四川Ham's F12培养基答疑解惑

    1/2ms生长培养基的培养结果为：中双11号油菜种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100％，培养9d的幼苗，表现为植株健壮、平均株高为，叶色浓绿，茎秆粗壮、平均茎中粗为，根系发达、平均根数为(>)、平均主根长为。如图3所示。培养实例3和对比培养例3的培养结果比较：中双11号油菜种子在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100％；在相同条件下培养9d时，与1/2ms生长培养基相比，1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳，其株高、根的数目优于1/2ms生长培养基，茎粗及平均主根长度与1/2ms生长培养基相近。如图3所示。培养实例4：马铃薯无菌苗培养生长培养基配制：1/2cs基本培养基+蔗糖30g/l+植物凝胶8g/l，用超纯水溶解，。1/2cs基本培养基的成分及用量如表1所示。培养方法：以克新18号马铃薯为例，将配制好的1/2cs生长培养基分装于长、宽、高9cm的耐高温培养盒中，选择生长旺盛的马铃薯脱毒苗，于无菌环境下，根据实际需要，用手术剪刀剪取约1cm长的至少带有1个叶芽的茎端或茎段，用弯头镊子将其1/3-1/2长度垂直插入培养基中；于温度22-23℃、湿度50-70％、光照强度2000-3000lux、光照和黑暗交替(光照时间14h、黑暗时间10h)条件下培养。减血清培养基减少了血清对细胞的影响。四川Ham's F12培养基答疑解惑

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    K+主要分布在细胞内液，细胞内K+对于***某些酶是必需的，并在调节细胞内环境的酸碱平衡上也有极重要意义。Ca2+在细胞外液中的作用是将**内部细胞之间相互粘着，在细胞内参与许多重要的细胞生理活动，如传导、参与肌肉细胞收缩等。在悬浮培养时，为了减少细胞的聚集和附着，要减少Ca2+的浓度。Mg2+是构成细胞间质的重要成分，对于细胞间相互稳定结合有很重要的意义。磷的化合物对细胞物质代谢和生理功能调控有重要作用。其他成分：肽、核苷、嘌呤等。可帮助细胞的克隆化培养及维持某些特殊细胞系的生长。分类低血清细胞培养基概述营养丰富的培养基是维持细胞活性及高密度生长的基础，营养缺乏容易引起细胞凋亡，新生牛血清中所含大部分营养成分可以通过化学成分明确的营养物质如氨基酸维生素等成分组合取代。低血清培养基营养成分大优于基础培养基，*需添加1％～5％新生牛血清，而对细胞生长、增殖、形态、活性和功能没有影响甚至有所改善。在国外低血清培养基早已有之，如Gibco等。但是他们的低血清培养基是在基础培养基中选择性的加入重组胰岛素（recombinantinsulin）、人源转铁蛋白（human(holo)tran-sferrin）以及牛血清白蛋白等，有些还包含一些生长因子。

    以及无血清培养的基础细胞培养基。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计，含有BSS、21种氨基酸、维生素等，***适于多种正常细胞和肿*细胞的培养，也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素，可在血清含量低时用，适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞，也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后营养成份丰富，血清使用量也减少。常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。与天然培养基相比，有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代，因此，细胞培养中使用合成培养基时必须加入一定量的天然培养基成分，以克服合成培养基的不足。**普遍的做法是添加5~10%的血清，这样才能维持细胞活力，促进细胞增殖。针对不同的动物细胞，现已开发了多种商业化、个性化的低血清细胞培养基配方，营养成份更加丰富，血清使用量可降低至1～3%，由此可减少了血清等动物来源成份对生物制品安全性的影响。（serumfreemedium，SFM）经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免**污染造成的危害。MEM培养基常用于多种哺乳动物细胞的体外培养。

    所以做过强检的**器还必须进行**效果的验证。一些单位常常忽略了这个重要的问题。国内市售的手提**器，往往仪器指针达到所需的温度，但**物品的实际温度却未达到要求。导致**物品不彻底，影响实验结果。培养基**不彻底，影响培养基的使用及结果判断。因此高压蒸气**器无菌效果的验证是一个必须引起重视的问题。（三）**时的注意事项使用高压蒸气**器时，首先应注意在开放蒸气的同时，排除**器内的冷空气。必须将器内冷空气全部排除后，才可关闭排气孔。假如**器内仍存留有部分空气时，刚压力表上虽已达到了某一压力值，但器内之温度仍未达到相应之度数。存留的空气越多，刚二者相差也越大。差也越大，器内温度不足，**则不彻底。表蒸汽压力与温度的关系蒸汽压力（kPa）密度（kg/cm2）温度（℃）1126表高压蒸汽**器中温度与冷空气排出量的关系蒸汽压力（kPa）所达温度。减血清培养基提高了实验结果的可靠性。中国澳门MEM培养基大概价格多少

MEM培养基含有多种必需氨基酸和维生素，适合细胞培养。四川Ham's F12培养基答疑解惑

    体外培养时，一定的浓度范围条件下，葡萄糖主要经糖酵解循环转化成乳酸来为细胞提供能量。（氨基酸）氨基酸在细胞内的重要生理作用主要体现在以下几个方面：①是蛋白质的基本组成单位，用于合成蛋白质和多肽；②可用于合成某些具有重要生理作用的含氮化合物，如核酸、尼克酰胺等；③某些氨基酸还具有独特的生理作用，如甘氨酸参与生物转化作用，丙氨酸和谷氨酰胺参与细胞内氨的运输等；④可转变成糖类和脂肪，参与氧化供能。细胞所能利用的氨基酸是L型同分异构体，D型氨基酸不能被利用。不同的细胞对氨基酸的需求各异，但有些必需氨基酸是细胞不能自身合成的，必须依靠外源的细胞培养液提供。其余非必需氨基酸，细胞可以自己合成，或通过转氨作用由其他物质转化而来，但是在细胞培养基中添加适当浓度的非必需氨基酸可以减轻细胞在合成方面的负担，提高谷氨酰胺及其它必需氨基酸的利用率。绝大部分细胞对谷氨酰胺有较高的要求，可能因其不仅是细胞的主要氮源，且可作为细胞生长的能源物质和嘌呤、嘧啶核苷酸的前体，另外还可直接作为细胞增殖和产物合成中的蛋白质和多肽的组成成分。在缺少谷氨酰胺时，细胞会生长不良，甚至死亡。由于谷氨酰胺具有多种生理作用。四川Ham's F12培养基答疑解惑