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细胞培养的优点:1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察,这些因素同样可以处于严格控制之下。3.研究的样本可以达到比较均一性通过细胞培养一定代数后,所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞,需要时,可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。4.研究内容便于观察、检测和记录采用各种研究技术:如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备。消化使用的胰酶是含EDTA还是不含的？吉林胰酶供应商

    先用少许**过的PBS调成糊状，然后补足到100ml。置室温搅拌4小时或冰箱内过夜，过滤**，分装，4℃保存备用。）;或是hanks或是D-hanks液配制（1.称取胰蛋白酶粉末置烧杯中，先用少许D-Hanks平衡盐溶液（左右）调成糊状，然后再补足D-Hanks平衡盐溶液，搅拌混匀，置室温4小时或冰箱过夜，并不断搅拌振荡；2.次日，先用滤纸粗滤，再进行过滤**，分装入瓶中，低温冰箱保存备用，常用浓度为或。胰蛋白酶溶液偏酸，使用前可调用碳酸氢钠溶液调pH至左右。）一般**，至于作用效果，需要消化一次细胞感觉一下，因为不同厂家的酶不一样，有的作用温和，有的作用剧烈。4、是否需要四度放置过夜，取决于你的胰酶的纯度。过去的胰酶纯度不高，所以难以溶解，需要四度过夜.而现在的胰酶纯度都很高，就没有必要四度过夜。从理论上来说，四度放置过夜，给**生长的机会，尽管过滤可以出去**，可是出不掉其代谢产物。胰蛋白酶不溶,有絮状物的原因，考虑有：1、过期或是酶已经部分变性2、溶液ph值不对3、在没过滤之前的絮状沉淀是正常现象，因胰酶多取自动物胰腺，沉淀为**块。甘肃国产胰酶有哪些胰酶细胞消化液和胰蛋白酶消化液是一样的吗？

在组织细胞的体外培养和原代细胞培养中的组织细胞分散（将组织块制备成单个细胞悬液）以及传代细胞培养中，贴壁生长细胞的消化分散均要使用组织细胞消化液。常用的消化液为胰蛋白酶 (Trypsin) ，EDTA 等。胰蛋白酶是一种丝氨酸水解酶，它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切段，水解细胞间的蛋白质，破坏细胞间的连接，从而使组织或贴壁细胞离散成单个细胞。胰酶分散细胞的活性与组织或细胞的特性、胰酶浓度、温度和作用时间有关，在PH 8.0和37℃时，胰酶的作用能力**强，因此使用胰酶时，应把握好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。一般常用胰酶的工作浓度为0.25%，而半贴壁细胞或对胰酶敏感的细胞常采用低浓度（0.05%）的胰酶进行细胞消化。由于EDTA能够螯合Ca2+和Mg2+，从而破坏细胞连接促进细胞的解离，因此在胰酶溶液中常常会加入一定量的EDTA混合使用，以增强解离效果。

乙二胺四乙酸：（EDTA）是一种有机化合物，常温常压下为白色粉末。它是一种能与Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二价金属离子结合的螯合剂。动物细胞在粘附的时候，需要有Ca或Mg离子的参与，EDTA与他们结合后，导致动物细胞粘附能力降低，再加上胰蛋白酶的消化作用，使得细胞与瓶壁快速脱离。两者起到了协同消化的作用。难消化的细胞，胰酶中可填加EDTA。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没影响，那么可不离心。消化液经过过滤除菌,可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化。

0.25%胰酶和加了EDTA胰酶区别是什么详细说明

细胞之间是通过CAM（细胞粘性分子）相连的，而很多粘性分子只有在有+2价金属离子，如Ca2+,Mg2+，的存在下才能行使这种功能。EDTA是钙离子的鳌合剂，在胰酶中加入EDTA的作用简单的说就是为了增加胰酶的消化作用，尤其适用于比较难于消化的细胞；同时可以减少胰消化时间，以减少酶对细胞的损伤作用。加入EDTA的消化反应不能通过加入培养液终止，必须离心才能去除EDTA，所以要掌握好消化时间。 胰酶使用的时候要注意什么？吉林胰酶供应商

胰酶细胞消化液(不含EDTA)消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。吉林胰酶供应商

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