上海尿液外泌体分离制造商

外泌体的表征分析：动态光散射：使用Anton-PaarLightsizer500粒子分析仪测定外泌体制剂中的粒度分布。动态光散射测量由于溶液中粒子的布朗运动引起的散射光强度的动态波动，（685nm的激光，检测角度为15、90、175度）；较小的粒子比较大的粒子移动得更快。确定颗粒大小时，通常使用三种分布类型：(1)数量分布，报告不同大小“箱”中的颗粒数量；(2)体积分布报告不同尺寸类别的颗粒总体积；(3)强度分布，报告不同大小颗粒散射的光。也可以使用高分辨率纳米粒径分析仪NanocoulterⅠ来分析样品中每种大小的囊泡的实际数量、浓度及粒子动态、Zeta电位等。为了进行分析，将先前储存在-20°C的75μl等分试样的外泌体制剂用925μlPBS稀释（得到1ml）并转移到一次性比色皿中用于DLS测量。外泌体在疙瘩微环境中的参与，反映了其具有的高度的异质性和复杂性。上海尿液外泌体分离制造商

外泌体衍生物miRNA的重要应用：外泌体保护miRNA免于降解，使它们比游离miRNA更稳定，并能被特定受体细胞有效整合。因此，在外泌体携带的货物中，miRNA可以提供有关它们来源的细胞类型、靶标和细胞状态的身份信息。越来越多的证据表明，疙瘩细胞来源的外泌体已成为通过传递病miRNA促进疙瘩细胞增殖、侵袭、血管生成、远处转移和疙瘩微环境重塑的主要候选者。血管生成对于恶性疙瘩的生长和转移至关重要，因为新血管可以提供额外的氧气和营养物质，还可以清理废物。比如：病细胞释放外泌体exo-miR-21、exo-miR-23；外-miR-29；exo-miR-103和exo-miR-210可以促进增殖、血管生成和疙瘩转移。上海尿液外泌体分离制造商优化外泌体分离方法可以提高分离效率和分离精度。

分离外泌体的方法之降水：它是一种基于生物体液中外泌体的电荷沉淀的方法。带负电荷的外泌体可以与PEG35,000Da基质中带正电荷的鱼精蛋白相互作用并形成沉淀。外泌体的回收和重悬比基于超速离心的分离更有效。聚合物沉淀法以更少的劳动力和昂贵的设备分离尿外泌体的潜在益处。该方法首先利用DL-二硫苏糖醇溶液还原或去除Tamm-Horsfall蛋白的聚合网络，然后在25°C和30min下只用10,000×g的向心力即可实现外泌体的沉淀。还有利用聚合物沉淀方法并消除超速离心的商业试剂盒。ExoQuick™、Exo-spin™是来自Invitrogen™和miRCURY™的市售总外泌体分离试剂。

细胞外泌体的来源和表征方法：细胞外泌体是直径为30-150nm的血管外囊泡亚群。在过去的20年里，科学家已经从包括正常细胞和病细胞在内的许多细胞类型中分离出外泌体，并且研究了它们对其他细胞的影响。外泌体是由多种大分子组成，例如核酸、蛋白质和脂质。细胞外泌体具有天然的特定细胞靶向特性，通常被设计用于靶向大分子（DNA和RNA）和药物递送系统（多柔比星、紫杉醇和紫杉醇）。目前常用细胞外泌体的分离方法主要是超速离心法、密度梯度离心法、超滤分离法、基于聚合物的沉淀法、亲和沉淀分离法、免疫磁珠法和色谱法等。分离样品前的处理对较终外泌体分离的效果有较大影响。

分离外泌体的方法之免疫亲和相互作用：免疫亲和法是利用外泌体表面蛋白（抗原）与其靶抗体或分离配体分子之间的免疫亲和相互作用原理分离纯外泌体的理想方法。它有助于根据其表面标志物分离特定类型的外泌体。基于微孔板的酶联免疫吸附测定（ELISA）是免疫亲和分离试剂盒的一个例子，用于根据外泌体表面标志物分离外泌体。Tetraspanin蛋白是这种分离方法的决定因素。抗CD9、抗CD63和抗CD81是免疫亲和外泌体分离中使用的抗体的常见示例。免疫亲和法可用于从结肠病细胞中分离外泌体，其效率高于超速离心和密度梯度分离。另外还有一种外泌体分离方法，该方法采用抗体包被的基于磁性颗粒的技术来分离外泌体。外泌体分离和分析的标准化和规范化将有助于外泌体研究领域的进一步发展。上海尿液外泌体分离制造商

外泌体在心血管系统中扮演着重要的调节作用，与各种疾病如心肌梗死、心衰等相关联。上海尿液外泌体分离制造商

外泌体的表征方法之光学方法：目前，光学方法是外泌体表征的主要方法，即动态光散射(DLS)、多角度光散射(MALS)和纳米粒子跟踪分析(NTA)。这些方法允许对尺寸（DLS0.5–200nm；MALS10–500nm；NTA10–1000nm）、尺寸分布和浓度进行高分辨率测量。DLS和MALS的结合增加了测量范围(0.5–500nm)和精度。光学方法比较受欢迎的，但缺点是灵敏度低、试剂消耗高以及需要昂贵的设备。在使用纳米粒子跟踪分析NTA方法过程中，荧光染料的加入也提高了分辨率，并允许通过使用荧光标记来表征表面免疫表型。从而确定标记物存在。上海尿液外泌体分离制造商