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品名:0.25%胰蛋白酶溶液,1X分类:细胞消化试剂规格:100ML用途:消化试剂,如胰蛋白酶,被用于将粘附细胞从其附着的表面或底物上分离和降解,以及将组织进行游离,以开展原代细胞培养。产品包括2种常用浓度的γ照射猪胰蛋白酶(1:250)以及一种新型非哺乳动物猪胰蛋白酶替代品,称为ThermoScientificHyQTaseTM.HyQTase是一种蛋白水解酶和胶原水解酶的混合超滤溶液,可以快速消化,同时不损伤细胞。其非哺乳动物配方使它适用于无血清应用,不需要失效或对酶抑制剂。此试剂可使细胞被快速分离,形成单细胞悬浮物,保持高细胞活力,并使传代时的变异减至**小。在使用胰酶细胞消化液的过程中要特别注意避免消化液被细菌污染。北京国产胰酶价格查询
胰蛋白酶:(Trypsin)为蛋白酶的一种,是从牛、羊、猪的胰脏提取的一种丝氨酸蛋白水解酶。由223个氨基酸残基组成的单链多肽,主要切割赖氨酸和精氨酸羧基端。按干燥品计算,每1mg中胰蛋白酶的活力不得少于2500单位。作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。终止消化时,可用含有血清培养液终止胰酶对细胞的作用。有些细胞容易消化(如鸡胚原代成纤维细胞)可用胰酶进行消化,可以不加EDTA。 EDTA胰酶哪家便宜胰酶在细胞培养中的作用和在消化酶中的作用?
常用的消化酶有:胰酶:用得**多的是胰酶。一般浓度在0.25-0.5%。作用时间根据干细胞种类、作用温度等因素而变化很大,从几分钟到几十分钟不等。0.25%的胰酶作用于单层贴壁的干细胞,在37度条件下,一般消化1-5分钟就足够了。终止是用血清。主要作用于干细胞间。配制时不能用含钙、镁的平衡液,否则影响活性。保存于-20度。胶原酶:胶原酶是比较少用的,一般是用原代培养时,从组织消化下干细胞。这种方法作用温和,对干细胞损伤较小,但是,价格也较贵。中止同样是用血清。胰酶的质量是影响干细胞的消化的关键因素之一,如果配的比较标准,消化的时候就容易消化,反之就不易消化。还要在你看到消化过头的情况下,如果干细胞下来的比较多了,这时可以连同cmf或pbs加上营养液一起传。营养液中有血清,胰酶遇到血清就会自动终止消化,但这样操作对干细胞是有一定的影响的。对于容易消化的干细胞,加入pbs缓冲液洗去血清或加入胰酶,先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将干细胞消化单细胞。
胰酶中的酚红有哪些作用?酚红在培养基中被用来作为pH指示剂,中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明:酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用。为避免固醇类反应,培养细胞尤其是哺乳类细胞时,建议用不含酚红的培养基。由于酚红干扰检测,在做流式细胞检测时,也会使用不含酚红的培养基或者胰酶。图 2. Phenol red test图片来源网络8、在做细胞凋亡检测时,细胞为什么不能用含有EDTA的胰酶消化?Annexin V(膜联蛋白)是Ca2+依赖的蛋白,EDTA会螯合Ca2+从而影响Annexin V,进而影响结果,因此需选用不含EDTA的胰酶。建议放入培养箱中进行消化,时间可以长一点。随时观察细胞情况,避免消化过度;也可使用细胞刮刀将细胞刮下,后用***吹匀,比消化简单,还可避免使用胰酶带来的伤害。胰酶可在-20℃下保存一年。
胰蛋白酶**初在牛的胰腺中被发现,现在已经扩展到多种来源,包括哺乳动物(人、牛、猪和狗)、无脊椎动物和微生物等。胰蛋白酶的商业化生产主要依赖哺乳动物的胰腺组织提取或者重组表达提取。直接从哺乳动物胰腺组织中提取的缺点是生产成本高,易造成其他结构相近的蛋白污染。重组表达提取胰蛋白酶可以缩短提取时间、降低生产成本,提取的蛋白纯度高,通过优化重组表达体系可以提高蛋白的表达量,这些优势为其在医疗、食品等行业中的应用提供了更多的可能性。[1]折叠胰蛋白酶是一种动物源性产品,是培养细胞过程中常用的酶。贵州EDTA胰酶采购
培养细胞时,胰酶和双抗该怎么用?北京国产胰酶价格查询
胰酶消化贴璧细胞原理胰酶是一种重要的消化酶,它在人体消化过程中起到了关键作用。胰酶主要由胰腺分泌,它能够帮助人体消化食物中的蛋白质、脂肪和碳水化合物等营养物质。而胰酶消化贴壁细胞则是指胰酶在消化过程中与肠道内的贴壁细胞发生作用的机制。胰酶消化贴壁细胞的原理主要包括胰酶的合成、分泌和作用三个过程首先是胰酶的合成。胰酶是由胰腺内的特殊细胞合成的。这些细胞受到胃内食物的刺激后,通过胰腺神经末梢的刺激而开始合成和分泌胰酶。合成的胰酶经过胰管进入小肠。接下来是胰酶的分泌。胰酶的分泌主要通过胰腺分泌液的产生和排泄来实现。当胃内食物通过幽门进入小肠后,小肠壁上的细胞会分泌一种叫做胃腺素的物质,这种物质能够刺激胰腺分泌液的分泌。胰腺分泌液中含有胰酶和其他消化酶,它们经过胰管进入小肠,与食物中的营养物质发生作用。***是胰酶的作用。胰酶主要通过两种方式作用于贴壁细胞。一种方式是直接作用,胰酶直接与贴壁细胞接触并发挥作用。另一种方式是间接作用,胰酶作用于食物中的营养物质,将其分解为小分子物质后再与贴壁细胞发生作用。 北京国产胰酶价格查询
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