Medium (含双抗)

胎牛血清是一种性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。显然,胎牛血清是品质更高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分更少。胎牛血清各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。1、性状、外观浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。2、蛋白质含量3.5%~5.0%(w/v)3、血红蛋白含量≤0.02%(w/v)4、无菌检验:阴性。5、支原体检验:阴性。6、细菌内有害元素≤5(EU/ml)7、牛腹泻病毒,阴性,8、大肠杆菌噬菌体,阴性,9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)更大增殖浓度≥2.5×106个/ml,细胞倍增时间≤15h,克隆率≥85%。嘉兴RPMI 1640 Medium (含双抗)胎牛血清勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。

胎牛血清使用中的常见问题:如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

胎牛血清(FetalBovineSerum,FBS)是一种取自牛胚胎的血清,常用于配置动物细胞的培养基。胎牛血清中含有生长因子等蛋白质,且抗体含量少。细胞生物学的研究人员通常会在培养基中加入一定比例的胎牛血清,以帮助维持体外培养(invitro)的细胞的存活。但胎牛血清的组成复杂多变,研究人员一般将其视作成分不明的混合物,认为其可能增加实验结果的不确定性。如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。我们建议血清应保存在-2O℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。胎牛血清是细胞培养中用量更大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成分。

胎牛血清给细胞提供的益处主要体现在6个方面:1、提供细胞生长所需的天然元素或天然的生长因子。2、提供天然的结合蛋白,能识别氨基酸、脂质、金属离子和元素等,能结合并调节它们的活性。已知清蛋白(albumin)即具有上述功能,并对细胞代谢、生物合成、增殖和存活具有潜在的影响。又如胎牛血清中富含胎球蛋白(Fetuin),具有多个钙离子结合位点,因而能调节和维持血清中的钙离子浓度。3、天然含有粘附蛋白等细胞外基质成分,促进细胞的附着、铺展。4、提供消毒功能。这主要通过血清中的某些蛋白与有毒的金属离子结合来完成的。如金属硫蛋白,对多种重金属有高度亲和性,并可清理细胞生长环境中的氧自由基(·O),具有很强的抗氧化活性,可防止细胞衰老。5、提供酸碱度缓冲的作用,以及维持渗透压。6、提供蛋白酶抑制剂,使细胞免受蛋白酶的损伤。因此在细胞消化时,常用含血清的培养液终止胰酶对细胞的作用。胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛。衢州优级胎牛血清 Fetal Bovine Serum(Characterized)

需要长期保存的胎牛血清须储存于-20℃-70℃低温冰箱中。嘉兴RPMI 1640 Medium (含双抗)

胎牛血清工艺流程:从血源采集、加工、过滤、辐照处理、包装、质检,再到物流,遵循行业更高标准,大范围保驾护航,确保产品高等、可信赖。可追溯性,产品制备所用材料均来自澳大利亚。采集血清的牛的出生、饲养、运输或屠宰场所均不经过疯牛病(BSE)疫区,原料均通过严格标准采自中国许可的澳大利亚非蓝舌病毒(BTV)地区。每批次均附有含原产地信息的分析证书(CoA)。原材料加工,血液取自澳大利亚地区受国家监管的工厂。全血使用严格的无菌采集技术收集,然后在可控条件下凝结。离心后收集血清并立即冻存。过滤和包装,冻存的血清原料在可控条件下解冻,然后通过一系列不同孔径的膜过滤,并在封闭系统中进行分装。血清包装入无菌带刻度的塑料瓶后,密封冻存于-10~-40°C环境。嘉兴RPMI 1640 Medium (含双抗)

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